參芪健胃湯對中晚期胃癌血清VEGF-C表達的臨床研究*

舒 鵬 江蘇省中醫(yī)院腫瘤內(nèi)科(南京 210029)

在我國發(fā)病率較高的胃癌,其血行及淋巴轉(zhuǎn)移是影響其預后的重要因素。近年來,研究發(fā)現(xiàn) VEGF家族的主要成員-血管內(nèi)皮生長因子 C(vascular endothelial growth factor-C,VEGF-C)既能促進內(nèi)皮細胞的增殖,又能促進血管滲漏,在胃癌的生長、轉(zhuǎn)移中起著極為重要的作用[1,2]。因此,本項目擬通過對健脾益氣為主的參芪健胃湯對進展期胃癌患者血清VEGF-C水平影響的研究,尋找提高胃癌患者 5年生存率、減少轉(zhuǎn)移復發(fā)的風險提供切實有效的方法。

臨床資料 選擇從 2007年 9月至 2009年 3月在江蘇省中醫(yī)院腫瘤科住院的Ⅲ～Ⅳ期胃癌患者 60例,年齡在 18～70歲之間,其中,男性 39名,女性 21名,隨機分為治療組與對照組,進行前瞻性對照研究。

治療方法 參芪健胃湯組方:黃芪 25g,薏苡仁40g,黨參 15g,茯苓、白術、白芍、半夏、蘇梗、枳殼各10g,陳皮 6g,炙甘草 5g。于化療前 1周開始持續(xù)服用至化療 4周期治療結(jié)束,2次 /d,每次 200mL。

化療方法:采用 FOLFOX2方案:奧沙利鉑 85～100 mg/(m2? d),靜滴 2h,第 1d,14d重復;亞葉酸鈣200mg/(m2? d)靜滴 2h,第 2d,14d重復;5-氟脲嘧啶400mg/m2靜滴 2h,第 1d,14d重復;5-氟脲嘧啶600mg/(m2? d)靜滴 22h,第 2d,14d重復。 治療組采用化療配合參芪健胃湯口服;對照組單純化療。

實驗方法 血清標本的收集與保存:所有胃癌患者于手術前 1d及手術后 4周抽取空腹外周靜脈血5mL,室溫放置 30～60min后,5000 r/min離心 10 min分離血清,將血清分別放入 2m LEppendorf管中,-80℃低溫冷凍待檢。

試劑、儀器與檢測方法:血清解凍后嚴格按照VEGF-A的 ELISA檢測試劑盒(美國 BD公司 )說明書進行操作。采用酶聯(lián)免疫吸附試驗(ELISA)測定血清游離狀態(tài)的 VEGF-C,用 BIO-RAD 550型酶標儀于 450 mm,490 mm處分別測的 V EGF-C的 OD值。根據(jù)標準曲線得出 VEGF-C濃度。

統(tǒng)計學方法 采用 SPSS 10.0統(tǒng)計軟件包處理,VEGF,Endostatin測定值以±s表示,組間差異采用 Mann-Whitney U檢驗。

治療結(jié)果 治療后兩組患者血清 VEGF-C表達的變化 治療組治療后血清 VEGF-C表達較治療前明顯降低,差異有統(tǒng)計學意義(P＜0.01),見表1。

表1 治療組治療前后血清 VEGF-C表達 (±s)ng? L-1

表1 治療組治療前后血清 VEGF-C表達 (±s)ng? L-1

注:t=7.514,P=0.0009。

時 間 n(缺失) 血清 V EGF-C表達水平治療前 30(0) 358.293± 45.187治療后 30(0) 245.593±33.85

治療組治療后 VEGF-C表達較對照組明顯降低(P＜0.05),差異有統(tǒng)計學意義(P＜0.01),見表2。

表2 兩組患者治療后血清 VEGF-C表達 (±s)ng? L-1

表2 兩組患者治療后血清 VEGF-C表達 (±s)ng? L-1

注:t=5.364,P=0.002。

組 別 n(缺失) 血清 V EGF-C表達水平治療組 30(0) 245.593± 37.488對照組 30(0) 289.797± 25.136

中醫(yī)癥狀比較 治療組治療后患者腹脹腹痛、消瘦乏力積分水平較對照組顯著降低,經(jīng)統(tǒng)計學分析,有顯著性差異(P＜0.05),見表3。

表3 兩組治療前后中醫(yī)癥狀比較(±s)

