張代芬，鄧永強(qiáng)，邢 坤

（四川省動(dòng)物疫病預(yù)防控制中心，四川 成都 610041）

1 材料

1.1 試驗(yàn)藥物 為本地石榴皮。經(jīng)過中藥店專門加工機(jī)加工成石榴皮粉（500g）。

1.2 試驗(yàn)器材 托盤天平（廠家：上海儀器廠，型號(hào)ZYT2-200 g），漂浮瓶（青霉素小瓶，高 3.5 mm，直徑2 cm），載玻片、蓋玻片、滴管，顯微鏡（廠家：上海儀器廠，批號(hào)891290），竹簽、密封薄膜袋、白糖等，均購(gòu)于正規(guī)藥店。

1.3 試驗(yàn)試劑 飽和鹽水（100 mL水中加入食鹽35～40 g，用兩層紗布濾過得到飽和食鹽水。）

1.4 試驗(yàn)動(dòng)物 來(lái)源于流浪狗場(chǎng)，尋找自然感染比較嚴(yán)重的犬作為試驗(yàn)犬。品種：京巴犬，體重：4～6kg，共12條。

2 試驗(yàn)方法

2.1 犬只分組 將12條犬分為4組，每組3只。第1組作為對(duì)照組（不給予治療），第2組為低劑量組，第3組為中劑量組，第4組為高劑量組。

2.2 劑量配制 根據(jù)犬的體重，將石榴皮粉配成3種劑量：低劑量組（0.2g/kg）、中劑量組（0.6g/kg）、高劑量組（1g/kg），然后加以炮制，用炮制好的藥水投喂患犬（空腹12h以上）。每周投喂1次，總投喂3次。

2.3 炮制方法 將50g石榴皮粉用紗布包起來(lái)放入熬藥砂鍋中，用文火熬制2 h，把白糖和石榴皮粉經(jīng)過特殊處理后，排除不利因素，按照白糖與石榴皮0.2∶1的比例混合在一起使用。最好將熬制的藥水控制在250mL左右，約為0.2g/mL。

2.4 糞便采集 第1次投藥之前，有糞便的犬只，用鑷子或棉簽取得約5g糞便；沒有糞便的犬只，用棉簽從其肛門內(nèi)取得約1g左右的糞便。用薄膜密封袋收集各組犬的糞便，并標(biāo)上相應(yīng)的代號(hào)。

2.5 顯微鏡觀察及計(jì)數(shù) 操作方法：用竹簽取黃豆大小的糞便（約2g）置于含少量飽和鹽水的漂浮青霉素小瓶中，將糞便充分搗碎并與鹽水?dāng)噭蚝?，除去糞中的粗渣，再緩慢加入飽和鹽水至液面略高于瓶口但不溢出為止，在瓶口覆蓋載玻片一張，靜置30min后，平持載玻片向上提起迅速翻轉(zhuǎn)，使有飽和鹽水的一面向上，然后在一定視野內(nèi)進(jìn)行鏡檢計(jì)數(shù)。

2.6 藥效判定標(biāo)準(zhǔn) 根據(jù)給藥前后不同時(shí)間段犬糞便中蟲卵轉(zhuǎn)陰率的變化情況來(lái)判定藥物驅(qū)除效果。

轉(zhuǎn)陰率=[（第1次驅(qū)蟲前的蟲卵數(shù)-第2次驅(qū)蟲前的蟲卵數(shù)）/第1次驅(qū)蟲前的蟲卵數(shù)]×100%

2.7 計(jì)算 計(jì)算出各個(gè)試驗(yàn)組在第7 d、14 d、21 d的轉(zhuǎn)陰率及平均轉(zhuǎn)陰率。繪制出各個(gè)試驗(yàn)組在驅(qū)蟲前后各個(gè)時(shí)間段與轉(zhuǎn)陰率的關(guān)系圖，再進(jìn)一步繪制出各個(gè)試驗(yàn)組的用藥劑量與轉(zhuǎn)陰率之間的關(guān)系圖。

