徐慶華 范冬春

摘要：以火龍果(Hvlocereus undatus)、玉翁(Cephalocereu sen…)和生石花(Lihops pseudotruncateIIa)三種植物的種子為材料，進(jìn)行多肉類植物試管微型花卉培育的研究，最終確定試管微型花卉繁育的適宜培養(yǎng)基是MS，蔗糖3％，脫乙酰吉蘭糖膠0.37％，pH值5.8～6.0，并且通過(guò)在培養(yǎng)基中添加紅、藍(lán)墨水調(diào)配出不同顏色的培養(yǎng)基，增加試管微型花卉的觀賞性。

關(guān)鍵詞：多肉類植物，試管微型花卉，植物組培

多肉類植物是一種外觀別致、形態(tài)奇特、花色艷麗、刺密且尖的花卉，具有不畏干旱、不畏高溫、不擇環(huán)境，生命力極強(qiáng)的特點(diǎn)。試管花卉，也稱天使花房，是通過(guò)植物組織培養(yǎng)技術(shù)，在人工控制的無(wú)菌環(huán)境下，生長(zhǎng)在玻璃或透明塑料容器等相對(duì)密封的空間內(nèi)的一系列迷你微型植物的總稱。本試驗(yàn)開(kāi)展多肉類植物試管微型花卉培育的研究，植物小苗生長(zhǎng)在一個(gè)相對(duì)封閉的微小環(huán)境，方便攜帶運(yùn)輸，易于觀賞，不需要特別的養(yǎng)護(hù)。這種微型花卉因其成本不高、見(jiàn)效快、可操作性強(qiáng)等優(yōu)勢(shì)可作為本科畢業(yè)生自主創(chuàng)業(yè)的新項(xiàng)目，制作成手機(jī)鏈、各種掛飾、擺設(shè)等，還可作為生物教育載體，便于學(xué)生深入了解植物組織培養(yǎng)及生長(zhǎng)發(fā)育的規(guī)律。

材料與方法試驗(yàn)材料與試劑

試驗(yàn)材料選用火龍果(Hyloce reus undatus)、玉翁(Cephalocereu senilli)和生石花(Lithops pseudotruncatella)三種植物的種子。配置MS培養(yǎng)基相關(guān)試劑、蔗糖、脫乙酰吉蘭糖膠(Gelrite)、升汞、吐溫、酒精、紅和藍(lán)墨水、青霉素小藥瓶等均購(gòu)置于哈爾濱博大化學(xué)試劑公司。

種子滅菌

三種種子25℃蒸餾水浸泡24h后，超凈工作臺(tái)上，先用75％酒精溶液浸泡30s，用無(wú)菌水沖洗一遍：再用0.1％的升汞和吐溫混合液浸10min，無(wú)菌水沖洗5次～6次。

種子萌發(fā)及培養(yǎng)基篩選

超凈工作臺(tái)上，滅菌的種子置于高壓滅菌過(guò)的濾紙上吸干水分，最后將無(wú)菌種子接入含MS、1／2MS、1／4MS三種無(wú)菌培養(yǎng)基的錐形瓶(50 mL培養(yǎng)基／150mL錐形瓶)、每瓶10粒種子，在25±1℃、光照2000Lx、16h／d恒溫光照培養(yǎng)并適時(shí)觀察記錄發(fā)芽及生長(zhǎng)狀況。以上培養(yǎng)基均含蔗糖3％、脫乙酰吉蘭糖膠0.2％，pH值5.8～6.0，并用紅藍(lán)墨水調(diào)節(jié)培養(yǎng)基顏色。

無(wú)菌苗轉(zhuǎn)微型試管及馴化培養(yǎng)

無(wú)菌條件下，將錐形瓶中培養(yǎng)一個(gè)月后的無(wú)菌小苗接入含MS培養(yǎng)基(含蔗糖3％、脫乙酰吉蘭糖膠0.37％，pH值5.8～6.0)的微型試管(10mL培養(yǎng)基／20mL微型試管，5mL培養(yǎng)基／10mL微型試管)，用紅和藍(lán)墨水調(diào)色，25±1℃、光照2000Lx、16h／d恒溫光照培養(yǎng)三個(gè)月：之后轉(zhuǎn)入室溫下正常培養(yǎng)。培養(yǎng)過(guò)程中適時(shí)觀察記錄小苗生長(zhǎng)狀況。

結(jié)果與分析種子發(fā)芽率及培養(yǎng)基篩選

無(wú)菌種子接入MS、1／2MS、1／4MS三種無(wú)菌培養(yǎng)基中，每瓶20粒種子，每個(gè)種子接5瓶：種子在25±1℃、光照2000Lx、16h／d恒溫光照培養(yǎng)。培養(yǎng)一周后，MS培養(yǎng)基中種子發(fā)芽率最高，發(fā)芽率統(tǒng)計(jì)結(jié)果見(jiàn)表1：MS中一月齡無(wú)菌苗生長(zhǎng)狀態(tài)最好，見(jiàn)圖1、圖2和圖3。

無(wú)菌苗轉(zhuǎn)微型試管培養(yǎng)

一月齡無(wú)菌小苗接入微型試管恒溫光照培養(yǎng)三個(gè)月；轉(zhuǎn)入室溫下繼續(xù)培養(yǎng)一個(gè)月。培養(yǎng)過(guò)程中小苗生長(zhǎng)狀況見(jiàn)圖4。

結(jié)論

多肉類植物火龍果、玉翁、生石花的種子為材料，試管微型花卉繁育的適宜培養(yǎng)基是MS，蔗糖3％，脫乙酰吉蘭糖膠0.2％，pH值5.8～6.0。成品保持每天至少6h的光照(普通燈光，日光管)，無(wú)需其它管理，目前結(jié)果顯示能正常生長(zhǎng)五個(gè)月，無(wú)霉菌污染，是一種綠色觀賞佳品。

培養(yǎng)基的固化劑選用透明度高、韌性強(qiáng)的脫乙酰吉蘭糖膠(Gelrite)，又名植物凝膠(Phytagel)，用紅、藍(lán)墨水調(diào)配出色彩鮮艷的凝膠狀透明營(yíng)養(yǎng)基，培育的試管花卉既可觀葉又可觀根，增強(qiáng)了微型試管花卉的觀賞價(jià)值。