曲芬霞,吳桂容,李忠芳,唐 政,何忠偉
(廣西賀州學(xué)院化學(xué)與生物工程系,廣西 賀州 542800)
雞血藤又名大血藤、豬血藤等,為豆科植物密花豆(Spatholobus suberectus)的干燥藤莖,中醫(yī)認為其性溫,味苦、甘,歸肝、腎經(jīng),具有補血、活血、通絡(luò)之功效,用于治療月經(jīng)不調(diào)、血虛萎黃、麻木癱瘓、風濕痹痛等癥[1]?,F(xiàn)代醫(yī)學(xué)研究認為其對鎮(zhèn)靜、抗炎、興奮造血等功能,尤其對因放射治療而產(chǎn)生白細胞減少癥有良好的效果[2]。主產(chǎn)廣西,云南也有分布,是我國傳統(tǒng)大宗中藥材[3]。近年來,由于開發(fā)利用加大,導(dǎo)致人們無節(jié)制的亂采亂挖,不僅使生態(tài)環(huán)境惡化,還致使這一原來豐富的野生資源面臨枯竭,供需矛盾十分尖銳。目前,國內(nèi)關(guān)于雞血藤扦插繁殖技術(shù)研究鮮有報道,為了保護、開發(fā)和利用這一珍貴的植物資源,本研究對其硬枝扦插繁殖技術(shù)進行了初步的探索,旨在為保存雞血藤優(yōu)良種質(zhì)資源、建立和完善雞血藤扦插繁殖技術(shù)提供科學(xué)的理論依據(jù)。
試驗地設(shè)在賀州學(xué)院苗圃內(nèi),圃地前身為水田,地勢高燥,排水條件良好,做畦前先對圃地進行一次深翻,然后將壤土和清水河沙以1:1的比例混和,整成高床作為插床,畦面寬為1.2 m,長15 m,高30 cm,插床上搭建遮陰網(wǎng)。為了預(yù)防病蟲害浸染穗條,在插前3 d用0.2%的高錳酸鉀和多菌靈等內(nèi)吸殺菌劑對插壤進行消毒,插前24 h用清水沖洗干凈備用。扦插在雞血藤樹體休眠期進行。選用野生生長健壯無病蟲害枝條或根部萌芽條,剪去發(fā)育不充實的梢頭,余下部分剪成15 cm長、保留2 ~ 4個飽滿腋芽、2 ~ 3片半葉的穗條,切口平滑,上切口距芽1.3 cm左右,下切口為平滑斜面,距芽0.3~0.5 cm[4]。剪好的穗條立即放入水中,以免穗條失水而影響生根率,按形態(tài)學(xué)上下端一致的原則每50根扎成1捆。用生根促進劑溶液進行浸泡處理,插前放進5%的多菌靈消毒20 min,撈出并用清水沖洗干凈,然后蘸相應(yīng)生根激素溶液調(diào)成的糊狀滑石粉進行扦插。
采用L9(34)正交設(shè)計[5](見表1)對生根促進劑種類和濃度、用單因素隨機區(qū)組試驗設(shè)計進行了母株年齡、扦插時期和穗條粗度扦插試驗,每處理30株插穗,重復(fù)3次。測定的指標有生根時間(d)、新芽萌發(fā)時間(d)、生根率(含生根后死的)(%)。對試驗結(jié)果(均為小區(qū)平均值)用 SPSS軟件進行方差分析,并用 Dcuncan新復(fù)極差法進行多重比較[6]。
扦插時,用竹棍在基質(zhì)上打孔,采用直插法,穗條插入基質(zhì) 2/3左右,扦插完畢后踏實,隨即澆水,滿足插穗對水分的需要,并使插穗與基質(zhì)充分接觸。每隔3 ~ 5 d澆水一次,連續(xù)灌水3次左右,等到生根后再每隔1 ~ 2周澆水1次。為了防止病蟲害,在扦插3周后,噴灑適量殺菌劑和殺蟲劑。由于插穗在生根過程中消耗了大量養(yǎng)分,可在不定根及新梢生成期間補充營養(yǎng),每隔15 d葉面噴施復(fù)合肥和1/2或1/4 MS母液。
表1 L9(34)正交設(shè)計因子水平Table 1 Factors and levels of the orthogonal design for L9(34)
表2 正交設(shè)計L9(34)試驗結(jié)果Table 2 Result of the orthogonal design for L9(34)
