生津利咽含片對(duì)小鼠抗炎鎮(zhèn)痛作用影響的研究

劉瑞敏，朱立鳴，梁玉杰，段永強(qiáng)，虎俊瑞

(1.甘肅省人民醫(yī)院，甘肅蘭州 730000;2.甘肅中醫(yī)學(xué)院基礎(chǔ)部，甘肅蘭州 730000)

生津利咽含片中藥復(fù)方是在中醫(yī)理論的指導(dǎo)下，根據(jù)陰虛津虧、生熱生燥的理論，結(jié)合臨床經(jīng)驗(yàn)，以中醫(yī)古方與導(dǎo)師經(jīng)驗(yàn)方相結(jié)合，采用滋陰生津、潤(rùn)燥利咽的治法研制出的治療慢性咽炎的中藥制劑。根據(jù)以往的研究，臨床運(yùn)用養(yǎng)陰利咽治療慢性咽炎有著明顯確切的療效。本課題著重從生津利咽含片的抗炎、鎮(zhèn)痛角度，為中醫(yī)藥防治慢性咽炎的新藥開(kāi)發(fā)提供一些實(shí)驗(yàn)依據(jù)，以促進(jìn)提高中醫(yī)藥對(duì)慢性咽炎的理論認(rèn)識(shí)和防治水平。

1 材料

1.1 動(dòng)物

SPF級(jí)昆明種小鼠(合格證號(hào)SCXK甘2004-0006-0000197)，雌雄各半，體重20g±2g，由甘肅中醫(yī)學(xué)院醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)中心提供。

1.2 儀器

電子天平，規(guī)格型號(hào):Sartorius BL150，北京賽多利斯儀器系統(tǒng)有限公司。

1.3 藥物

生津利咽含片(粉末)組方:生甘草、烏梅、玄參、桔梗、青果、制大黃由威海迪沙藥業(yè)集團(tuán)公司提供制劑。金果飲咽喉片(市售)，山東綠因藥業(yè)有限公司生產(chǎn)，批號(hào)070213，臨用前蒸餾水配成所需濃度;冰醋酸(乙酸)(分析純)，廣東汕頭市西隴化工廠，批號(hào) 0502161;甲醛，成都化學(xué)試劑廠，批號(hào)830920-2;瓊脂，上海中秦化學(xué)試劑有限公司，批號(hào)20070921;二甲苯，北京五二九五二化工廠，批號(hào)870317。

2 方法

下列各項(xiàng)實(shí)驗(yàn)將小鼠隨機(jī)分為5組，即計(jì)量高、中、低組和陽(yáng)性藥物(金果飲咽喉片)及蒸餾水對(duì)照組。等效劑量以60 kg成人常規(guī)劑量按人與動(dòng)物體型系數(shù)折算。

2.1 瓊脂所致小鼠肉芽腫反應(yīng)

給藥前1 h在小鼠背中線同一部位將毛剪盡，行淺麻(腹腔注射10%烏拉坦0.15ml·20g－1)，背部皮下無(wú)菌快速注射2%瓊脂0.2ml，各組動(dòng)物每天分別給藥1次，連續(xù)14d。第14天將小鼠斷頭處死，仔細(xì)剝離并取出各組動(dòng)物的瓊脂肉芽組織，剔除結(jié)締組織，電子天平稱(chēng)重，并換算每100g體質(zhì)重肉芽腫重量。

2.2 二甲苯所致小鼠耳腫脹

連續(xù)給藥7d，末次給藥后30min后，以二甲苯棉球接觸小鼠左耳5s，15min后將動(dòng)物拉頸處死，用直徑7mm打孔器將小鼠雙耳相同部位等面積切下稱(chēng)重，以左右兩耳耳片重量差作為腫脹厚度。

2.3 甲醛所致小鼠足腫脹的影響

連續(xù)7d，末次給藥1h后，小鼠右足注射0.05ml 2.5%甲醛致炎，致炎后分別于 0.5h、1h、2h、4h、6h用數(shù)顯千分卡尺測(cè)定小鼠右足腫脹厚度。

2.4 鎮(zhèn)痛實(shí)驗(yàn)(醋酸致小鼠扭體法)

每天灌胃給藥1次，連續(xù)給藥7d，末次給藥后1h，小鼠腹腔注射0.6%醋酸溶液0.20ml/只，觀察記錄各組小鼠15min內(nèi)的扭體次數(shù)并計(jì)算出每分鐘扭體次數(shù)。

2.5 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

數(shù)據(jù)輸入計(jì)算機(jī)，采用SPSS13.0軟件統(tǒng)計(jì)，實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差(s)表示，根據(jù)方差齊性采用單因素方差分析(One-Way-ANOVN)。

3 結(jié)果

3.1 生津利咽含片對(duì)瓊脂所致小鼠肉芽腫的影響

表1 生津利咽含片對(duì)瓊脂所致小鼠肉芽腫的影響(s)

表1 生津利咽含片對(duì)瓊脂所致小鼠肉芽腫的影響(s)

