人脂肪組織來(lái)源干細(xì)胞生物學(xué)特性研究

朱 艷 霞，劉 天 慶＊， 宋 克 東， 姜 麗 麗， 馬 學(xué) 虎， 崔 占 峰

（1.大連理工大學(xué) 干細(xì)胞與組織工程研發(fā)中心，遼寧 大連 116024；2.牛津大學(xué) 工程科學(xué)系 組織工程與生物處理中心，英國(guó) 牛津 OX1 3PJ）

0 引 言

自2001年Zuk等[1]證實(shí)吸脂獲得的脂肪組織中存在具有多向分化潛能的細(xì)胞群，脂肪干細(xì)胞（adipose－derived stem cells，ADSC）逐漸被人們認(rèn)識(shí)并進(jìn)入干細(xì)胞研究領(lǐng)域.ADSC具有與骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞相似的生物學(xué)特性，并且脂肪組織分布廣泛、體內(nèi)儲(chǔ)備量大，可以多次取材并且損傷小，因此，ADSC作為組織工程和再生治療的種子細(xì)胞前景十分廣闊.

目前國(guó)內(nèi)外對(duì)ADSC體外增殖及定向誘導(dǎo)分化能力認(rèn)識(shí)還存在分歧，研究者們通過(guò)不同方法獲得了不同量的脂肪干細(xì)胞[1、2]，要想獲得高質(zhì)、高量的ADSC，必須建立一套更簡(jiǎn)便有效的分離培養(yǎng)方法.另外，大多數(shù)研究顯示ADSC的增殖周期是6～7 d，然而有研究表明ADSC在增殖2周過(guò)程中，細(xì)胞的蛋白合成率和總蛋白量一直持續(xù)增加[3].因此，ADSC的生長(zhǎng)特性還有待進(jìn)一步闡明.

本實(shí)驗(yàn)改進(jìn)現(xiàn)有的ADSC體外分離培養(yǎng)方法，對(duì)其獲得率、體外增殖能力等進(jìn)行研究，以期ADSC為種子細(xì)胞的細(xì)胞治療和組織構(gòu)建提供細(xì)胞學(xué)基礎(chǔ).

1 材料和方法

1.1 脂肪干細(xì)胞的分離培養(yǎng)

自外科手術(shù)患者（年齡16～60歲）皮下獲取正常脂肪組織，約500 mg，無(wú)鈣鎂 Hank′s液沖洗，用眼科剪盡量剪破脂肪組織中肉眼可見(jiàn)的細(xì)小血管，沖洗血液后剪碎脂肪組織，移入大玻璃管中，加入0.25%胰蛋白酶（sigma）和0.1%膠原酶（I型，sigma）（體積比1∶1），37℃恒溫?fù)u床振蕩消化20 min.此時(shí)液面分為3層：上層為黃色油狀脂肪細(xì)胞層，中層為脂肪組織層，下層為含單個(gè)核細(xì)胞的液體.吸出下層液體移入含完全培養(yǎng)基（10%胎牛血清（hyclone）＋高糖 DMEM （gibco））的離心管中終止消化.在剩余脂肪中加入新的胰酶和膠原酶，重復(fù)以上步驟繼續(xù)消化，重復(fù)2～3次，將收集到的液體1500 r/min離心10 min，去除懸浮的脂肪細(xì)胞和脂滴，去上清，向細(xì)胞沉淀中加入含10%胎牛血清DMEM重懸細(xì)胞，移入培養(yǎng)瓶中，37℃、5%CO2培養(yǎng)箱孵育，每2～3 d換液.細(xì)胞達(dá)到100%融合時(shí)，用0.25%胰酶和0.04%EDTA（體積比1∶1）消化傳代.

1.2 細(xì)胞形態(tài)學(xué)觀(guān)察

使用倒置顯微鏡（IX70－131，OLYMPUS）觀(guān)察細(xì)胞生長(zhǎng)，并對(duì)傳代貼壁生長(zhǎng)在培養(yǎng)瓶中的脂肪干細(xì)胞的生長(zhǎng)、純化情況及增殖進(jìn)行連續(xù)觀(guān)察、攝像.