3 結(jié)果與分析

3.1 低、中、高劑量組各組（信息、數(shù)據(jù)及副作用）記錄 其中D組為對(duì)照組，A組為低劑量組；B組為中劑量組，C組為高劑量組。

表1 低劑量組各犬記錄

表1數(shù)據(jù)表明，對(duì)照組犬隨時(shí)間的增長(zhǎng)感染嚴(yán)重，低劑量石榴皮對(duì)患犬有比較強(qiáng)的驅(qū)蟲療效。從第7d、第14d及第21d的轉(zhuǎn)陰率對(duì)比可知，第3次喂藥轉(zhuǎn)陰率比第2次低，第2次喂藥轉(zhuǎn)陰率比第1次低，石榴皮的藥效呈遞減趨勢(shì)。原因是低劑量的石榴皮使絳蟲產(chǎn)生了一定抗藥性，故低劑量的石榴皮對(duì)犬的驅(qū)蟲效果不夠理想。

表2 中劑量組各犬記錄

由表2可知，第7d與第14d轉(zhuǎn)陰率對(duì)比可知，第2次喂藥轉(zhuǎn)陰率比第1次高，驅(qū)蟲療效增強(qiáng)。第21d與第14d轉(zhuǎn)陰率相比，第3次喂藥轉(zhuǎn)陰率比第2次低，說明在14d后投藥的藥效開始下滑，絳蟲對(duì)石榴皮有了一定的耐藥性。中劑量石榴皮在第14d的驅(qū)蟲轉(zhuǎn)陰率比較理想，故用中劑量的石榴皮投喂2次，驅(qū)蟲效果比較明顯，副作用小，很適合作獸醫(yī)臨床的驅(qū)蟲藥。

表3 高劑量組各犬記錄

由表3可見，對(duì)照組犬的蟲卵數(shù)隨著時(shí)間的增長(zhǎng)呈遞增狀態(tài)，第14d轉(zhuǎn)陰率比第7d高，驅(qū)蟲療效增強(qiáng)，而第21d轉(zhuǎn)陰率比第14d轉(zhuǎn)陰率高，說明高劑量組的驅(qū)蟲療效較強(qiáng)。根據(jù)數(shù)據(jù)可以看出，連喂3次后驅(qū)蟲轉(zhuǎn)陰率可以達(dá)到100%，但是高劑量的臨床副作用比較大，會(huì)出現(xiàn)胃腸蠕動(dòng)、嘔吐、精神萎靡等癥狀，對(duì)犬的健康危害較大。所以在臨床應(yīng)用中，對(duì)于那些犬只絳蟲感染非常嚴(yán)重的，可少次使用高劑量的石榴皮來(lái)治療，或者用阿托品等藥物配合使用，減少其副作用。

表4 各試驗(yàn)組犬在第7d、14d、21d的平均轉(zhuǎn)陰率及平均總轉(zhuǎn)陰率

2.2 分析 由圖1可知，低劑量組在第7d、14d后轉(zhuǎn)陰率呈下降趨勢(shì)，且第14d后的下降幅度變小，可以看出低劑量組在第7d后產(chǎn)生耐藥性，且耐藥越來(lái)越嚴(yán)重。第7d后，除了低劑量組轉(zhuǎn)陰率有所降低外，其他的都呈上升趨勢(shì)，其中中劑量組的上升趨勢(shì)比較明顯。中劑量組犬在第1周內(nèi)轉(zhuǎn)陰率比平均劑量組略高一點(diǎn)，在第2周的時(shí)候幾乎達(dá)到高劑量組的轉(zhuǎn)陰率，比平均劑量組高了許多。說明中劑量組在兩周內(nèi)的效果比較明顯，副作用也比較小，推薦在臨床中應(yīng)用中劑量。高劑量組在第21d的轉(zhuǎn)陰率已經(jīng)達(dá)到100%，但是高劑量組的副作用比較大，對(duì)犬的危害比較大，故不推薦使用高劑量。