注:與蒸餾水對(duì)照組比較:*P<0.05，**P<0.01;與金果飲組比較:△P<0.05，△△P<0.01

組別 動(dòng)物數(shù)(n)劑量(g/kg)肉芽腫(g/100g體重)蒸餾水對(duì)照組 10 —0.43±0.21生津利咽大劑量組 10 0.88 0.11±0.04**生津利咽中劑量組 10 0.44 0.17±0.06**生津利咽小劑量組 10 0.22 0.25 ±0.07**△金 果 飲 組 10 0.50 0.14±0.05**

3.2 生津利咽含片對(duì)二甲苯所致小鼠耳腫脹的影響

表2 生津利咽含片對(duì)二甲苯所致小鼠耳腫脹的影響(s)

表2 生津利咽含片對(duì)二甲苯所致小鼠耳腫脹的影響(s)

注:與蒸餾水對(duì)照組比較:*P<0.05，**P<0.01;與金果飲組比較:△P<0.05，△△P<0.01

組別 動(dòng)物數(shù)(n)劑量(g/kg)腫脹度(g)蒸餾水對(duì)照組 10 —0.0060±0.0020生津利咽大劑量組 10 0.88 0.0018±0.0006**生津利咽中劑量組 10 0.44 0.0018±0.0005**生津利咽小劑量組 10 0.22 0.0029±0.0011*△金 果 飲 組 10 0.50 0.0022±0.0007**

3.3 生津利咽含片對(duì)甲醛所致小鼠足腫脹的影響

表3 生津利咽含片對(duì)甲醛所致小鼠足腫脹的影響(s)

表3 生津利咽含片對(duì)甲醛所致小鼠足腫脹的影響(s)

注:與蒸餾水對(duì)照組比較:*P<0.05，**P<0.01;與金果飲組比較:△P<0.05，△△P<0.01

組別 動(dòng)物數(shù)(只)劑量(g/kg)0.5h 1h 2h 4h 6h蒸 餾 水 對(duì) 照 組 10 — 0.75±0.29 0.63±0.22 0.72±0.25 0.79±0.26 0.75±0.20生津利咽大劑量組 10 0.880.10±0.03** 0.09±0.03** 0.16±0.07** 0.18±0.08** 0.17±0.08**△生津利咽中劑量組 10 0.440.10±0.05** 0.08±0.02** 0.08±0.01**△△ 0.15±0.02**△ 0.13±0.02**△生津利咽小量組 10 0.220.09±0.03** 0.11±0.04** 0.15±0.06** 0.21±0.07** 0.26±0.07**金 果 飲 組 10 0.500.08±0.03** 0.10±0.05** 0.16±0.07** 0.20±0.08** 0.24±0.09**

3.4 生津利咽含片對(duì)醋酸所致小鼠扭體反應(yīng)的影響

表4 生津利咽含片對(duì)醋酸所致小鼠扭體反應(yīng)的影響(s)

表4 生津利咽含片對(duì)醋酸所致小鼠扭體反應(yīng)的影響(s)

注:與蒸餾水對(duì)照組相比:*P<0.05，**P<0.01;與金果飲組比較:△P<0.05，△△P<0.01

組每分鐘扭體次數(shù)蒸餾水對(duì)照組 10 —?jiǎng)e 動(dòng)物數(shù)(n)劑量(g/kg)1.95±0.35生津利咽大劑量組 10 0.88 0.92±0.23**生津利咽中劑量組 10 0.44 1.07±0.22**生津利咽小劑量組 10 0.22 1.28 ±0.26**△金 果 飲 組 10 0.50 0.96±0.31**

4 討論

結(jié)果表明，生津利咽含片對(duì)二甲苯致小鼠耳腫脹具有良好的抑制作用，并且對(duì)甲醛致小鼠足腫脹具有良好的抑制作用，表明生津利咽含片對(duì)炎癥早期的滲出有抑制作用，從而減輕或消除咽部黏膜彌漫性充血及組織內(nèi)滲出液積聚而引起的黏膜腫脹。生津利咽含片能顯著抑制瓊脂致小鼠肉芽腫炎性反應(yīng)增生，說(shuō)明其對(duì)炎癥后期的結(jié)締組織增生有抑制作用。以上作用提示，生津利咽含片可能對(duì)急慢性咽炎均有一定的治療作用。

慢性咽炎患者咽部常伴有微痛感。痛覺(jué)是一種復(fù)雜的感覺(jué)，常伴有不愉快的情緒反應(yīng)。疼痛與炎癥的關(guān)系是密不可分的，炎癥介質(zhì)如組胺、5-羥色胺、緩激肽、白三烯等均可激活傷害性感受器而產(chǎn)生疼痛作用。前列腺素雖不能引起明顯的疼痛，但可降低痛覺(jué)感受器靶細(xì)胞的痛閾而對(duì)其他致痛因子有增敏作用。在本論文所采用的鎮(zhèn)痛實(shí)驗(yàn)?zāi)Ｐ椭?，醋酸致小鼠扭體主要是間接通過(guò)腹腔產(chǎn)生急性炎癥反應(yīng)所致。實(shí)驗(yàn)結(jié)果發(fā)現(xiàn)，生津利咽含片能顯著降低醋酸引起的小鼠扭體次數(shù)，提示其具有良好的鎮(zhèn)痛作用。該作用有利于緩解慢性咽炎伴隨的疼痛感覺(jué)。