秦元華,鄭莉莉,戴曉冬,任一鑫,陳玉鳳,崔 昱
(1.大連醫(yī)科大學(xué)寄生蟲學(xué)教研室,遼寧 大連116044; 2.大連市疾病控制中心地病科,遼寧 大連116021)
寄生蟲病遍及全球,在人類傳染病中占有重要地位,尤其在熱帶與亞熱帶的發(fā)展國家,其在人群中發(fā)病率與病死率很高,嚴(yán)重危害人類的健康,影響社會和經(jīng)濟(jì)的發(fā)展,并且成為人們極為關(guān)心的全球性公共衛(wèi)生問題。中國幅員廣闊,自然資源豐富,天然的自然生態(tài)環(huán)境影響著人體、動物和植物寄生蟲的孳生和寄生蟲病的流行[1,2],其中中國人體最為重要的寄生蟲病之一絲蟲病,曾經(jīng)嚴(yán)重危害中國幾個世紀(jì)人體的健康和生命安全。為了有效地控制和消滅絲蟲病,WHO于上世紀(jì)70年代建議進(jìn)行各型馬來絲蟲感染長爪沙鼠的研究,供研究人體絲蟲的分類學(xué)、分子生物學(xué)和免疫學(xué)等特性,以獲取防治絲蟲病資料。1974年遵義醫(yī)學(xué)院寄生蟲學(xué)教研室在中國創(chuàng)建成第一個馬來絲蟲——長爪沙鼠動物模型[3]。鑒于中國生態(tài)地貌復(fù)雜,不同地區(qū)馬來絲蟲病流行特點和臨床表現(xiàn)明顯迵異,大連醫(yī)科大學(xué)寄生蟲學(xué)教研室在此基礎(chǔ)上于1989年經(jīng)過一系列研究發(fā)展,建成七個不同流行地區(qū)周期型馬來絲蟲動物蟲庫[4]。2006~2008年大連醫(yī)科大學(xué)寄生蟲學(xué)教研室二期加盟中國疾病預(yù)防控制中心寄生蟲病預(yù)防控制所“中國寄生蟲種質(zhì)資源建設(shè)的平臺”建設(shè)課題中,將該蟲庫的發(fā)展建設(shè)及研究提高到新的層次和水平。本文就大連醫(yī)科大學(xué)寄生蟲學(xué)教研室多年來進(jìn)行中國馬來絲蟲動物蟲庫發(fā)展,近年來與中國疾病預(yù)防控制中心寄生蟲病預(yù)防控制所進(jìn)行馬來絲蟲動物蟲庫種質(zhì)資源進(jìn)行平臺建設(shè),以及該蟲庫在中國寄生蟲種質(zhì)資源平臺中展望做一論述,以進(jìn)一步加強(qiáng)中國絲蟲種質(zhì)資源的保護(hù)和科學(xué)研究。
遵義醫(yī)學(xué)院寄生蟲學(xué)教研室于1973~1974年在中國貴州省遵義市首先研制成第一個周期型馬來絲蟲——長爪沙鼠動物模型,并于1988~1989年大連醫(yī)科大學(xué)寄生蟲學(xué)教研室在遼寧省大連市建立了中國七個不同地區(qū)(貴州荔波地區(qū)、貴州獨(dú)山地區(qū)、四川樂山地區(qū)、湖北谷城地區(qū)、安徽涇縣地區(qū)、浙江安吉地區(qū)以及福建建陽地區(qū))的周期型馬來絲蟲蟲庫。該蟲庫目前是中國研究周期型馬來絲蟲生物學(xué)及絲蟲病的主要中心之一。本蟲庫目前所保存及轉(zhuǎn)種的馬來絲蟲蟲株是經(jīng)專家們論證后而確立的,這七個不同地區(qū)蟲株代表中國所廣泛流行的馬來絲蟲病一定的地域特點和生態(tài)習(xí)性,本蟲庫所能提供的用于研究絲蟲的材料可以用于研究和分析中國不同地區(qū)馬來絲蟲病人所表現(xiàn)出來的不同的臨床體征及特點;中國不同地區(qū)馬來絲蟲所具有的不同生物學(xué)特性以及不同地區(qū)絲蟲蚊媒的差異。尤其重要的是在2005年中國消滅絲蟲病后,保留和繼續(xù)深入研究中國的絲蟲物種資源和絲蟲基因資源有著極其重要和深遠(yuǎn)的意義。
目前蟲庫保留著中國七個不同地區(qū)馬來絲蟲株,他們分別是:貴州荔波株;貴州獨(dú)山株;四川樂山株;安徽涇縣株;湖北谷城株;浙江安吉株以及福建建陽株。
1.2.1 貴州荔波株:大連醫(yī)科大學(xué)寄生蟲學(xué)教研室于1974年在貴州省荔波縣,從當(dāng)?shù)夭∪宿D(zhuǎn)種而來。
1.2.2 貴州獨(dú)山株:大連醫(yī)科大學(xué)寄生蟲學(xué)教研室于1974~1975年在貴州省獨(dú)山縣,從當(dāng)?shù)亟z蟲病人轉(zhuǎn)種而來。
1.2.3 四川樂山株:大連醫(yī)科大學(xué)寄生蟲學(xué)教研室于1985年在四川樂山地區(qū)縣防疫站合建。