1.3 細(xì)胞增殖動(dòng)力學(xué)分析

將第4代ADSC以不同密度6.25×104、1.25×105、2.50×105、5.00×105、1.00×106和2.00×106cells/m L種于96孔板內(nèi)，獲得細(xì)胞密度與光密度值的標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn).以5.00×103cells/m L的密度接種細(xì)胞并分別檢測(cè)和繪制第3、7和15代細(xì)胞的生長(zhǎng)曲線(xiàn).采用cck－8測(cè)量細(xì)胞增殖，每100μL培養(yǎng)液中加10μL無(wú)菌cck－8，孵育3 h后在酶聯(lián)免疫檢測(cè)儀上測(cè)各孔450 nm的光吸收值，參比波長(zhǎng)630 nm.每組設(shè)置3個(gè)平行對(duì)照，實(shí)驗(yàn)重復(fù)3次.

當(dāng)細(xì)胞傳至20代時(shí)，分別將20代細(xì)胞按傳統(tǒng)的每5 d傳代1次（99%融合）和每14 d傳代1次（此時(shí)細(xì)胞重疊生長(zhǎng)），兩種傳代方法傳代至25代時(shí)，分別繪制2個(gè)25代細(xì)胞的生長(zhǎng)曲線(xiàn).

1.4 累計(jì)群體倍增時(shí)間

根據(jù)生長(zhǎng)曲線(xiàn)的指數(shù)增殖期計(jì)算群體倍增時(shí)間.群體倍增時(shí)間Td＝T×[lg 2/lg（Nt/N0）]，T代表生長(zhǎng)曲線(xiàn)中的指數(shù)增殖時(shí)間段，N0是接種時(shí)的細(xì)胞數(shù)，Nt是指數(shù)增殖末期的細(xì)胞數(shù).據(jù)此公式計(jì)算25代細(xì)胞的群體倍增時(shí)間Td.

1.5 細(xì)胞表面分子測(cè)定

取第4、20及2個(gè)25代細(xì)胞檢測(cè)其干細(xì)胞相關(guān)表面標(biāo)記的表達(dá)，操作步驟如下：培養(yǎng)的脂肪干細(xì)胞經(jīng)過(guò)消化離心（1000 r/min，5 min）后細(xì)胞重懸；細(xì)胞計(jì)數(shù)后將細(xì)胞濃度調(diào)整為1×107cells/m L，分 別 與 人 抗 CD13－PE、CD29－PE、CD34－FITC、CD44－FITC、CD45－FITC、CD105－FITC、CD166－PE 和 HLA－DR－PE作用20 min，PBS洗滌2次后用PBS重懸細(xì)胞，流式細(xì)胞儀（BD，San Jose，CA，USA）進(jìn)行檢測(cè).

1.6 逆轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)（RT－PCR）

分別提取第4、20、30及2個(gè)25代細(xì)胞的總RNA，用合成第1鏈cDNA試劑盒（Ta KaRa，日本）逆轉(zhuǎn)錄合成cDNA、Nanog、Oct－4、Sox－2和Rex－1的引物分別進(jìn)行擴(kuò)增，GAPDH作為參照.PCR產(chǎn)物進(jìn)行1.5%瓊脂糖凝膠電泳，Scion Image圖像分析軟件對(duì)電泳條帶進(jìn)行分析.

1.7 多向分化潛能的檢測(cè)

1.7.1 成脂肪誘導(dǎo) 取第4代及2個(gè)25代細(xì)胞，以1×105cells/m L的密度接種于24孔板中.當(dāng)細(xì)胞貼壁生長(zhǎng)達(dá)80%融合時(shí)，換成脂肪誘導(dǎo)試劑[1]，對(duì)照組加常規(guī)培養(yǎng)液.誘導(dǎo)14 d進(jìn)行油紅染色以觀(guān)察細(xì)胞脂滴形成情況.

1.7.2 成骨誘導(dǎo) 當(dāng)細(xì)胞貼壁生長(zhǎng)達(dá)80%融合時(shí)，換成骨誘導(dǎo)試劑[1].細(xì)胞誘導(dǎo)培養(yǎng)1周時(shí)進(jìn)行鈣鈷法堿性磷酸酶 （ALP）染色，3周進(jìn)行Von Kossa染色，干燥后鏡下觀(guān)察.

