雍蘇南,譚元生

高血壓病是當(dāng)前最常見(jiàn)的心血管疾病之一,其病因復(fù)雜、病程長(zhǎng),是絕大多數(shù)心腦血管及腎臟疾病的主要致病原因,是危害人類健康的主要疾病。所以有效的防治高血壓病,已成為一個(gè)十分迫切的問(wèn)題。復(fù)方七芍降壓片具有良好的降低血壓、改善血液高凝狀態(tài)、保護(hù)靶器官的作用[1,2]。本研究觀察了其對(duì)自發(fā)性高血壓大鼠(SHR)血壓及 8-異前列腺素F2α(8-iso-PGF2α)的影響。

1 材料與方法

1.1 實(shí)驗(yàn)材料

1.1.1 動(dòng)物 8周齡SHR 48只,體重240 g～280 g,雄性,清潔級(jí),批號(hào):SCXK(滬2007-0005)。由上海斯萊克實(shí)驗(yàn)動(dòng)物有限責(zé)任公司提供。8周齡Wistar-kyoto(WKY)大鼠12只,體重230 g～ 280 g,雄性,清潔級(jí),批號(hào):SCXK(滬 2007-0005),由上海斯萊克實(shí)驗(yàn)動(dòng)物有限責(zé)任公司提供。

1.1.2 藥物與試劑 復(fù)方七芍降壓片組方:三七9 g,白芍18 g,天麻15 g,桑寄生 15 g,杜仲15 g,地龍15 g,羅布麻18 g,夏枯草18 g,車(chē)前子 18 g,甘草6 g。湖南中醫(yī)藥大學(xué)第一附屬醫(yī)院藥劑科制備,批號(hào):20070816?？ㄍ衅绽科?5 mg,上海普原藥業(yè)有限公司生產(chǎn),批號(hào):20070911。8-iso-PGF2αELISA試劑盒,美國(guó)Cayman Chemical Company公司。

1.1.3 儀器 BP-2006A型智能無(wú)創(chuàng)血壓計(jì),北京軟隆科技有限責(zé)任公司;MK3酶標(biāo)儀,芬蘭雷勃公司。

1.2 方法

1.2.1 分組及灌胃 適應(yīng)性喂養(yǎng)1周后,將48只SHR隨機(jī)分為4組,每組12只,即模型組、卡托普利組、復(fù)方七芍降壓片低劑量治療組、復(fù)方七芍降壓片高劑量治療組。12只WKY大鼠為正常組。復(fù)方七芍降壓片(壓片前)成人每日用量為49 g,低劑量治療組以成人等效量[大鼠體表面積/成人平均體表面積×成人每日用量]灌胃;高劑量治療組以成人等效量4倍灌胃;卡托普利組以成人等效量灌胃。模型組及正常組以等量蒸餾水同時(shí)開(kāi)始灌胃,給藥體積為10 mL/kg。各組每日灌胃1次,連續(xù)4

2 結(jié) 果

2.1 SHR尾動(dòng)脈壓的測(cè)定結(jié)果 模型組隨時(shí)間逐漸增高,治療組及卡托普利組血壓均有不同程度下降;與模型組比較,卡托普利組在治療1周后血壓明顯降低(P＜0.01),高低劑量治療組在治療2周后血壓開(kāi)始降低(P＜0.01);與卡托普利組比較,整個(gè)療程中,高、低劑量治療組血壓均高于卡托普利組(P＜0.01)。復(fù)方七芍降壓片治療有效,降壓效果高劑量組優(yōu)于低劑量組。詳見(jiàn)表1。周,灌胃期間每周測(cè)量 1次血壓。每周測(cè) 1次體重,根據(jù)體重隨時(shí)調(diào)整給藥量。

1.2.2 SHR尾動(dòng)脈壓的測(cè)定 應(yīng)用智能無(wú)創(chuàng)血壓計(jì),采用尾動(dòng)脈測(cè)壓法測(cè)量給藥前后大鼠血壓。測(cè)量時(shí)間分別在實(shí)驗(yàn)開(kāi)始前、1周后、2周后、3周后和4周后,在每周第7天14:00～17:00測(cè)各組大鼠的血壓平均值,為該鼠所在周的血壓值。

