朱麗萍，孫建全，顏世敢

（1.山東輕工業(yè)學(xué)院食品與生物工程學(xué)院，濟(jì)南 250353；2.山東省農(nóng)科院畜牧獸醫(yī)研究所，濟(jì)南 250100）

三聚氰胺的毒性毒理及檢測最新進(jìn)展

朱麗萍1，孫建全2，顏世敢2

（1.山東輕工業(yè)學(xué)院食品與生物工程學(xué)院，濟(jì)南 250353；2.山東省農(nóng)科院畜牧獸醫(yī)研究所，濟(jì)南 250100）

三聚氰胺是用途廣泛的化工原料，含氮量高達(dá)66%，被不法分子作為蛋白替代品添加到乳品、飼料中，導(dǎo)致嬰幼兒、寵物患泌尿結(jié)石甚至死亡。本文對三聚氰胺及其同系物的理化性質(zhì)、代謝、毒性毒理、檢測最新進(jìn)展全面綜述，并對其添加原因進(jìn)行初步分析。

三聚氰胺；同系物；毒理；檢測；色譜；質(zhì)譜

0 引 言

2008年8月“三鹿牌”奶粉因含三聚氰胺導(dǎo)致6244名嬰兒患泌尿結(jié)石6名死亡，一時(shí)國人“聞奶色變”。這場三聚氰胺風(fēng)暴使中國的乳品業(yè)蒙受致命打擊，也使食品安全問題再次引起人們高度關(guān)注。本文從三聚氰胺的理化性質(zhì)、代謝、毒性毒理、檢測方法等最新進(jìn)展全面綜述，使讀者對三聚氰胺有一個(gè)正確的認(rèn)識(shí)。

1 三聚氰胺的理化性質(zhì)、用途

三聚氰胺（Melamine）是三嗪類含氮雜環(huán)有機(jī)化合物，分子式為C3N6H6或C3N3(NH2)3，分子量126.12。 為純白色單斜棱晶體，無味，密度為1.573 g/cm3，常壓熔點(diǎn)為354℃，快速加熱至300℃升華。溶于熱水，微溶于冷水，極微溶于熱乙醇，不溶于醚、苯和四氯化碳，可溶于甲醇、甲醛、乙酸、熱乙二醇、甘油、吡啶等。一般情況下較穩(wěn)定，高溫下可能會(huì)分解釋放出氰化物。與鹽酸、硫酸、硝酸、乙酸、草酸等形成三聚氰胺鹽。遇強(qiáng)酸或強(qiáng)堿溶液水解，胺基被羥基取代，生成三聚氰酸二酰胺(ammeline)、三聚氰酸一酰胺(ammelide)、三聚氰酸(cyanuric acid)，它們屬同系物。

三聚氰胺是一種用途廣泛的有機(jī)化工原料和中間品，主要用于生產(chǎn)樹脂、涂料、塑料、黏合劑、阻燃劑等物質(zhì)。

三聚氰胺被不法分子作為蛋白質(zhì)替代品添加到乳品、飼料中，基于它滿足以下條件：形態(tài)酷似蛋白粉，無異味，含氮量高達(dá)66%，遠(yuǎn)高于普通蛋白質(zhì)的含氮量，慢性毒性不容易被發(fā)現(xiàn)，添加該品可引起凱氏定氮法測得的表觀上蛋白質(zhì)質(zhì)量分?jǐn)?shù)提高，產(chǎn)品質(zhì)量“合格”，同時(shí)大幅降低生產(chǎn)成本。

2 三聚氰胺的毒性、毒理及代謝動(dòng)力學(xué)

動(dòng)物實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，三聚氰胺屬低毒和實(shí)際無毒級物質(zhì)，但長期或反復(fù)大量攝入導(dǎo)致產(chǎn)生腎與膀胱結(jié)石。目前尚缺乏人體研究的資料。2起案例證實(shí)了三聚氰胺的毒性。2007年中國出口美國的寵物食品中摻雜6.6%三聚氰胺導(dǎo)致約4000只貓狗死亡[1]。中毒的貓、狗表現(xiàn)為食欲下降、嘔吐、多尿、多飲和嗜睡，氮質(zhì)血癥，結(jié)晶尿，管狀壞死和血管周圍纖維增生和炎性反應(yīng)[2]。2008年8月，中國三鹿牌嬰幼兒奶粉含三聚氰胺造成6244名嬰幼兒患腎、輸尿管結(jié)石病，6名腎衰竭死亡，患兒多為雙腎多發(fā)性結(jié)石和輸尿管結(jié)石，90%以上為尿酸鹽結(jié)石。