在植物扦插育苗中,作為生理活性物質(zhì)的植物生長物質(zhì)是影響扦插成活最為關(guān)鍵的因素,穗條內(nèi)的激素濃度只有達到一定水平時,才能誘導(dǎo)根原基的發(fā)生,而激素的種類選擇和濃度配比又和植物的基因型密切相關(guān)。試驗用3種生長素NAA、IBA和ABT2的不同濃度組合對雞血藤進行硬枝扦插試驗,結(jié)果見表 2。對數(shù)據(jù)進行極差分析,RIBA>RABT>RNAA,說明在試驗的3個因素中,IBA對扦插成活率的影響最大,ABT2次之,NAA最小。在因素IBA中,B2生根率最高,B1次之;在ABT2中,C3成活率最大,C1最低;NAA中,A1和A3差別不大,作用相當,A2較小。對試驗數(shù)據(jù)進行方差分析,F(xiàn)NAA = 8.0**,F(xiàn)IBA = 81.1**,F(xiàn)ABT2= 75.7**,三個因素處理間均達到極顯著水平,這與極差分析結(jié)果一致。說明IBA對雞血藤生根促進效果明顯。理論中的最佳處理組合應(yīng)該是A1B2C3和A3B2C3(為實際處理8),前者在試驗中沒有安排,后都生根率僅為72.3%,比試驗中實際最佳處理1,即A1B2C2,生根率低12.4%,比較優(yōu)處理5,A2B2C1的生根率低8.0%,比優(yōu)良處理3低2.4%,也許是生根促進劑不同種類和濃度組合產(chǎn)生不同效應(yīng),對其具體機理,有待進行深入細致的研究。試驗中最差處理為6,生根率僅為38.3%。
在雞血藤扦插預(yù)試驗中,發(fā)現(xiàn)用嫩枝扦插較難成活,而用硬枝插時,均為皮部生根類型,少有愈傷生根型,說明雞血藤在枝干生長過程中產(chǎn)生潛伏根原基。在休眠期扦插,枝條不同采集時期與扦插生根率密切相關(guān),從表3中可以看出,從10月到次年3月扦插,最適宜時間12月28日至翌年1月18日,處理間沒有顯著差異,與其它處理達到顯著水平,生根率分別為82.7%,84.3%;但生根和新芽萌發(fā)時間均在35 d左右;較適宜時間是12月10日左右,生根率為77.7%,與其它處理間差異顯著;11月成活率僅為67.3%,但生根和新芽萌發(fā)時間卻下降到24和28 d,硬枝扦插成活率低的時間是10月,生根率僅為56.3%左右,但生根時間卻提前到18 d左右,最不適宜扦插時期是春季,穗條易萎蔫,根部發(fā)黑,生根率為32.3%。
表4 不同的母株年齡和穗條粗度對生根率的影響Table 4 Effect of different mother tree age and scion diameter on rooting rate
在植物扦插育苗試驗中,母株年齡是影響不定根形成最主要的因素,通常從幼齡實生苗上采集的穗條比成年植株上的穗條較易生根。從表4中可以看出雞血藤的年齡效應(yīng),從2 ~ 8年生母株上采集穗條,平均生根率為85.7% ~ 82.7%,生根率之間沒有顯著差異,與其它處理間均達到顯著差異;從12、16和20年生母株上采集的插條,生根率分別下降到68.0%、53.3%和36.3%,處理間均達到顯著水平。說明雞血藤硬枝扦插時,插條應(yīng)從2 ~ 8年生母株上采集,以提高扦插成活率。
采條部位和穗條粗度也會影響植株扦插成活率,但采條部位和插條粗度與樹種的特性和扦插環(huán)境條件密切相關(guān)。在雞血藤的扦插試驗中,發(fā)現(xiàn)用中下部的穗條較易扦插成活,后用穗條粗度試驗也證明了這一點,在表4中可以看到用直徑0.7 ~ 1.0 cm穗條扦插時,生根率最高,為81.3% ~ 85.0%,與其它處理均有顯著差異,但穗條粗度超過1.0 cm時,生根率下降到73.3%,而用粗度為0.7 cm以下的穗條,生根率在37.0%以下,處理間差異均達到顯著水平??梢钥吹诫u血藤扦插時,選用較粗枝插條成活率高,這可能與粗穗條體內(nèi)貯藏營養(yǎng)條件較細穗條多有關(guān)。
