廣藿香對冰醋酸所致小鼠扭體疼痛模型的鎮(zhèn)痛作用研究

郭婷婷，崔一喆，錢 榜，盧世超，王 瑩，武 超

（黑龍江八一農(nóng)墾大學(xué)動物科技學(xué)院，黑龍江 大慶 163319）

廣藿香對冰醋酸所致小鼠扭體疼痛模型的鎮(zhèn)痛作用研究

郭婷婷，崔一喆，錢 榜，盧世超，王 瑩，武 超

（黑龍江八一農(nóng)墾大學(xué)動物科技學(xué)院，黑龍江 大慶 163319）

旨在研究廣藿香對冰醋酸所致小鼠扭體反應(yīng)的抑制作用，確定廣藿香的鎮(zhèn)痛作用。將24只小鼠隨機分為廣藿香低劑量組、中劑量組、高劑量組和對照組，采用灌胃給藥方式，分別給予0.25、0.5、1.0 g/（kg·BW）廣藿香及生理鹽水；給藥后，各組小鼠灌胃20%冰醋酸溶液，觀察并記錄各組小鼠的體態(tài)變化以及扭體次數(shù)，并計算鎮(zhèn)痛率。結(jié)果表明，給予20%冰醋酸溶液后，高劑量組小鼠的腹痛癥狀較輕，低劑量組小鼠的腹痛癥狀較為嚴(yán)重，抽搐明顯；高劑量組小鼠的扭體次數(shù)極顯著低于對照組（P＜0.01），中、低劑量組小鼠的扭體次數(shù)顯著低于對照組（P＜0.05）；高劑量組的鎮(zhèn)痛百分率最高（36.73%），低劑量組的鎮(zhèn)痛百分率最低（14.45%）。廣藿香對冰醋酸所致的小鼠扭體反應(yīng)具有抑制作用，表現(xiàn)出良好的鎮(zhèn)痛作用，且鎮(zhèn)痛作用呈現(xiàn)一定的量效關(guān)系。

廣藿香；冰醋酸；小鼠；鎮(zhèn)痛；扭體試驗

廣藿香（Pogostemon cablin），唇形科植物，多年生草本直立植物，有香氣。原產(chǎn)菲律賓，東南亞各地栽培較多，我國南方地區(qū)也有大量栽培。全草含揮發(fā)油，可用作強刺激藥與芳香料，是香水常見成分。其味辛，性微溫，歸脾、胃、肺經(jīng)，具有芳香化濕、和胃止嘔、祛暑解表之功效［1］。廣藿香的藥效學(xué)研究表明，其具有解除胃腸道平滑肌痙攣、促進(jìn)消化功能、抗腹瀉、抑制常見腸道致病菌及鎮(zhèn)痛等作用［2］。藥理學(xué)研究中，在進(jìn)行鎮(zhèn)痛藥物的篩選時，小鼠扭體試驗是經(jīng)典的篩選方法之一［3-4］。該研究旨在通過觀察廣藿香溶液對冰醋酸所致小鼠扭體反應(yīng)的抑制作用，為評價廣藿香的鎮(zhèn)痛作用提供科學(xué)依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 實驗動物選擇及分組 選用健康昆明純種小白鼠24只，雌雄各半，體重20～25 g，購于黑龍江八一農(nóng)墾大學(xué)動物科技學(xué)院實驗動物中心。將小鼠隨機分為對照組、高劑量組、中劑量組、低劑量組，每組6只，雌雄各半，所有小鼠均在標(biāo)準(zhǔn)飼養(yǎng)條件下飼養(yǎng)。

1.2 藥物和耗材 廣藿香、冰醋酸、注射器、手套，由黑龍江八一農(nóng)墾大學(xué)動物科技學(xué)院教研實驗室提供。

1.3 廣藿香溶液的制備及給藥方案 利用經(jīng)典的中藥熬制方法和水提醇沉方法制備廣藿香溶液，配制成25%、50%、100%共3種濃度梯度，備用。利用灌胃給藥方法，分別給予低、中、高劑量組小鼠0.25、0.5、1.0 g/（kg·BW）的廣藿香，每天 1 次，連續(xù)給藥1周；對照組灌胃生理鹽水0.25 mL/只，每天1次，連續(xù)1周。