2.1 急性毒性

小鼠經(jīng)口的LD50為4550 mg/kg，小鼠經(jīng)腹腔注射LD50為800 mg/kg。 雄性大鼠經(jīng)口LD50為3160 mg/kg，雌性大鼠經(jīng)口LD50為3850 mg/kg[3]，大鼠急性吸入的LD50為3248 mg/m3。 家兔經(jīng)皮LD50為1000 mg/kg。 對家兔、豚鼠和人無眼刺激作用。根據(jù)現(xiàn)行食品急性毒性劑量分級標(biāo)準(zhǔn)，三聚氰胺屬輕微毒性或?qū)嶋H無毒[2]。小鼠經(jīng)口給予20 000 mg/kg三聚氰胺，9 h后出現(xiàn)不安、呼吸急促，死亡。死亡動(dòng)物輸尿管中均有大量晶體蓄積，部分動(dòng)物腎臟被膜有一層晶體[4]。

2.2 慢性毒性

F344雄性大鼠連續(xù)飼喂含1%、3%三聚氰胺的飼料36周，結(jié)石發(fā)生率分別為70%和100%，膀胱癌的發(fā)生率分別為5%和79%，膀胱乳突狀瘤的發(fā)生率為5%和63%，3%劑量組輸尿管癌和輸尿管乳突狀瘤發(fā)生率分別為5%和16%。動(dòng)物長期大劑量攝入三聚氰胺能引起生殖泌尿系統(tǒng)結(jié)石及誘發(fā)膀胱癌和輸尿管癌[5]。

三聚氰胺對動(dòng)物的毒性呈種屬差異性，這與動(dòng)物的飲食習(xí)性不同造成尿液pH值差異有關(guān)。肉食性動(dòng)物貓、狗的酸性尿液促進(jìn)三聚氰胺和三聚氰酸形成結(jié)晶。三聚氰胺對雄性動(dòng)物毒性大于雌性動(dòng)物。斷奶大鼠攝入等量的三聚氰胺時(shí)結(jié)石發(fā)生率高于成年大鼠。結(jié)石發(fā)生率與三聚氰胺的攝入量呈明顯的量-效關(guān)系，泌尿道中三聚氰胺呈過飽和時(shí)更易發(fā)生結(jié)石。

2.3 致癌性

多數(shù)認(rèn)為三聚氰胺致癌是結(jié)石對粘膜的刺激，不是三聚氰胺或其代謝產(chǎn)物與膀胱上皮細(xì)胞之間的相互作用引起[6]。三聚氰胺是間接的非遺傳毒性致癌物。國際癌癥研究機(jī)構(gòu)(IARC)認(rèn)為，有充足證據(jù)表明三聚氰胺可導(dǎo)致實(shí)驗(yàn)動(dòng)物發(fā)生膀胱結(jié)石，在這種條件下對實(shí)驗(yàn)動(dòng)物具有致癌性，但三聚氰胺對人類的致癌性證據(jù)不足，將三聚氰胺列為Ⅲ級致癌物，即現(xiàn)有證據(jù)不能對三聚氰胺對人類的致癌性進(jìn)行分級評價(jià)。

2.4 協(xié)同致病性

大鼠經(jīng)口給予三聚氰酸的LD50為7700 mg/kg。三聚氰胺和三聚氰酸本身的毒性很小，但二者聯(lián)合使用時(shí)毒性增加。成年貓單獨(dú)給予0.5%和1%的三聚氰胺11 d和0.2%，0.5%，1%的三聚氰酸3～4 d未見明顯腎功能損害，而聯(lián)合給予0.2%，0.5%，1%三聚氰胺和三聚氰酸48 h出現(xiàn)急性腎功能衰竭，尿和腎中均見扇型折光晶體[7]。魚、豬單獨(dú)給予三聚氰胺和三聚氰酸 (400 mg/kg，3 d)時(shí)呈低毒性，相同劑量同時(shí)給予時(shí)腎結(jié)石大量形成，腎毒性增加[8]。在三聚氰胺的加工過程中混入三聚氰酸，或三聚氰胺進(jìn)入機(jī)體代謝產(chǎn)生的少量三聚氰酸都會(huì)加劇三聚氰胺的毒性。