1.7.3 成軟骨誘導(dǎo) 取第4代及2個(gè)25代細(xì)胞，調(diào)整細(xì)胞密度2×107cells/m L，取10μL滴于24孔板內(nèi)，于37℃培養(yǎng)箱孵育3 h后加軟骨誘導(dǎo)劑[1].誘導(dǎo)培養(yǎng)2周后進(jìn)行甲苯胺藍(lán)染色，干燥后顯微鏡下觀(guān)察.

1.7.4 成心肌誘導(dǎo) 取第4代及2個(gè)25代細(xì)胞，以1×105cells/m L的密度接種于24孔板中.當(dāng)細(xì)胞貼壁生長(zhǎng)達(dá)80%融合時(shí)加9μmol/L 5－氮胞苷，作用24 h后換新鮮培養(yǎng)基繼續(xù)培養(yǎng)4周.用心肌特異性連接蛋白Connexin－43進(jìn)行免疫熒光檢測(cè)，熒光顯微鏡下觀(guān)察.

1.8 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析

采用SPSS 12.0軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)處理，所有數(shù)據(jù)以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差表示，組間比較采用t檢驗(yàn).P＜0.05為有顯著性差異.

2 結(jié) 果

2.1 細(xì)胞形態(tài)

接種后ADSC在24 h內(nèi)開(kāi)始貼壁，初為短梭形，細(xì)胞大小不等，核漿比例較大.2～4 d可見(jiàn)細(xì)胞伸展，大多數(shù)細(xì)胞為長(zhǎng)梭形，形態(tài)類(lèi)似成纖維細(xì)胞，核橢圓形，較大（圖1（a））.原代培養(yǎng)的細(xì)胞3～4 d即達(dá)90%融合，傳代后第3代細(xì)胞生長(zhǎng)出現(xiàn)方向性（圖1（b））；體外培養(yǎng)20代以后，細(xì)胞的增殖速度無(wú)明顯減慢，細(xì)胞形態(tài)無(wú)明顯改變（圖1（c））；30代以后的細(xì)胞體積明顯增大（圖1（d））.

2.2 細(xì)胞增殖動(dòng)力學(xué)

在本文的培養(yǎng)條件下，ADSC可傳至30代以上.從圖2（b）可以看出在最初3 d ADSC處于生長(zhǎng)適應(yīng)期，第4 d開(kāi)始細(xì)胞進(jìn)入對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期，然而第8 d后細(xì)胞處于生長(zhǎng)停滯期.但與其他研究結(jié)果不同的是細(xì)胞并未出現(xiàn)接觸抑制，而是繼續(xù)增殖到第10 d時(shí)達(dá)到又一個(gè)增殖峰值.接下來(lái)的幾天，細(xì)胞數(shù)量雖然有所減少，第12 d后細(xì)胞又進(jìn)入另一個(gè)對(duì)數(shù)增殖期.從圖2還可以看出，隨著傳代次數(shù)的增加細(xì)胞的增殖能力有所下降.圖2（c）顯示了兩種傳代方法得到的第25代細(xì)胞的生長(zhǎng)曲線(xiàn).與圖2（b）類(lèi)似，這兩種細(xì)胞的生長(zhǎng)曲線(xiàn)表現(xiàn)出多個(gè)對(duì)數(shù)增殖期和增殖峰值，兩種方法得到的25代細(xì)胞都具有較強(qiáng)的增殖能力.

圖1 體外培養(yǎng)的脂肪干細(xì)胞形態(tài)學(xué)改變Fig.1 Morphology change of h ADSCs from subcutaneous fat tissue cultured in vitro

圖2 脂肪干細(xì)胞生長(zhǎng)曲線(xiàn)Fig.2 Growth curves of h ADSC

顯微鏡下ADSC的形態(tài)學(xué)改變（圖3）與生長(zhǎng)曲線(xiàn)一致.第6 d細(xì)胞達(dá)到90%融合，第10 d即出現(xiàn)局部重疊生長(zhǎng).然而第11 d，鏡下觀(guān)察到單層ADSC上有一些卷曲溶解的細(xì)胞，接下來(lái)的幾天，細(xì)胞繼續(xù)重疊生長(zhǎng)，形成一個(gè)厚的細(xì)胞片層.20 d后，細(xì)胞片層從孔板邊緣卷起，細(xì)胞向卷起的空白區(qū)伸展增殖，跨過(guò)卷起的細(xì)胞片層和空白區(qū).當(dāng)細(xì)胞增殖至35 d以上，細(xì)胞片層完全卷起，此時(shí)通過(guò)cck－8檢測(cè)細(xì)胞數(shù)量，發(fā)現(xiàn)其OD值與20 d左右細(xì)胞的OD值無(wú)顯著性差異.

