趙艷紅　張燕軍　杜晨光　張文廣　李金泉

摘要：以內(nèi)蒙古阿爾巴斯絨山羊?yàn)椴牧?，通過石蠟包埋技術(shù)制作皮膚組織切片，利用Sacpic染色法分析內(nèi)蒙古阿爾巴斯絨山羊3月、5月和10月的毛囊結(jié)構(gòu)，得到了3個時期較為清晰和具有明顯時期特征的形態(tài)學(xué)圖片。為闡明絨山羊絨毛生長發(fā)育提供了組織學(xué)基礎(chǔ)。

關(guān)鍵詞：阿爾巴斯絨山羊；毛囊：組織切片；Sacpic染色

中圖分類號：S827.8⁺2.9⁺1；Q954.539文獻(xiàn)標(biāo)識碼：A文章編號：0439-8114(2009)02-0397-02

毛囊是一個形態(tài)和結(jié)構(gòu)較為復(fù)雜的皮膚附屬器官，它控制著毛發(fā)的生長，其最為顯著的特性就是再生。毛囊大約包含20余種細(xì)胞，這些細(xì)胞在體內(nèi)經(jīng)過復(fù)雜的相互作用，共同參與毛囊生長、發(fā)育、分化與周期性調(diào)節(jié)。不同部位的毛囊在形狀、形態(tài)上有一定的差別，但其基本結(jié)構(gòu)是相同的。絨山羊的皮膚中有兩種毛囊，即初級毛囊和次級毛囊，初級毛囊產(chǎn)粗毛，次級毛囊產(chǎn)絨毛。山羊絨就是山羊被毛中由次級毛囊生長的一種無髓絨毛纖維。絨山羊皮膚和毛囊結(jié)構(gòu)特征不僅是其生物學(xué)特征的重要內(nèi)容，而且對絨毛產(chǎn)量和品質(zhì)有直接的影響。絨毛由次級毛囊產(chǎn)生，特別是次級毛囊的大小直接決定了絨毛的細(xì)度，因此揭示皮膚和毛囊的發(fā)育規(guī)律對絨山羊生產(chǎn)指導(dǎo)具有重要的意義。我們通過制作和觀察皮膚組織石蠟切片，分析了絨山羊毛囊結(jié)構(gòu)，為下一步闡明絨山羊絨毛生長發(fā)育提供了組織學(xué)基礎(chǔ)。

1材料與方法

1．1材料取樣

內(nèi)蒙古阿爾巴斯絨山羊來源于內(nèi)蒙古農(nóng)業(yè)大學(xué)動物園，在體側(cè)靠肩胛部取1cm²的皮樣。

1．2方法

參考文獻(xiàn)[3]制作石蠟切片，采用Sacpic染色法，在顯微鏡下觀察初級毛囊和次級毛囊的形態(tài)，并進(jìn)行比較分析。

1．2．1石蠟切片的制作將固定皮樣用1×PBS緩沖液沖洗，不同梯度濃度的酒精逐級脫水，二甲苯透明，將皮樣放入二甲苯：石蠟(1:1)中38℃過夜，56℃左右浸蠟4～5h后將皮樣放置于融化的石蠟中包埋，待蠟?zāi)毯螅玫秾⑾炐蕹商菪?，焊接于木塊上，切片機(jī)切片厚度為8μm。展片后將切片置于載玻片上，37℃烘箱干燥。

1．2．2Sacpic染色程序天青石藍(lán)溶液8min：Weigerts蘇木素5min；2％沙黃溶液12min：苦味酸／無水乙醇3min；苦味酸／靛藍(lán)洋紅1min。染色之后透明、封片即可進(jìn)行觀察。

2結(jié)果與分析

2．1鏡下觀察毛囊結(jié)構(gòu)的總體特點(diǎn)

絨山羊皮膚切片經(jīng)Sacpic法染色后，在染料作用下，色素顆粒呈黑藍(lán)色，角蛋白為黃色，膠原蛋白為藍(lán)色，內(nèi)根鞘為亮紅色，刷狀末端為橙色，外根鞘為灰綠色，平滑肌和紅細(xì)胞為綠色，初級毛囊髓質(zhì)層呈現(xiàn)為綠色。毛囊在皮膚內(nèi)是很有規(guī)律的呈群狀分布，為長圓形，周圍由較寬的致密結(jié)締組織環(huán)繞形成毛囊群，每個毛囊群中初級毛囊有規(guī)律地在毛囊群的一側(cè)排列，次級毛囊在另一側(cè)。

2．23月份毛囊結(jié)構(gòu)特征

3月份，毛囊群中大部分初級毛囊外根鞘較薄，無紅色內(nèi)根鞘，毛干無髓質(zhì)，有的毛干脫落，留下有外根鞘的空腔：而次級毛囊大部分濃縮成黑色的細(xì)胞團(tuán)，有的甚至消失，所以毛囊群結(jié)構(gòu)松散，不完整(圖1)。

2．35月份毛囊結(jié)構(gòu)特征

5月份為絨山羊毛囊生長旺盛的時期，毛囊群內(nèi)初級、次級毛囊個數(shù)明顯增加，毛囊群也較為清晰、完整。初級毛囊的連結(jié)組織鞘和外根鞘較厚，結(jié)構(gòu)也很致密，部分初級毛囊已長出毛干，次級毛囊也出現(xiàn)了內(nèi)外根鞘(圖2)。

2．410月份毛囊結(jié)構(gòu)特征

10月份初級、次級毛囊的個數(shù)開始減少，毛囊群又變得不太完整，邊界較模糊，不易分辯。部分初級毛囊已無髓質(zhì)，有的毛干也開始脫落：有的次級毛囊已萎縮變小，甚至變成黑色的細(xì)胞團(tuán)。初級、次級毛囊毛乳頭萎縮變小，毛干開始變細(xì)，紅色內(nèi)根鞘向上移動變短，外根鞘變薄(圖3)。

3討論

絨毛的生長呈現(xiàn)周期性變化規(guī)律，在一個年周期內(nèi)，其毛囊活動通常經(jīng)歷興盛期、退行期、休止期。絨山羊因品種的不同，各時期起動、持續(xù)的時間也不同。次級毛囊的活動一般長達(dá)10～11個月，初級毛囊可能更長。毛囊的性狀決定了絨毛的產(chǎn)量和品質(zhì)，毛囊的周期性變化引起了絨山羊絨毛的脫落，因此了解絨毛毛囊的性狀及其周期性變化規(guī)律是提高羊絨產(chǎn)量和品質(zhì)的基礎(chǔ)，很多學(xué)者認(rèn)為絨山羊毛囊的興盛期為4～9月，退行期為10～11月，休止期為12月至次年3月，分別持續(xù)6、2、4個月：但各個時期持續(xù)的時間不同，興盛期經(jīng)歷的時間最長，退行期最短。但在毛囊的退行期，因?yàn)榇蠖鄶?shù)毛囊的活性還很高，因此在退行期絨毛仍在生長，特別是在前期。還是絨毛的快速生長期。同時我們發(fā)現(xiàn)，在毛囊處于休止期的時候已經(jīng)孕育著毛囊的再生，說明休止期的手囊也不是一成不變的。

(責(zé)任編輯王珞)