2.5 代謝動(dòng)力學(xué)

三聚氰胺在機(jī)體內(nèi)的代謝屬不活潑代謝或惰性代謝，以原形或同系物形式從尿中排出。三聚氰胺在膀胱中的分布水平最高，然后是腎臟和血漿。三聚氰胺在大鼠體內(nèi)經(jīng)24小時(shí)90%以原形從尿中排出，尿中半衰期3 h[9]。豬靜脈注射三聚氰胺，血漿中的半衰期為4.04 h[10]。大鼠、狗和人群志愿者經(jīng)口攝入三聚氰酸后，均迅速被吸收和清除，以原形從尿中排出。

2.6 毒理學(xué)

三聚氰胺進(jìn)入人體、哺乳動(dòng)物胃后，在酸性環(huán)境中部分水解，胺基逐步被羥基取代水解生成三聚氰酸二酰胺、三聚氰酸一酰胺、三聚氰酸。當(dāng)三聚氰胺和三聚氰酸同時(shí)存在時(shí)，二種分子的羥基與氨基之間形成水合鍵，將二者連接起來，這種連接反復(fù)進(jìn)行，最終形成不溶于水的網(wǎng)格結(jié)構(gòu)復(fù)合物，并沉積下來，形成結(jié)晶，阻塞輸尿管，最終導(dǎo)致腎臟衰竭。因三聚氰胺死亡的寵物貓、狗體內(nèi)發(fā)現(xiàn)了結(jié)晶的電子顯微鏡照片，體外實(shí)驗(yàn)也證實(shí)三聚氰胺和三聚氰酸的澄清溶液混合后瞬間反應(yīng)形成結(jié)晶[11]。計(jì)算機(jī)模擬發(fā)現(xiàn)，三聚氰胺與三聚氰酸通過分子間氫鍵形成網(wǎng)狀結(jié)構(gòu)的三聚氰胺氰尿酸鹽[12]。三聚氰胺致結(jié)石可能與其代謝產(chǎn)物三聚氰酸的存在有關(guān)[1,7,13]。

三聚氰酸二酰胺和三聚氰酸一酰胺的動(dòng)物或人體毒代動(dòng)力學(xué)資料未見報(bào)道。3種同系物與三聚氰胺的毒性差異尚不清楚。美國FDA假定這4種物質(zhì)有同等的毒性效應(yīng)，將它們統(tǒng)稱為三聚氰胺相關(guān)物質(zhì)(MARCs)進(jìn)行總體毒理學(xué)評定。

3 三聚氰胺檢測方法

三聚氰胺既不是藥品也不是食品添加劑，正常情況下不應(yīng)該出現(xiàn)在食品或飼料中。2007年以前國際上沒有飼料和食品中三聚氰胺的檢測方法和檢測標(biāo)準(zhǔn)。2007年5月，美國FDA在發(fā)生寵物糧污染三聚氰胺后相繼公布了GC-MS，HPLC，LC-MS檢測流程，用于檢測食品、飼料原料中的三聚氰胺及其相關(guān)物質(zhì)[14，15]。2007年6月4日，我國農(nóng)業(yè)部發(fā)布了《飼料中三聚氰胺的測定》農(nóng)業(yè)行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)，建立了HPLC和GC-MS法測定飼料中的三聚氰胺[16]。2008年10月7日《原料乳與乳制品中三聚氰胺檢測方法》國家標(biāo)準(zhǔn)頒布，規(guī)定了原料乳及含乳制品的HPLC、LC-MS/MS、GC-MS三種檢測三聚氰胺方法[17]。2008年10月15日發(fā)布了實(shí)用的國家標(biāo)準(zhǔn)《原料乳中三聚氰胺快速檢測-液相色譜法》，使用離子交換柱，樣品前處理和HPLC檢測時(shí)間共約30 min[18]。除奶（奶粉、液態(tài)奶）、飼料外，魚[15]、肉[19]、蛋[24]、含乳蛋肉的制品、面粉[20]、動(dòng)物組織器官[21]等均有檢測出三聚氰胺的報(bào)道。