根據(jù)生長(zhǎng)曲線(xiàn)計(jì)算細(xì)胞的群體倍增時(shí)間，發(fā)現(xiàn)細(xì)胞的群體倍增時(shí)間隨傳代次數(shù)的增加而增加，從第3代的36 h增加到第25代的96 h（圖4）.每代細(xì)胞幾個(gè)對(duì)數(shù)增殖期的倍增時(shí)間沒(méi)有顯著性差異，但第2個(gè)對(duì)數(shù)增殖期倍增時(shí)間稍短于其他對(duì)數(shù)增殖期的倍增時(shí)間.

圖3 對(duì)應(yīng)于生長(zhǎng)曲線(xiàn)不同時(shí)刻脂肪干細(xì)胞形態(tài)學(xué)改變Fig.3 Morphology changes of h ADSC in accordance with the growth curves

圖4 ADSC倍增時(shí)間的檢測(cè)Fig.4 Doubling time determination for ADSC

原代細(xì)胞增殖迅速，2～3 d細(xì)胞即達(dá)90%融合，隨著傳代純化，到第4代細(xì)胞得到完全純化時(shí)，ADSC細(xì)胞總量約為8×107個(gè).根據(jù)細(xì)胞倍增時(shí)間計(jì)算可知每400～600 mg脂肪組織共可收獲約5×105個(gè)ADSC.

2.3 表面標(biāo)志物的鑒定

流式細(xì)胞儀檢測(cè)結(jié)果發(fā)現(xiàn)（表1），第4、20、25代細(xì)胞中大多數(shù)細(xì)胞CD13、CD29、CD44、CD105和CD166陽(yáng)性表達(dá)，而CD34、CD45和 HLA－DR都呈陰性表達(dá).第4代細(xì)胞的陽(yáng)性表達(dá)率稍高于第20代.本文還發(fā)現(xiàn)每隔14 d傳代得到的25代細(xì)胞干細(xì)胞相關(guān)表面標(biāo)志的表達(dá)率要高于常規(guī)5 d傳代得到的25代細(xì)胞的表達(dá)率（P＜0.05）.

表1 第4和第20代脂肪干細(xì)胞表面CD標(biāo)志物的表達(dá)Tab.1 Expression of cell surface CD markers of ADSCs of passages 4 and 20

2.4 轉(zhuǎn)錄因子的表達(dá)

第4和20代細(xì)胞轉(zhuǎn)錄因子Nanog、Oct－4、Sox－2和Rex－1都呈陽(yáng)性表達(dá)，兩者的表達(dá)率R沒(méi)有顯著性差異.第30代細(xì)胞 Nanog、Oct－4、Sox－2和Rex－1 m RNA雖然也呈陽(yáng)性表達(dá)，但表達(dá)率明顯低于其他兩代細(xì)胞（P＜0.05）（圖5（a）、6（a））.每14 d傳代得到的25代細(xì)胞Nanog、Oct－4、Sox－2和Rex－1的表達(dá)率明顯高于每5 d傳代得到的25代細(xì)胞的表達(dá)率（圖5（b）、6（b））.

表2 兩種傳代方法得到的25代細(xì)胞表面CD標(biāo)志的表達(dá)Tab.2 Expression of cell surface CD markers of ADSC of passage 25 with two subculture methods

圖5 不同代數(shù)脂肪干細(xì)胞轉(zhuǎn)錄因子m RNA的表達(dá)情況Fig.5 Transcription factors mRNA expression in h ADSC of different passages