1.4 冰醋酸致小鼠扭體模型的建立 最后一次給藥6 h后，采用灌胃給藥方法，給予各組小鼠0.02 mL/（10 g·BW）的 20%冰醋酸溶液，灌胃后等待10 min，觀察記錄小鼠20 min內(nèi)的體態(tài)變化情況以及扭體次數(shù)，并計算鎮(zhèn)痛百分率。鎮(zhèn)痛百分率=（對照組小鼠扭體次數(shù)-給藥組小鼠扭體次數(shù))/對照組小鼠扭體次數(shù)×100%。

1.5 數(shù)據(jù)處理 試驗數(shù)據(jù)采用SPSS 16.0統(tǒng)計軟件進(jìn)行處理，計量資料以平均值±標(biāo)準(zhǔn)差表示。采用單因素方差分析法對各給藥組和對照組小鼠扭體次數(shù)之間的差異進(jìn)行顯著性檢驗，P＜0.05表示差異顯著，P＜0.01表示差異極顯著。

2 結(jié)果與分析

2.1 小鼠體態(tài)變化情況 給予20%冰醋酸溶液后，各組小鼠均出現(xiàn)不同程度的體態(tài)變化。

對照組小鼠的腹痛癥狀最為嚴(yán)重。高劑量組小鼠的腹痛癥狀較輕，表現(xiàn)為行動遲緩、蠕行，向后蹬腿，腹部連續(xù)抽搐、內(nèi)凹。低劑量組小鼠的腹痛癥狀較為嚴(yán)重，表現(xiàn)為急躁不安，有閉眼現(xiàn)象，抽搐劇烈。結(jié)果提示，廣藿香對冰醋酸引起的腹痛起到了一定的緩解作用。

2.2 小鼠扭體次數(shù)和鎮(zhèn)痛百分率 由表1可知，給予20%冰醋酸溶液后，高劑量組小鼠的扭體次數(shù)極顯著低于對照組（P＜0.01），中、低劑量組小鼠的扭體次數(shù)顯著低于對照組（P＜0.05）；高劑量組的鎮(zhèn)痛百分率最高，為36.73%，低劑量組的鎮(zhèn)痛百分率最低，為14.45%。

結(jié)果表明，高、中、低劑量的廣藿香溶液對冰醋酸所致的小鼠扭體反應(yīng)具有抑制作用，表現(xiàn)出良好的鎮(zhèn)痛作用，且鎮(zhèn)痛作用呈現(xiàn)一定的量效關(guān)系，即藥物劑量越大，鎮(zhèn)痛作用越強。

表1 給予20%冰醋酸溶液后各組小鼠的扭體次數(shù)和鎮(zhèn)痛百分率測定結(jié)果

3 討論

廣藿香的水提物、去油水提物和揮發(fā)油均可抑制腸道的自發(fā)收縮和乙酰膽堿及氯化鋇引起的痙攣性收縮，且以揮發(fā)油的抑制作用最強。水提物和去油水提物均可減慢胃排空，抑制正常小鼠腸推進(jìn)作用，增加胃酸分泌，提高胃蛋白酶活性，促進(jìn)胰腺分泌淀粉酶，提高血清淀粉酶活力。此外，水提物、去油水提物和揮發(fā)油對冰醋酸引起的內(nèi)臟絞痛均有抑制作用，其中水提物的作用較強。

造成腹痛的原因有很多，包括消化系統(tǒng)炎癥、腸道機械刺激、心理應(yīng)激等因素，因此，可模擬多種因素來復(fù)制疼痛模型。常用的動物疼痛模型制備方法有熱刺激法、電刺激法、機械刺激法和化學(xué)刺激法等［5］。冰醋酸引起的腹腔炎癥可伴隨腸道痛覺超敏反應(yīng)，而冰醋酸扭體法是研究藥物鎮(zhèn)痛作用較為常用的方法。該方法經(jīng)典、可靠，在動物實驗上篩選出的藥物，在臨床上具有較好的鎮(zhèn)痛活性，因此，該研究采用冰醋酸致小鼠扭體模型來觀察廣藿香的鎮(zhèn)痛效果。