在植物扦插育苗中,對易生根樹種通常選用硬枝扦插,一是因為管理方便,二是由于插條中貯藏的營養(yǎng)物質(zhì)多,可使苗木生長健壯,對于難生根的樹種,嫩枝扦插比硬枝扦插的生根效果要顯著提高[7]。
但對于生長期的雞血藤扦插,其嫩枝生根率遠低于硬枝扦插生根率,對其抑制機理,還需進行深入細致的研究。許多研究表明,合理使用植物生長物質(zhì)能顯著提高扦插生根率,不同的植物類型對激素的種類和濃度敏感度不同,李忠海,尹一鵬等[8]對野生平榛的硬枝研究表明,使用100 mg/L的NAA扦插生根率最高,有人對薔薇硬枝的扦插研究表明,最適宜其生根的激素是100 m g/L的IBA[9]。這與周玉珍、李青等[10]對金葉風箱果的硬枝扦插結(jié)果一致。對雞血藤的硬枝扦插研究表明,其生根方式均是由潛伏根原基形成新根,但單獨使用一種生根激素很難誘導(dǎo)穗條生根,用100 mg/L的IBA混和使用200 mg/L的ABT2,浸泡2 h,生根率最高,為84.7%。
扦插時間、母株年齡和穗條粗度對生根率均有影響,雞血藤硬枝扦插最適宜時間是12月下旬至次年1月中旬,此時扦插,成活率可達82.7%,但生根時間和新芽萌發(fā)時間較長,均需40 d左右,10月和3月扦插,生根率較低,前者為56.3%,后者僅為32.3%,但生根時間和新芽萌發(fā)時間均在15 d左右,這可能與此時溫度較高有關(guān)。母株年齡對扦插生根有很大的影響,從8年生以下雞血藤上采集到的枝條,生根率最高可達85.7%,當母株年齡超過12年生時,生根率急劇下降到68.0%以下,20年生時,生根率僅為36.3%,這可能是幼齡期植株內(nèi)源生長物質(zhì)含量高,抑制物質(zhì)積累較少的原因引起的。穗條粗度是影響扦插生根的又一重要因素,用直徑0.7~ 1.0 cm穗條扦插時,生根率最高,在81.3% ~ 85.0%,這可能與粗枝條積累的營養(yǎng)物質(zhì)高有關(guān),但穗條過粗時,木質(zhì)化程度高,也不利于生根。
[1] 國家藥典委員長會. 中華人民共和國藥典一部[M]. 北京:化學(xué)工業(yè)出版社,2000. 151.
[2] 沈爾安. 益血佳品:雞血藤[J]. 家庭中藥學(xué),2005(3):55.
[3] 陸善旦. 近年廣西市場上的雞血藤緣何常暢不衰[J]. 中國藥材商情,2005(16):5-6.
[4] 沈國舫. 森林培育學(xué)[M]. 北京:中國林業(yè)出版社,2001.
[5] 洪偉,吳孫禎. 實驗設(shè)計與分析——原理·操作·案例[M]. 北京:中國林業(yè)出版社,2004.
[6] 盧紋岱. SPSS for Window統(tǒng)計分析[M]. 北京:電子工業(yè)出版社,2003.
[7] 白寶璋,徐仲. 植物生理學(xué)[M]. 北京:中國科學(xué)技術(shù)出版社,1995.
[8] 李忠海,尹一鵬,韓志民. 野生平榛的硬枝扦插試驗[J]. 防護林抗科技,2009(4):36-37.
[9] 曹玉翠,曹幫華,王兵,等. 不同生長素對薔薇硬枝扦插生根的影響[J]. 江西農(nóng)業(yè)大學(xué)學(xué)報,2009,31(4):654-658.
[10] 周玉珍,李青,蘇雪痕. 金葉風箱果的硬枝扦插繁殖技術(shù)[J]. 北京林業(yè)大學(xué)學(xué)報,2000,22(5):100-101.