2.5 多向分化潛能

2.5.1 成脂肪潛能 ADSCs經(jīng)脂肪誘導(dǎo)液向脂肪誘導(dǎo)分化5 d后，胞漿內(nèi)出現(xiàn)少量脂滴并逐漸聚集.8 d后，細(xì)胞形態(tài)發(fā)生明顯改變，從長(zhǎng)梭形類(lèi)成纖維細(xì)胞外觀(guān)逐漸變圓，并且開(kāi)始出現(xiàn)充滿(mǎn)脂滴的細(xì)胞.脂肪分化誘導(dǎo)2周后出現(xiàn)了大量的脂滴（圖7（a1））.油紅“O”染色后細(xì)胞內(nèi)出現(xiàn)大量紅染顆粒（圖7（a2）、（a3）、（a4）），證明鏡下所見(jiàn)細(xì)胞內(nèi)顆粒確為脂滴.另外，從半定量分析結(jié)果（圖8）可知，第25代細(xì)胞成脂肪能力明顯弱于第4代細(xì)胞.而2個(gè)25代細(xì)胞的成脂肪潛能沒(méi)有顯著性差異.

圖6 RT－PCR結(jié)果半定量分析Fig.6 Semiquantitative RT－PCR analysis

2.5.2 成骨潛能ADSCs 成骨誘導(dǎo)后約7 d長(zhǎng)滿(mǎn)單層，生長(zhǎng)略慢.細(xì)胞多為梭形，隨時(shí)間延長(zhǎng)，密度增高，細(xì)胞呈多層生長(zhǎng)，細(xì)胞外分泌基質(zhì)增多.經(jīng)ALP染色后見(jiàn)第4代細(xì)胞具有較強(qiáng)的堿性磷酸酶的活性（圖7（b2）），而第25代細(xì)胞誘導(dǎo)7 d后堿性磷酸酶的活性明顯低于第4代（圖7（b3）、7（b4））.14 d時(shí)有局灶型點(diǎn)狀鈣化斑形成，21 d時(shí)形成明顯的礦化結(jié)節(jié)沉積，隨誘導(dǎo)時(shí)間增加，結(jié)節(jié)狀沉積愈加明顯，顏色加深.Von Kossa染色顯示結(jié)節(jié)狀沉積為黑色（圖7（c2）、（c3）、（c4）），證實(shí)了結(jié)節(jié)狀沉積為鈣鹽沉積.同樣，第25代細(xì)胞形成的鈣化結(jié)節(jié)明顯少于第4代細(xì)胞.2個(gè)25代細(xì)胞堿性磷酸酶活性和鈣化結(jié)節(jié)形成都沒(méi)有顯著性差異（圖8）.

圖7 脂肪干細(xì)胞多向分化潛能的檢測(cè)Fig.7 Multi－differentiation potentials of h ADSCs toward mesodermal and endodermal lineages

2.5.3 成軟骨潛能 經(jīng)軟骨誘導(dǎo)液培養(yǎng)后，細(xì)胞體積增大，生長(zhǎng)相對(duì)變慢，細(xì)胞由成纖維樣變?yōu)闄E圓形及三角形，有的呈腎形（圖7（d1））.誘導(dǎo)培養(yǎng)14 d可見(jiàn)細(xì)胞周?chē)谢|(zhì)分泌.甲苯胺藍(lán)染色后，可見(jiàn)大量異染性基質(zhì)，呈藍(lán)紫色（圖7（d2）、（d3）、（d4）），表現(xiàn)為軟骨細(xì)胞分化特點(diǎn)（見(jiàn)圖4）.2個(gè)25代細(xì)胞成軟骨潛能沒(méi)有顯著性差異，但都明顯低于第4代細(xì)胞.

2.5.4 成心肌潛能 5－氮胞苷作用24 h，繼續(xù)培養(yǎng)4周后細(xì)胞重疊生長(zhǎng)，但并沒(méi)有發(fā)現(xiàn)明顯的形態(tài)學(xué)改變和自發(fā)搏動(dòng)的細(xì)胞.熒光染色后顯微鏡下觀(guān)察，第4代ADSC少有的幾個(gè)細(xì)胞出現(xiàn)綠色熒光（圖7（e2）），而第25代細(xì)胞誘導(dǎo)染色后未見(jiàn)綠色熒光（圖7（e3）、（e4））.