1.2.3 8-iso-PGF2α的測(cè)定 灌胃4周后,將大鼠處死,測(cè)定 8-iso-PGF2α?xí)r,將低溫保存的心肌組織標(biāo)本于4℃冰箱中解凍,加10倍體積的 HEPES緩沖液,勻漿后以12 000 r/min離心20 min,上清液保存于-4℃待測(cè)。使用抗原競(jìng)爭(zhēng)ELISA法檢測(cè)血漿和心肌組織中8-iso-PGF2α含量。

表1 各組大鼠治療前后血壓變化比較(±s)mmHg

表1 各組大鼠治療前后血壓變化比較(±s)mmHg

組別 n 治療前 治療后1周 治療后2周 治療后3周 治療后4周正常組 12 115±8 120±9 115±8 118±8 121±9模型組 12 185±91) 187±81) 195±81) 200±81) 206±101)卡托普利組 12 184±101) 138±121)2)5) 138±111)2)5) 137±91)2)5) 134±101)2)5)低劑量治療組 12 185±71) 182±81)3) 180±91)2)3) 175±91)2)3) 171±81)2)3)高劑量治療組 12 186±81) 181±91)3) 174±81)2)3) 165±71)2)3)4) 158±71)2)3)4)與正常組比較,1)P＜0.01;與模型組比較,2)P＜0.01;與卡托普利組比較,3)P＜0.01;與低劑量治療組比較,4)P＜0.05;與本組治療前比較,5)P＜0.01

2.2 復(fù)方七芍降壓片對(duì)SHR血漿和心肌組織中8-iso-PGF2α的影響 與正常組比較,各組血漿和心肌組織8-iso-PGF2α水平均明顯升高(P＜0.05或 P＜0.01);與模型組比較,卡托普利組 8-iso-PGF2α水平無(wú)明顯差異,高、低劑量組血漿和心肌組織的 8-iso-PGF2α的含量均明顯降低(P＜0.01)。高劑量治療組與低劑量治療組比較,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)。復(fù)方七芍降壓片能降低血漿和心肌組織的8-iso-PGF2α的含量,高劑量組的效果更優(yōu)于低劑量組。詳見(jiàn)表2。

表2 各組大鼠血漿和心肌組織8-iso-PGF2α含量比較(±s)

表2 各組大鼠血漿和心肌組織8-iso-PGF2α含量比較(±s)

組別 n 血漿(ng/mL)心肌(ng/g)正常組 12 60.2±12.8 86.4±15.2模型組 12 182.3±42.62) 251.6±45.11)卡托普利組 12 189.2±37.42) 265.8±50.22)低劑量治療組 12 97.8±15.22)3) 135.6±23.42)3)高劑量治療組 12 85.6±14.21)3)4) 104.4±26.71)3)4)與正常組比較,1)P＜0.05,2)P＜0.01;與模型組比較,3)P＜0.01;與低劑量組比較,4)P＜0.05

3 討 論

高血壓病往往缺乏特征性臨床表現(xiàn),早期或輕型高血壓可無(wú)癥狀,病變發(fā)展時(shí)可表現(xiàn)為頭暈、目眩、頭痛,甚則視物旋轉(zhuǎn)等癥狀,因而中醫(yī)將其歸納為眩暈、頭痛的范疇。風(fēng)眩的病因病機(jī)為變動(dòng)在肝,根源在腎,肝腎陰虛是風(fēng)眩的發(fā)病基礎(chǔ),瘀血阻絡(luò)為風(fēng)眩的標(biāo)實(shí)之證,治療上以滋補(bǔ)肝腎、活血化瘀為大法。復(fù)方七芍降壓片主要由三七、白芍、地龍、天麻、羅布麻葉、車(chē)前子、桑寄生、杜仲、夏枯草、甘草等 10味中藥組成。據(jù)現(xiàn)代藥理研究證實(shí),三七為化瘀之要藥,能抑制血小板聚集,促進(jìn)纖溶,使全血黏度下降,從而抑制血栓形成和動(dòng)脈粥樣硬化;還有降血壓、擴(kuò)張血管,抑制血管平滑肌細(xì)胞的增殖、及保護(hù)血管內(nèi)皮細(xì)胞作用。白芍所含芍藥甙有較好的解除平滑肌痙攣的作用,有一定的降壓、擴(kuò)血管的功效;天麻有降低外周血管和冠脈阻力,降壓,減慢心率及鎮(zhèn)痛作用;同時(shí)還可改善微循環(huán)障礙,減少微循環(huán)灌注的阻力,并可緩解血液流變異常致微循環(huán)灌注障礙而引起中樞神經(jīng)系統(tǒng)損害的癥狀。這些都為復(fù)方七芍降壓片平穩(wěn)降壓、保護(hù)靶器官以及延緩高血壓并發(fā)癥等作用提供藥理學(xué)依據(jù)。