實(shí)際檢測中發(fā)現(xiàn)某些樣品雖然沒有檢出三聚氰胺，但可以發(fā)現(xiàn)其類似物。我國只檢測三聚氰胺，而美國、日本等國要求同時(shí)檢測三聚氰胺及其同系物。胺和酸為二類化合物，很難同時(shí)分析，二次檢測成本和時(shí)間不容許。美國FDA采用ZIC-HILIC色譜柱pH梯度和濃度梯度LC-MS法實(shí)現(xiàn)了二者的同時(shí)檢測。

三聚氰胺的檢測方法有色譜法、色譜-質(zhì)譜聯(lián)用法、ELISA、毛細(xì)管電泳法、改良凱氏定氮法、近紅外吸收法等。

3.1 液相色譜法（HPLC）

從三聚氰胺的結(jié)構(gòu)看，可以用氣相色譜（GC）、液相色譜法（HPLC）對其檢測。HPLC設(shè)備價(jià)格較低，靈敏度達(dá)1～2 mg/kg，適合大批量的檢測，便于乳品生產(chǎn)加工企業(yè)普及，因而是我國的主流檢測方法。缺點(diǎn)是樣品需前處理，陽性結(jié)果無法定性分析，色譜柱需定期維護(hù)、更換。

HPLC檢測的一般步驟：蛋白質(zhì)沉淀——三聚氰胺提取——凈化——HPLC分析。首先樣品中加入三氯乙酸、醋酸鉛、醋酸鋅、亞鐵氰化鉀等蛋白質(zhì)沉淀劑來除去蛋白質(zhì)，然后以極性溶劑或緩沖液利用液液萃取、超聲輔助提取、勻質(zhì)提取等提取技術(shù)提取三聚氰胺，樣品提取后再用強(qiáng)陽離子交換(SCX)、固相萃取(SPE)法進(jìn)一步凈化以提高HPLC檢測的靈敏度，常用的陽離子交換固相萃取柱有Oasis MCX柱、Strata-X-C柱、SCX柱和Cleanert PCX柱等。師彥平利用氧化鋯中空纖維柱對乳制品中三聚氰胺進(jìn)行同步富集與萃取，然后用GC-MS法快速測定乳制品中三聚氰胺含量，檢出限達(dá)0.001 mg/L。

HPLC檢測通常有3種模式：（1）離子對模式。三聚氰胺及其同系物為強(qiáng)極性化合物，在色譜柱上幾乎無保留，難以分離和檢測。為延長其在色譜柱上的保留時(shí)間，一般在流動(dòng)相中加入離子對試劑，與三聚氰胺形成中性離子對來改善分離條件，獲得穩(wěn)定的保留。國內(nèi)多采用庚烷-磺酸鈉、辛烷-磺酸鈉、己烷-磺酸鈉等離子對試劑。離子對色譜法操作簡單，用常規(guī)的C18和C8柱在普通的HPLC儀上接紫外檢測器(UVD)或二極管陣列檢測器(DAD)可分析，保留時(shí)間較長，靈敏度較高。缺點(diǎn)是：平衡時(shí)間長，離子對試劑對環(huán)境不利，對色譜柱及色譜系統(tǒng)不利，不能接質(zhì)譜，接質(zhì)譜時(shí)改用揮發(fā)性的離子對試劑。HPLC反相色譜柱有Agilent TC-C18柱、Symmetry C18柱、Agilent Zorbax SB C18柱、ZORBAX Eclip se XDB-C18柱、Agilent Eclip se XDB-C8 柱、Zorbax Rx-sil C8 柱等。（2）強(qiáng)陽離子交換模式。三聚氰胺為陽離子，可采用陽離子交換法檢測。我國國標(biāo)就采用離子交換色譜法來檢測三聚氰胺。優(yōu)點(diǎn)是分離檢測速度快，分離效果好，采用無機(jī)鹽為流動(dòng)相，不使用離子對試劑。缺點(diǎn)是不能上質(zhì)譜?？蛇x擇的陽離子色譜柱有Dionex的IonPac CS17柱、SCX色譜柱及Grace-Vadyc的allsep柱、CS12A柱?；旌现腥毡举Y生堂的SCX和C18混合柱、戴安的PCX-100及PCX-500陽離子交換和反相混合柱。（3）親水性色譜法（HILIC）?？赏瑫r(shí)檢測三聚氰胺和三聚氰酸。親水色譜柱代表為Merck-Sequant的ZIC-HILIC柱、戴安公司HILIC和離子交換混合柱Acclaim Mixed-Mode WAX-1柱。流動(dòng)相一般為乙腈與乙酸銨或醋酸銨的緩沖溶液，乙腈濃度越大，保留時(shí)間越長。優(yōu)點(diǎn)是色譜的流動(dòng)相與質(zhì)譜兼容，可進(jìn)行HPLC和HPLC-MS對照。美國FDA采用該法，國內(nèi)極少用。