圖8 脂肪干細(xì)胞分化率的半定量分析Fig.8 Semiquantitative analysis of differentiation ratio of ADSCs

3 討 論

用本文改進(jìn)的分離方法，每500 mg脂肪組織平均可獲得5×105個(gè)干細(xì)胞，比文獻(xiàn)報(bào)道的細(xì)胞獲得率[4]高20倍以上.這是因?yàn)楸疚膽?yīng)用胰酶和膠原酶聯(lián)合消化，可大大縮短消化時(shí)間，從而避免了酶對(duì)細(xì)胞的過(guò)度損傷.此外，為排除紅細(xì)胞的干擾，一般都使用NH4Cl破壞紅細(xì)胞[5]，而本文是通過(guò)換液的方法去除紅細(xì)胞，2次換液后紅細(xì)胞基本消失，這樣就避免了NH4Cl對(duì)細(xì)胞的損傷.

本文分離培養(yǎng)的ADSC比前人的具有更強(qiáng)的增殖能力，25 d內(nèi)出現(xiàn)3個(gè)對(duì)數(shù)增殖期，雖然在每個(gè)對(duì)數(shù)增殖期末有生長(zhǎng)停滯現(xiàn)象，鏡下可觀(guān)察到細(xì)胞出現(xiàn)接觸抑制，有少量細(xì)胞死亡，但通過(guò)反饋?zhàn)饔眉?xì)胞又繼續(xù)分裂增殖，進(jìn)入另一個(gè)增殖高峰.ADSC 如此強(qiáng)的增殖能力是以前報(bào)道[6、7]中從未出現(xiàn)過(guò)的.

雖然體外長(zhǎng)期傳代培養(yǎng)后ADSC仍能保持較強(qiáng)的增殖能力，但還是隨著傳代次數(shù)的增加有所下降，表明傳代時(shí)胰酶的作用會(huì)對(duì)細(xì)胞造成一定的損傷.為減少胰酶的作用次數(shù)，本文將培養(yǎng)至20代的細(xì)胞分別按常規(guī)5 d傳代，或14 d傳代，傳至25代時(shí)發(fā)現(xiàn)每14 d傳代得到的細(xì)胞增殖力略高于每5 d傳代得到的細(xì)胞，并且細(xì)胞數(shù)量是常規(guī)傳代的20倍.

本文所培養(yǎng)的ADSC其CD34和CD45都呈陰性表達(dá)，HLA－DR作為排除成纖維細(xì)胞的表面標(biāo)志也是持續(xù)陰性表達(dá)，這可以為ADSC的自體或同種異體移植提供理論依據(jù).同時(shí)CD13、CD29、CD44、CD105和CD166都呈陽(yáng)性表達(dá)，與其他研究結(jié)果一致[2、8].間充質(zhì)標(biāo)志物持續(xù)表達(dá)說(shuō)明貼壁的ADSC可以增殖而沒(méi)有丟失干細(xì)胞相關(guān)的表面標(biāo)志物，反映了ADSC向間充質(zhì)起源細(xì)胞系的分化能力，如脂肪、軟骨和成骨.

轉(zhuǎn)錄因子 Nanog、Oct－4、Sox－2和 Rex－1，特別是Oct－4、Nanog和Sox－2在指導(dǎo)干細(xì)胞的多向分化潛能中起著重要的作用[9].本文培養(yǎng)的ADSC傳至30代時(shí)仍能表達(dá) Oct－4、Nanog、Sox－2和Rex－1 mRNA，而且每隔14 d傳代得到的25代細(xì)胞的表達(dá)率高于每隔5 d傳代得到的細(xì)胞.因?yàn)檫@4個(gè)轉(zhuǎn)錄因子啟動(dòng)、維持并調(diào)節(jié)多能干細(xì)胞的分化潛能[10]，因此每隔14 d傳代得到的細(xì)胞與常規(guī)傳代的細(xì)胞相比具有更強(qiáng)的分化潛能.

4 結(jié) 語(yǔ)

本研究方法可以從500 mg人脂肪組織中獲得5×105個(gè)干細(xì)胞，而且所分離的細(xì)胞可快速長(zhǎng)期持續(xù)增殖（3～4 d即可達(dá)到95%融合，1個(gè)月出現(xiàn)3個(gè)對(duì)數(shù)增殖期）；增殖至25代以上仍能較好保持干細(xì)胞表型特征和多向分化潛能；如果每隔14 d傳代而非常規(guī)5 d傳代，可獲得更多更高質(zhì)量的干細(xì)胞.因此ADSC相對(duì)于MSC是一個(gè)更好的干細(xì)胞資源，在細(xì)胞移植和組織工程中將有很好的應(yīng)用前景.

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