宋西衛(wèi)，夏慶梅，武昊昀，劉志東

（1.天津中醫(yī)藥大學,現(xiàn)代中藥發(fā)現(xiàn)與制劑技術教育部工程研究中心研究生，天津 300193；2.天津中醫(yī)藥大學，天津 30019）

中藥防敏潤肌唇膏對皮膚刺激性和致敏性研究*

宋西衛(wèi)1，夏慶梅2，武昊昀2，劉志東2

（1.天津中醫(yī)藥大學,現(xiàn)代中藥發(fā)現(xiàn)與制劑技術教育部工程研究中心研究生，天津 300193；2.天津中醫(yī)藥大學，天津 30019）

[目的]考察中藥防敏潤肌唇膏對皮膚的刺激及致敏作用，并進行安全性評價。[方法]用皮膚刺激及致敏反應評分表評價中藥防敏潤肌唇膏對皮膚的刺激、致敏反應。[結果]中藥防敏潤肌唇膏對家兔正常皮膚及破損皮膚的平均刺激分值均﹤0.50分，即家兔單次及多次性涂用此唇膏后完整皮膚及破損皮膚的涂藥部位均未見異常改變。在致敏性實驗中,中藥防敏潤肌唇膏對豚鼠未見致敏作用,而陽性藥2,4-二硝基氯苯見有極強致敏性。[結論]中藥防敏潤肌唇膏對家兔皮膚無刺激性，對豚鼠無致敏性，是一種安全性較好的外用制劑。

中藥防敏潤肌唇膏；皮膚刺激性；致敏性；動物實驗研究

唇炎是一種較常見的口腔黏膜疾病，中藥防敏潤肌唇膏為本校自制，具有涼血活血、解毒透疹的功效，以及抗炎抗菌抗病毒等作用，治療唇炎療效顯著。本實驗依據(jù)外用藥皮膚刺激性及致敏性實驗要求進行了皮膚刺激性及致敏性的實驗研究，觀察中藥防敏潤肌唇膏對皮膚的刺激及致敏反應，了解中藥防敏潤肌唇膏在外用給藥過程中的安全性，以期為臨床用藥提供參考。

1 實驗材料

1.1 藥品和試劑 中藥防敏潤肌唇膏、賦形劑（空白唇膏）均自制，硫化鈉（Na2S）（天津市光復精細化工研究所）。

1.2 動物 日本大耳白家兔，體質(zhì)量1.5～2.5 kg，雌雄各半，由天津中醫(yī)藥大學動物中心提供，合格證號：SCXK（津）2005-0001。豚鼠，體質(zhì)量 280～320 g，雌雄各半，由天津中醫(yī)藥大學動物中心提供，合格證號：SCXK（京）2006-0006。

2 方法

2.1 家兔皮膚刺激性實驗

2.1.1 實驗動物的處理與分組 選取家兔20只，雌雄各半，體質(zhì)量1.5～2.5 kg。用10%Na2S將家兔的背部脊柱兩側(cè)脫毛，選脫毛24 h后無破損皮膚家兔備用，脫毛范圍約為3 cm×3 cm，涂藥面積約為2.5 cm×2.5 cm[1]。隨機分為為完整皮膚組Ⅰ、Ⅱ和破損皮膚組Ⅲ、Ⅳ，每組5只。破損皮膚模型的制作方法：用大頭針劃直徑為2 cm的“#”形擦傷，注意只刺破表皮，不傷及真皮，以有輕度滲血為度。

2.1.2 單次給藥皮膚刺激實驗 于脫毛及破皮損皮膚后第2天,分別在第Ⅰ和第Ⅲ組家兔左側(cè)脫毛區(qū)均涂抹賦形劑1.0 g，右側(cè)脫毛區(qū)均涂抹中藥防敏潤肌唇膏1.0 g。敷上紗布，用無刺激性膠布固定。每只動物分籠飼養(yǎng)，涂藥后24 h用無菌溫水清洗藥物，清洗后在1、24、48、72 h肉眼觀察并記錄涂抹部位有無紅斑和水腫等情況，刺激強度的評價參照“2.1.4”項下操作。