8-iso-PGF2α是一種較強(qiáng)的血管收縮因子。在高血壓患者中血漿8-iso-PGF2α的水平顯著升高,提示氧化應(yīng)激及其產(chǎn)物可促進(jìn)高血壓的發(fā)生發(fā)展。最近研究發(fā)現(xiàn),血管緊張素Ⅱ(AngⅡ)可通過(guò)還原型輔酶Ⅱ(NAD-PH)氧化酶的介導(dǎo)作用誘導(dǎo)血管壁細(xì)胞產(chǎn)生氧自由基,一方面滅活一氧化氮(NO),影響血管壁的舒張功能,另一方面可誘導(dǎo)血管平滑肌細(xì)胞遷移增殖,從而導(dǎo)致血管壁增厚和血管壁順應(yīng)性下降,導(dǎo)致血壓升高。本研究所采取的模型SHR從許多方面來(lái)講,如發(fā)病機(jī)制、高血壓病心血管并發(fā)癥、外周血管阻力變化、對(duì)鹽的敏感性等都與人類高血壓病患者相似,是目前國(guó)際公認(rèn)的最接近人類高血壓病的動(dòng)物模型[3]。SHR與血壓正常的WKY大鼠比較,其主動(dòng)脈、心臟的氧化應(yīng)激標(biāo)志物 8-iso-PGF2α增高[4]。Romero等[5]研究發(fā)現(xiàn),8-iso-PGF2α有強(qiáng)的血管收縮和抗尿鈉排泄的作用,即使在AngⅡ正常的情況下,也參與了高血壓的形成。此外8-iso-PGF2α在體液內(nèi)含量非常穩(wěn)定,被認(rèn)為是判斷活體內(nèi)自由基氧化強(qiáng)度和臨床上作為評(píng)價(jià)氧化劑療效的最理想生化指標(biāo)[6,7]。

本實(shí)驗(yàn)表明,復(fù)方七芍降壓片在降壓基礎(chǔ)上能降低SHR血漿及心肌組織中的8-iso-PGF2α含量,說(shuō)明其可降低體內(nèi)氧化反應(yīng),改善患者的內(nèi)皮功能,延緩動(dòng)脈粥樣硬化的發(fā)展,即通過(guò)改善高血壓患者的預(yù)后,延長(zhǎng)其生存時(shí)間和生存質(zhì)量。

[1]譚元生,鄧圣明,譚超.復(fù)方七芍降壓片治療高血壓病的臨床療效及機(jī)理研究[J].中成藥,2004,26(1):71-73.

[2]譚元生,宋雪云,譚勝真.復(fù)方七芍降壓片治療高血壓病的臨床研究[J].中成藥,2005,27(7):795-798.

[3]曹強(qiáng),宋偉民.動(dòng)物模型在顆粒物的疾病易感性研究中的應(yīng)用[J].國(guó)外醫(yī)學(xué):衛(wèi)生學(xué)分冊(cè),2004,31(5):278-282.

[4]Kobayashi N,Delano FA.Schmid GW.Oxida-tive stress promotes endothelial cell apop tosis and loss of microvessels in the spontaneously hypertensive rats[J].Arterioscler Thtomb Vasc Biol,2005,25(10):2114-2121.

[5]Romero JC,Reckelhoff JF.Role of angiolension and oxidative stress in essential hypertension[J].Hypertension,1999,34(4 pt 2):943-949.

[6]Pratico D.F2-isoprostanes:Sensitive and specific non-invasive indices of lipid peroxidation in vivo[J].A theroslerosis,1999,147(1):1-10.

[7]Basu S.Metabolism of 8-iso-prostaglandin F2α[J].FEBS Lett,1998,428(1-2):32-36.