廣藿香是臨床上應(yīng)用非常廣泛的一種中藥材。但是目前對廣藿香的研究還不夠深入，特別是其有效成分及其藥理學(xué)研究比較薄弱。廣藿香油的有效成分被研究的較多，但廣藿香油的成分比較復(fù)雜，還有部分成分有待進(jìn)一步研究。目前，廣藿香不僅在臨床上應(yīng)用廣泛，還有望在化妝品、定香劑、殺蟲劑等日用品的應(yīng)用方面取得進(jìn)展［6］。

4 結(jié)論

廣藿香對冰醋酸所致的小鼠扭體反應(yīng)具有抑制作用，表現(xiàn)出良好的鎮(zhèn)痛作用，且鎮(zhèn)痛作用呈現(xiàn)一定的量效關(guān)系。

［1］肖翔林，龍膺西.近年來廣藿香的研究概況［J］.中藥材，2004，27（6）：456-459.

［2］羅集鵬，馮毅凡，何冰，等.廣藿香的道地性研究［J］.中藥材，2005，28（12）：1121-1125.

［3］楊紅霞，蘇加向，張誠賢，等.復(fù)方止痛膠囊對小鼠扭體疼痛模型鎮(zhèn)痛作用研究［J］.新中醫(yī)，2013，45（8）：189-190.

［4］范紅斌，李英，包菊平，等.冰醋酸致小鼠實驗性腹膜炎模型的研究［J］.中國微生態(tài)學(xué)雜志，2007，19（6）：509-511.

［5］陳一村，秦永潔，蔡聰藝，等.大黃總蒽醌對小鼠扭體模型的鎮(zhèn)痛作用 ［J］. 現(xiàn)代生物醫(yī)學(xué)進(jìn)展，2010，10（3）：558-559.

［6］賈旭玲，徐三，施芬.廣藿香的研究進(jìn)展［J］.中華中醫(yī)藥學(xué)刊，2010，28（11）：2442-2444.

Analgesic Effect of Pogostemon cablin on Acetic Acid-induced Writhing in Mice

GUO Ting-ting，CUI Yi-zhe，QIAN Bang，LU Shi-chao，WANG Ying，WU Chao
（College of Animal Science and Veterinary Medicine，Heilongjiang Bayi Agricultural University，Daqing 163319，China）

The aim of the present study was to assess the inhibitory effect of Pogostemon cablin on acetic acid-induced writhing in mice and to determine the analgesic effect of Pogostemon cablin.A total of 24 mice were randomly and averagely divided into Pogostemon cablin low-dose group,moderate-dose group,high-dose group and control group.The 0.25,0.5,1.0 g/（kg·BW） of Pogostemon cablin solutions were intragastricly administrated for the low-dose,moderate-dose and high-dose group,respectively,and saline was intragastricly administrated for the control group.The mice in treatment groups and control group subsequently

20%of acetic acid solution by intragastric administration.The posture change and writhing times of the mice were recorded,and the analgesic rate was calculated.The results showed that after receiving 20%of acetic acid solution,the mice in high-dose group expressed mild abdominal pain symptoms and their counterparts in low-dose group exhibited severe symptoms and convulsed;the writhing times of high-dose group was very significantly less than that of low-dose group（P＜0.01）,and the writhing times of moderate-and low-dose group was significantly less than that of control group（P＜0.05）;the highest analgesic rate was observed in high-dose group（36.73%）and the lowest analgesic rate was observed in low-dose group（14.45%）.The combined data showed Pogostemon cablin had inhibitory effect on acetic acid-induced writhing in mice,expressing good analgesic effect with exhibited dose-effect relationship.

Pogostemon cablin；acetic acid；mice；analgesia；writhing test

R282.71；S853.74

A文章順序編號：1672-5190（2016）10-0014-02

2016-09-10

項目來源：黑龍江省大學(xué)生創(chuàng)新創(chuàng)業(yè)訓(xùn)練計劃重點項目（201610223051）。

郭婷婷（1994—），女，所學(xué)專業(yè)為動物藥學(xué)。

崔一喆（1979—），男，講師，博士，主要研究方向為中藥作用機理及應(yīng)用。

（責(zé)任編輯：趙俊利）