2.1.3 多次給藥皮膚刺激實驗 分別在第Ⅱ和第Ⅳ組家兔左側(cè)脫毛區(qū)均涂抹賦形劑1.0 g，右側(cè)脫毛區(qū)均涂抹中藥防敏潤肌唇膏1.0 g。涂藥1次/d，連續(xù)涂抹14 d，從第2天開始，每次涂抹前應剪毛，用溫水清除殘留受試物。從末次除去藥物及賦形劑后1 h開始觀察并記錄涂抹部位有無紅斑和水腫等情況，1次/d，連續(xù)觀察14 d，刺激強度的評價參照“2.1.4”項下操作。

2.1.4 刺激性評價 對涂抹部位有無紅斑 (包括焦痂)和水腫等情況進行評分[2]，根據(jù)下列公式計算平均積分值，分值小于0.5為無刺激性；分值小于2.99為輕度刺激性；分值小于6.0為中度刺激性；分值大于6.0為強刺激性。

公式：刺激分值＝（紅斑反應總分＋水腫反應總分）/每組動物數(shù)

2.2 豚鼠皮膚致敏性實驗

2.2.1 動物處理、分組及實驗方法 將白色豚鼠30只按體質(zhì)量及性別隨機分成3組，每組10只（雌雄各半）。第1組給予受試藥物中藥防敏潤肌唇膏，第2組空白對照組給予賦形劑，第3組陽性對照組給予1%2，4－二硝基氯苯。于給藥前24h，將豚鼠背部兩側(cè)被毛，去毛區(qū)范圍每側(cè)約9cm2（3cm×3cm）。取受試物1.0g涂在動物左側(cè)脫毛區(qū)，用一層油紙及兩層紗布覆蓋，再以無刺激膠布固定。將動物分籠飼養(yǎng)，持續(xù)6h。第7天和第14天，以同樣方法各重復致敏1次，共計3次。空白對照組和陽性對照組作相同方法的給藥處理。于末次給受試藥物致敏后14d，將受試物1.0g涂于豚鼠背部右側(cè)脫毛區(qū)；空白對照組涂賦形劑1.0g；陽性對照涂1%2，4－二硝基氯苯。各組保留藥物6h后再去掉藥物，即刻觀察，然后于24、48、72h再次觀察豚鼠皮膚過敏反應情況。

2.2.2 致敏性評價 記錄各時間豚鼠皮膚過敏反應分值[2-3]，計算皮膚過敏反應程度的分值[4]，以評價中藥防敏潤肌唇膏的致敏性程度。

3 實驗結果

3.1 皮膚刺激性實驗 實驗結果見表2～3,完整組1次給藥組（Ⅰ）和多次給藥組（Ⅱ），皮膚刺激反應平均分值均值小于0.5，破損組1次給藥組（Ⅲ）的最高積分為0.4，多次給藥組（Ⅳ）的皮膚刺激反應最高積分小于0.5，各組動物飲食、活動正常，刺激強度評價均為無刺激。

表1 中藥防敏潤肌唇膏1次用藥對皮膚刺激的反應分值The value of irritation reaction of a single-dose ofanti-anaphylaxisHerbal Lipstick’son the rabbit’s skin 分

即中藥防敏潤肌唇膏與賦形劑單次、多次給藥后對完整皮膚與破損皮膚的平均反應分值均無明顯差異，刺激強度評價均為無刺激。

3.2 皮膚致敏性實驗 實驗結果見表4，在激發(fā)接觸受試藥物中藥防敏潤肌唇膏（或賦形劑，或2，4－二硝基氯苯）后 6、24、48、72h，第 3 組陽性藥物對照組豚鼠皮膚出現(xiàn)明顯潰爛、紅斑或水腫；其皮膚組織形態(tài)經(jīng)進行病理學檢查,可見表皮角化層變薄，部分動物表皮角化層缺失、水皰、充血等，即呈現(xiàn)顯著的過敏反應性炎癥損傷性表現(xiàn)。根據(jù)皮膚致敏性評價標準，有高度的致敏作用。第1組和第2組在激發(fā)接觸后6、24、48、72h均未見豚鼠皮膚出現(xiàn)潰爛、紅斑或水腫；其皮膚組織形態(tài)僅部分動物皮膚可見表皮角化層輕度變薄,但未見炎細胞浸潤、潰瘍、水皰、充血等病變。結果表明中藥防敏潤肌唇膏及其賦形劑外用接觸豚鼠皮膚后均無致敏作用。