3.2 色譜-質(zhì)譜聯(lián)用法

質(zhì)譜法具有定性的優(yōu)勢，是權(quán)威質(zhì)檢機(jī)關(guān)確認(rèn)三聚氰胺的首選方法，樣品先經(jīng)色譜分析再經(jīng)質(zhì)譜分析。色譜-質(zhì)譜聯(lián)用法有LC-MS、氣相色譜-質(zhì)譜法（GC-MS）、液相色譜-質(zhì)/質(zhì)法（LC-MS/MS）、氣相色譜-質(zhì)/質(zhì)法（GC-MS/MS）。 LC-MS對樣品的前處理與HPLC基本相同，GC-MS的樣品前處理相對簡單，樣品提取后不需凈化，但需衍生。LC-MS/MS的定量限 為0.01 mg/kg，GC-MS的 定 量 限 為0.05 mg/kg，GC-MS/MS的定量限為0.005 mg/kg。

LC-MS法：選用親水性的C18色譜柱，能延長保留時(shí)間。采用HILIC柱則保留時(shí)間更長，且HPLC和HPLC-MS兼容。 與GC-MS和HPLC相比，LC-MS的靈敏度最高，可對陽性樣品進(jìn)行確證，適于食品中三聚氰胺的快速定量分析。但設(shè)備昂貴，操作人需要高的質(zhì)譜技術(shù)水平和操作經(jīng)驗(yàn)，難以在基層推廣。

GC-MS： 靈敏度介于HPLC和LC-MS/MS間[14]。樣品需硅烷化衍生，繁瑣費(fèi)時(shí)，但能有效去除基質(zhì)干擾，降低假陽性率，方法穩(wěn)定[22]。GC-MS法可同時(shí)分析三聚氰胺及三聚氰酸，定量的同時(shí)還能確定被檢測成分的分子式。儀器有Agilent 6890N GC-5975B MS聯(lián)用儀,PerkinElmer Clarus 600T GC/MS聯(lián)用儀等。國外GC-MS比較成熟，美國FDA對寵物食品、植物蛋白粉等采用GC-MS法檢測。國內(nèi)較少采用。

LC-MS/MS：美國FDA建立了基于HILIC的LCMS/MS法，實(shí)現(xiàn)復(fù)雜食品基質(zhì)中痕量三聚氰胺的定量檢測，檢測鯰魚中三聚氰胺殘留的靈敏度達(dá)0.01mg/kg，符合率為76.3%[15]。 儀器有Agilent HP1100 HPLC-三重四極桿質(zhì)譜聯(lián)用儀、Thermo Scientific的Accela HPLC-TSQ Quantum Ultra三重四極桿質(zhì)譜儀、Agilent 6410 HPLC-三重四極桿質(zhì)譜儀。

3.3 ELISA

ELISA檢測設(shè)備便宜、操作簡單，高通量檢測，可用于三聚氰胺的快速、定量檢測，檢測范圍為20-500 ng/ml，檢測時(shí)間不超過2小時(shí)，能滿足地方質(zhì)檢部門、小型食品企業(yè)及奶站的需求。缺點(diǎn)是ELISA只能定量檢測，不能定性分析，檢測過程中有假陽性。商品化的三聚氰胺ELISA檢測試劑盒的生產(chǎn)廠家有Beacon Analytical Systems，Abraxis，Strategic Diagnostics等 。 美 國FDA驗(yàn) 證 發(fā) 現(xiàn)Abraxis的Melamine Plate kit檢測靈敏度為9 μg/L，Strategic Diagnostics的EnviroGard Triazine Plate kit的靈敏度為1.5 g/L[23]。中國農(nóng)科院也研制出ELISA檢測試劑盒。