1.2.4 安徽涇縣株:大連醫(yī)科大學(xué)寄生蟲學(xué)教研室于1987年從安徽涇縣血檢微絲蚴陽性病人,請到大連轉(zhuǎn)種沙鼠而建立。
1.2.5 湖北谷城株:大連醫(yī)科大學(xué)寄生蟲學(xué)教研室于1987年從湖北省寄生蟲病研究所引建。
1.2.6 浙江安吉株:大連醫(yī)科大學(xué)寄生蟲學(xué)教研室于1987年在浙江省寄生蟲病研究所,從安吉縣一個絲蟲病人采血建立。
1.2.7 福建建陽株:大連醫(yī)科大學(xué)寄生蟲學(xué)教研室于1985年在福建省寄生蟲病研究所,從建陽縣一個絲蟲病人血中轉(zhuǎn)種而來。
本蟲庫是中國目前最大、最為完整,也是唯一的一個中國周期型馬來絲蟲庫。這個蟲庫目前有專人負(fù)責(zé)保種、轉(zhuǎn)種及其管理工作。長爪沙鼠(又稱沙土鼠)是大連醫(yī)科大學(xué)寄生蟲學(xué)教研室于上世紀(jì)70年代自中國內(nèi)蒙古草原捕捉,經(jīng)實驗室馴化,用大連醫(yī)科大學(xué)寄生蟲學(xué)教研室自己配制的專門飼料進(jìn)行飼養(yǎng)、繁殖。七個地區(qū)的馬來絲蟲陽性長爪沙鼠采用分室分籠飼養(yǎng),以免蟲種混合雜交。每個地區(qū)的陽性沙鼠維持約20~30只,每只沙鼠帶蟲(成蟲)負(fù)荷約為30~100條。平均每個蟲株每年至少傳代1~2次。接種沙鼠一般采用雄性沙鼠,鼠齡為1~2月出生鼠,腹腔接種感染期絲蟲三期蚴約200條。通常于感染接種后3個月,檢查小鼠腹腔液,檢查有無微絲蚴,以確診感染是否成功。
該蟲庫用于感染的蚊媒——中華按蚊,于上世紀(jì)70年代部分引自中國疾病預(yù)防控制中心寄生蟲病預(yù)防控制所,部分與貴州獨(dú)山縣流行區(qū)當(dāng)?shù)匕次没旌想s交馴化飼養(yǎng),并于上世紀(jì)90年代末期與大連地區(qū)當(dāng)?shù)匕次没旌想s交。感染按蚊由專人飼養(yǎng)維持。養(yǎng)蚊室要求恒溫恒濕,通常室溫要求28℃~30℃,濕度要求在至少65%以上,以保證蚊媒正常生長發(fā)育,最終有利于絲蟲三期蚴發(fā)育成熟。
待蚊媒絲蟲三期蚴發(fā)育成熟后,采用改良貝氏分離法[5]分離感染期幼蟲,進(jìn)行馬來絲蟲感染接種。
寄生蟲病是一類嚴(yán)重危害人類健康和阻礙社會經(jīng)濟(jì)發(fā)展的公共衛(wèi)生問題。在全球范圍內(nèi),特別是在熱帶和亞熱帶地區(qū),寄生蟲所引起的疾病一直是全社會普遍存在的公共衛(wèi)生問題。隨著全球社會經(jīng)濟(jì)和現(xiàn)代醫(yī)學(xué)防治水平的提高,曾經(jīng)一度猖獗的寄生蟲感染及寄生蟲病逐漸在人群中被控制和消滅,與此同時,一些再生性寄生蟲病以及食源性寄生蟲病呈上升趨勢,并向城市蔓延擴(kuò)散[6-10]。因此,寄生蟲病仍然是一個重要的公共衛(wèi)生問題。
由于全球經(jīng)濟(jì)一體化的發(fā)展和世界各國文化經(jīng)濟(jì)發(fā)展進(jìn)程加速,許多國家越來越重視本國生物物種資源的保護(hù)和合理開發(fā)利用,保存寄生蟲生物物種資源和基因資源變得越來越重要。尤其是有些發(fā)達(dá)國家寄生蟲病已得到很好的控制,仍然保留著寄生蟲標(biāo)本和某些種株資源[11,12]。寄生蟲種質(zhì)資源共享平臺的構(gòu)建正是適應(yīng)這種學(xué)科發(fā)展的需求而由有關(guān)專家與學(xué)者提出來的[13]。鑒于寄生蟲在整個生命科學(xué)研究中,尤其是在動物進(jìn)化和分類學(xué)中的重要地位,各國科學(xué)家及學(xué)者視其在動物生命進(jìn)程中不可缺少的一個重要生物研究資源。同時,寄生蟲蟲種資源的保護(hù)和利用,可促進(jìn)寄生蟲學(xué)學(xué)科發(fā)展、增強(qiáng)寄生蟲病防治科技創(chuàng)新能力和國際競爭力的重要措施,也符合世界各國及中國社會進(jìn)步和經(jīng)濟(jì)發(fā)展的需求[14]。