圖1 轉(zhuǎn)陰率隨時(shí)間變化的關(guān)系分析圖

由圖2可知，第7d轉(zhuǎn)陰率隨著劑量的增加呈上升趨勢(shì)。綜合第14d轉(zhuǎn)陰率及第21d轉(zhuǎn)陰率的線條走勢(shì)，可以看出第14d在劑量為0.6g/kg的時(shí)候，轉(zhuǎn)陰率上升幅度比較大，高于平均水平。而第21d的轉(zhuǎn)陰率發(fā)展趨勢(shì)比較穩(wěn)定，最終可以達(dá)到100%，但是在高于中劑量組的情況下轉(zhuǎn)陰率才超過平均水平，結(jié)合考慮石榴皮致毒性、療程過長(zhǎng)帶來(lái)的臨床副作用等因素，確定其最適療程應(yīng)該為14d，再結(jié)合圖表可以確定最佳劑量應(yīng)為0.6g/kg，7 d飼喂一次，兩次一療程（約兩周）就可治愈。

圖2 轉(zhuǎn)陰率與石榴皮劑量之間的關(guān)系分析圖

4 小結(jié)

4.1 綜上所述，低劑量石榴皮對(duì)犬絳蟲有比較強(qiáng)的驅(qū)蟲效果，但隨著時(shí)間的增長(zhǎng)石榴皮藥效呈遞減趨勢(shì)，原因是低劑量的石榴皮使絳蟲產(chǎn)生了一定的抗藥性,從而使低劑量石榴皮驅(qū)蟲效果減弱。中劑量石榴皮在第14d藥效才開始下滑，但轉(zhuǎn)陰率比較理想，使用中劑量石榴皮驅(qū)除犬絳蟲總體效果比較明顯，副作用小，很適合作獸醫(yī)臨床用驅(qū)蟲藥。高劑量組驅(qū)除絳蟲的療效非常強(qiáng)，通過數(shù)據(jù)可以看出連喂3次后，轉(zhuǎn)陰率可以達(dá)到100%，但是高劑量的臨床副作用比較大。所以在臨床應(yīng)用中，對(duì)于犬只絳蟲感染非常嚴(yán)重的，可少次使用高劑量的石榴皮來(lái)治療，或者使用阿托品等藥配合使用，減少副作用。

4.2 通過試驗(yàn)數(shù)據(jù)分析，可以看出中劑量組的石榴皮驅(qū)蟲效果最好，在第7d～14d，其轉(zhuǎn)陰率上升幅度最大。故將最佳療程設(shè)為兩周，一周投喂一次。

4.3 石榴皮中的石榴堿能使絳蟲體肌肉呈異常持續(xù)收縮而致死，起到殺蟲作用。并且石榴皮價(jià)格便宜，副作用小，富含多種生物堿，不但能抗菌抗病毒、增強(qiáng)動(dòng)物機(jī)體免疫力，還可導(dǎo)致腫瘤細(xì)胞的生長(zhǎng)抑制或凋亡，同時(shí)還具有較強(qiáng)的抗氧化作用。故采用石榴皮驅(qū)蟲具有一定的優(yōu)勢(shì)。

[1]周盛源，梁敏芳.犬貓常見絳蟲病的防治[J].畜牧獸醫(yī)雜志，2008，27（5）：103-104.

[2]鐘 宵，納古呷各，陳軍打.犬絳蟲病的診斷與防治[J].獸醫(yī)技術(shù)，2006，（228）：65-69.

[3]藺桂娟，孫連榮，沈維力.檳蒜合劑治療犬絳蟲病[J].中國(guó)獸醫(yī)寄生蟲，2006，29（2）：16.

[4]杜 欣，葉盛英.石榴葉和石榴皮藥理活性研究進(jìn)展[J].天津藥學(xué)，2007，19（2）：64-66.

[5]孫克年.驅(qū)蟲中草藥的科學(xué)使用 [J].獸醫(yī)導(dǎo)刊，2007，（8）：33-35.

[6]國(guó)家藥典委員會(huì).中華人民共和國(guó)藥典（第一部）[M].北京：化學(xué)工業(yè)出版社，2005：63.

[7]肖 嘯，肖 焰，沈?qū)W文，等.檳榔驅(qū)除犬絳蟲試驗(yàn)效果觀察[J].中國(guó)畜牧醫(yī)學(xué)，2009，36（2）：135-137.

[8]幸奠權(quán).樹皮妙治畜病[J].四川農(nóng)業(yè)科技，2006，（10）：31.