3.4 毛細(xì)管電泳法（HPCE）

毛細(xì)管電泳兼有電泳和色譜的特點(diǎn)，操作簡便、分析快速、穩(wěn)定可靠且經(jīng)濟(jì)環(huán)保，分析成本低，使用的緩沖溶液全部為水相，不需要特殊的色譜柱，使用普通的毛細(xì)管，毛細(xì)管和緩沖液的價(jià)格低，進(jìn)樣量、消耗的緩沖液少（只需1 mL），比HPLC經(jīng)濟(jì)環(huán)保、分離效率高，完成一次操作不超過20 min。但靈敏度比HPLC低。饒欽雄利用毛細(xì)管電泳法檢測雞蛋中三聚氰胺，分離時(shí)間約6 min，測得的定量限為0.25 mg/kg[24]。

3.5 改進(jìn)的凱氏定氮法

凱氏定氮法的缺陷是不能區(qū)分真、假蛋白氮，只要對其稍加改進(jìn)，用三氯乙酸沉淀樣品中蛋白質(zhì)，過濾后，分別測定沉淀和濾液中的氮質(zhì)量分?jǐn)?shù)，就可知道真蛋白質(zhì)的質(zhì)量分?jǐn)?shù)和假蛋白的氮質(zhì)量分?jǐn)?shù)。牛奶中氮質(zhì)量分?jǐn)?shù)的國際標(biāo)準(zhǔn)(ISO8968-5)[25]和《乳與乳制品中非蛋白氮質(zhì)量分?jǐn)?shù)的測定》國家標(biāo)準(zhǔn)就建立在此基礎(chǔ)上[26]。

3.6 近紅外吸收檢測法

近紅外吸收法對樣品前處理要求低，可進(jìn)行非破壞式的在線分析，但設(shè)備價(jià)格昂貴，需要不斷進(jìn)行校準(zhǔn)，不同樣品基質(zhì)中的干擾是困惑紅外分析精度、重現(xiàn)性的一大障礙。Polychromix的Phazir手持式近紅外分析儀、Thermo Scientific的Spectra-Quad在線成分分析儀可實(shí)現(xiàn)無接觸、無損傷和無危害的檢測，分析結(jié)果不受蛋白質(zhì)質(zhì)量分?jǐn)?shù)變化的影響。

4 結(jié)束語

總之，2008年的三聚氰胺風(fēng)暴已經(jīng)平息，但曝露出的問題值得反思。乳品中添加三聚氰胺具有一定的必然性。比如我國生鮮牛奶執(zhí)行的1986年制定的檢測標(biāo)準(zhǔn)不適應(yīng)形勢發(fā)展需求；乳品加工企業(yè)對原料乳的檢測手段落后；牛奶的生產(chǎn)、加工，涉及農(nóng)業(yè)、質(zhì)檢、工商、衛(wèi)生多個(gè)部門，分段監(jiān)管，職責(zé)分工不明確。

在當(dāng)前市場監(jiān)管不足，食品檢測手段落后，法律法規(guī)存在漏洞的情況下，不法分子只要有機(jī)可乘，三聚氰胺仍有可能會(huì)卷土重來，其他與三聚氰胺類似的物質(zhì)也有可能被添加進(jìn)來。因此對食品中添加物的檢測要提高警惕，舉一反三，食品安全警鐘長鳴。

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Toxicity,toxicology and detection methods of Melamine

ZHU Li-ping1,SUN Jian-quan2,YAN Shi-gan2
(1.School of Food and Bioengineering,Shandong Institute of Light Industry,Jinan 250353,China;2.Institute of Animal Husbandry and Veterinary Medicine,Shandong Academy of Agricultural Sciences,Jinan 250100,China)

Melamine is a common chemical raw material with a wide range of application,it is added into dairy products,animal feed as a protein alternative by the lawless because its nitrogen content reaches as high as 66%,resulting in infants and pet cats and dogs suffering from urinary tract stones even death.In this paper,physical and chemical properties,metabolism,toxicity,toxicology,detection methods of melamine and its homologues was overviewed.The adding reason of melamine was also preliminarily explained.

Melamine;homologue;toxicology;detection;chromatography;mass spectrum;

TS252.7

A

1001-2230（2010）03-0051-04

2009-11-10

山東省農(nóng)業(yè)重大應(yīng)用技術(shù)創(chuàng)新課題“規(guī)模化奶牛飼養(yǎng)場疫病控制技術(shù)研究”。

朱麗萍（1972-），女，講師，研究方向?yàn)槭称肺⑸锱c生物技術(shù)。

顏世敢