表2 中藥防敏潤肌唇膏多次用藥對皮膚刺激的反應分值The value of irritation reaction of multiple use ofAnti-anaphylaxis Herbal Lipstick’son the rabbit’s skin

表3 中藥防敏潤肌唇膏皮膚致敏性反應分值(±s) The value of allergy reaction of the Anti-anaphylaxisHerbal Lipstick on them ice’s skin(±s)

表3 中藥防敏潤肌唇膏皮膚致敏性反應分值(±s) The value of allergy reaction of the Anti-anaphylaxisHerbal Lipstick on them ice’s skin(±s)

中藥防敏潤肌唇膏賦形劑2,4-二硝基氯苯組即刻（1h）0 0 6.8±0.98 24h 0 0 7.6±0.78 48h 0 0 5.1±0.83 72h 0 0 3.2±1.02100致敏率（%）00致敏反應強度無致敏性無致敏性高度致敏性激發(fā)后不同時間皮膚過敏反應的分值組別

4 討論

中藥防敏潤肌唇膏是治療各種急性、慢性唇炎的外用制劑，通過皮膚刺激性及致敏性實驗觀察動物皮膚短期接觸中藥防敏潤肌唇膏所產(chǎn)生的反應情況，結果表示對家兔完整皮膚及破損皮膚刺激均未見異常改變，外用接觸后無刺激作用。對豚鼠完整皮膚和破損皮膚均未見明顯的毒性刺激性損傷作用，無致敏作用，表明中藥防敏潤肌唇膏在臨床應用中是一種安全性較好的外用制劑。

[1]陳 奇.中藥藥理研究方法學[M].北京:人民衛(wèi)生出版社,1993:164-166.

[2]袁伯俊,王治喬.新藥臨床前安全性評價與實踐[M].北京：軍事醫(yī)學科學院出版社,1997:152-154.

[3]蔡承鏗,鐘賽賢,趙振新,等.各類化妝品毒性試驗研究[J].中國公共衛(wèi)生,1993,6(9):268-269.

[4]中華人民共和國衛(wèi)生部藥政局.新藥臨床前研究指導原則匯編[S].北京：氣象出版社，1994:204-208.

Skin irritation and allergy testof the Anti-anaphylaxisHerbal Lipstick

SONGXi-wei，XIAQing-mei，WUHao-yun
（Tianjin University of TCM，Engineering Research CenterofModern ChineseMedicine Discovery and Preparation Technique，Ministry ofEducation，Tianjin 300193，China）

[Objective]The experimenton the skin irritation and allergy of the Anti-anaphylaxis Herbal Lipstick(AHL)was performed for safety assessment.[Methods]Response tablewasused to assess the skin irritation and allergy of AHL.[Results]The average reaction values of AHL in normalor injured skin were both lower than 0.50.No irritation reaction occurred in complete skins and damaged skins afterapplying AHL forone timeormany times.Theallergic reactionswere observed afterapplied 2,4-dinitrochlorobenzene,whilenotob-served afterapplying AHL.[Conclusion]AHL showed no irritation orallergy effect to skin.The results indicated that the lipstick wasef-fective and safe.

Anti-anaphylaxisherbal lipstick;Skin irritation;allergic test

R285.5

A

1672-1519(2010)02-0153-03

國際科技合作計劃項目（2007DFC31670）；國家科技支撐計劃項目（2007BAI47B00）；天津中醫(yī)藥大學校級科研課題（XJ200703）：中藥防敏潤肌唇油的藥效學研究。

宋西衛(wèi)（1987-），女，碩士研究生，主要從事緩控釋制劑的研究。

劉志東。

2009-09-30）