寄生蟲活體保藏技術(shù)是研究人畜共患寄生蟲病必不可少的工作基礎(chǔ)?;铙w保藏技術(shù)可為寄生蟲的生物學(xué)、分類學(xué)、生態(tài)學(xué)和寄生蟲病的診斷學(xué)、流行病學(xué)等研究提供服務(wù),在寄生蟲基因疫苗的研究、寄生蟲藥物篩選研究及寄生蟲病的免疫診斷都具有重要的意義。
絲蟲病是中國最為嚴(yán)重的五大寄生蟲病之一,在山東、河南以及江蘇等17個省市、自治區(qū)都曾有流行。1999年11月WHO制定了全球消除絲蟲病防治活動的時間表[15],經(jīng)過幾代人的努力,于2007 年經(jīng)世界衛(wèi)生組織認(rèn)證確認(rèn)中國實現(xiàn)了全國消除絲蟲病[16]。伴隨著中國絲蟲病的基本消滅,保護(hù)絲蟲物種和基因資源則變得越來越重要。為推動中國絲蟲種質(zhì)資源的共享與應(yīng)用,本蟲庫于2006~2008年加盟科技部自然資源平臺項目,見表1、2。
歷來世界各國都非常重視寄生蟲資源的收藏和保存,其中開展寄生蟲種質(zhì)資源收集、整理工作最早的國家是美國[14],其他各國相繼建立種質(zhì)資源共享平臺以及相關(guān)的網(wǎng)站[17,18],為全球寄生蟲病的相關(guān)研究提供服務(wù)。中國各專業(yè)研究機(jī)構(gòu)和教學(xué)單位對寄生蟲種質(zhì)資源的收集和保存也做了大量的工作,為全國寄生蟲蟲種資源的共享奠定了基礎(chǔ)[19-22]。
表1 Ⅰ期項目內(nèi)容(2005DKA21104,2007)
表2 Ⅱ期項目內(nèi)容(2005DKA21100,2008)
進(jìn)一步加強(qiáng)寄生蟲(包括馬來絲蟲)種質(zhì)資源與蟲庫的保存和利用,是當(dāng)前中國許多寄生蟲病防治后期疫情監(jiān)測等方面的需要,也是進(jìn)一步探討相關(guān)寄生蟲生物學(xué)、分子生物學(xué)和免疫學(xué)等方面研究可持續(xù)發(fā)展的需要。中國不同種類活體寄生蟲的保藏及其所建蟲庫長期穩(wěn)定的發(fā)展和維持,是一項利國利民的長期戰(zhàn)略任務(wù)。
如何促進(jìn)本蟲庫與國家種質(zhì)資源平臺發(fā)展建設(shè)?①首先亦為最重要的一點是需要國家科技部種質(zhì)資源平臺及相關(guān)科研院所提供其大量財力支持和必要的物質(zhì)與設(shè)備資源。②每個承擔(dān)平臺項目科研院所的主管部門,在積極配合其下屬單位完成這一艱巨而光榮的任務(wù)同時,還應(yīng)在人員配備,必要的設(shè)備資源滿足具體部門的要求,主管領(lǐng)導(dǎo)要重視這項任務(wù),要創(chuàng)造條件為相關(guān)技術(shù)和管理人員進(jìn)行定期的專業(yè)技術(shù)培訓(xùn),特別需要指出的是應(yīng)盡快培養(yǎng)中國傳統(tǒng)與現(xiàn)代寄生蟲學(xué)分類研究人才,進(jìn)一步鞏固和加強(qiáng)寄生蟲活體保存管理和技術(shù)隊伍的建設(shè);承擔(dān)具體任務(wù)的部門要完善和管理本教研室現(xiàn)有寶貴的各類蟲種資源、標(biāo)本資源和生物材料資源,并對這些生物資源進(jìn)行標(biāo)準(zhǔn)化管理、數(shù)字化描述,由專人專項負(fù)責(zé),實現(xiàn)在全國范圍內(nèi)建立統(tǒng)一規(guī)范的生物體實物資源庫和信息化數(shù)據(jù)管理庫。③每個從事生物物種保藏的科研人員應(yīng)高度重視對本地區(qū)具有特色的蟲種資源進(jìn)行采集和保藏,尤其是對那些極具地域特征的生物種群和遺傳物質(zhì)資源的采集工作;④每個參與平臺項目的科研人員應(yīng)充分利用已建立國內(nèi)外生物資源基礎(chǔ)平臺,加強(qiáng)科研信息的交流與學(xué)習(xí),及時補(bǔ)充或完善本地區(qū)生物種質(zhì)資源平臺。⑤與此同時,每個科研單位應(yīng)盡早建立和開通相關(guān)專題的生物資源網(wǎng)絡(luò)平臺,加強(qiáng)與世界各國學(xué)者的科研交流,實現(xiàn)全球化生物種質(zhì)資源共享和利用。
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