表3 兩組治療前后中醫(yī)癥狀比較(±s)

注:△與治療前比較 t=6.612,P=0.0005,與對照組比較 t= -2.809,P=0.033;▲與治療前比較 t=2.249,P=0.022,與對照組比較 t=-1.874,P=0.002。

治療組(n=30)對照組(n=30)癥狀 治療前 治療后 治療前 治療后腹脹腹痛 3.40± 1.07 1.43± 1.23△ 3.40± 1.40 2.63± 1.93食欲減退 3.40±1.07 1.67±1.18 2.80± 1.52 2.00± 1.89消瘦乏力 1.17± 0.460.93± 0.37▲ 1.03± 0.49 1.23± 0.73惡心嘔吐 0.40±0.50 0.07±0.25 0.30± 0.47 0.17± 0.38嘔血黑便 0.10±0.31 0.00±0.00 0.13± 0.35 0.00± 0.00

證候療效比較 兩組治療后證候療效比較,治療組顯效、有效人數(shù)均多于對照組,總有效率亦高于對照組,差異有統(tǒng)計學意義(P＜0.05),見表4。

治療后兩組患者骨髓造血機能的變化 兩組治療后比較,治療組出現(xiàn)Ⅰ°、Ⅱ°、Ⅲ°骨髓抑制的例數(shù)及骨髓抑制總發(fā)生率均低于對照組,差異有統(tǒng)計學意義(P＜ 0.05),見表5。

表4 兩組治療前后臨床證候療效比較

表5 兩組治療后骨髓抑制發(fā)生情況比較

兩組治療后腫瘤指標變化比較 兩組治療后比較,各項腫瘤標志物均無顯著差異(P＞ 0.05),見表6。

表6 兩組治療前后腫瘤標志物的比較(±s)

表6 兩組治療前后腫瘤標志物的比較(±s)

治療組 對照組腫瘤標志物 n治療前 治療后 治療前 治療后CEA 30 4.94± 1.67 5.93± 3.07 4.62± 1.47 6.29± 3.23 CA125 30 33.95± 11.67 29.49± 10.84 34.10± 10.53 34.11± 13.32 CA199 30 46.22± 17.83 44.42± 13.59 53.36± 18.46 44.71± 13.46

參芪健胃湯能下調(diào)胃癌患者外周血 VEGF-C基因的表達水平,同時,可有效改善化療患者的臨床癥狀體征、減輕化療藥物的血液學毒性。

討 論 到目前為止,胃癌的復發(fā)和遠處的轉(zhuǎn)移是患者的最終死因[3],因此,探討胃癌生長及轉(zhuǎn)移機制具有極其重要的意義。大量研究表明,新生血管、淋巴管的形成,在胃癌的發(fā)生發(fā)展及轉(zhuǎn)移過程中起著極其重要的作用[4]。

VEGF-C是已知的主要淋巴管形成生長因子,它通過對腫瘤間質(zhì)新生淋巴管內(nèi)皮細胞的增殖和遷移的調(diào)控,促進腫瘤的淋巴管形成研究 V EGF-C的調(diào)控因子對于腫瘤的病理學研究和臨床腫瘤防治有重要作用[5]。通過抑制胃癌細胞分泌VEGF-C或阻斷 VEGFC與受體 V EGFR-3結(jié)合,抑制胃癌淋巴管的形成,進而抑制胃癌的淋巴轉(zhuǎn)移,有望成為胃癌治療的一個新靶點。以 VEGF為靶點的分子靶向治療藥物如貝伐單抗、索拉菲尼等已開始進入臨床應用階段,然而,其價格十分昂貴,阻礙了其大規(guī)模的推廣使用。

根據(jù)劉沈林教授多年經(jīng)驗所創(chuàng)之參芪健胃湯,方中黨參、黃芪、茯苓、薏苡仁益氣養(yǎng)血健脾;陳皮、法夏、蘇梗、枳殼理氣化濕和中;麥芽、神曲、山楂暢胃快膈,使補而不滯,恢復中焦運化之常,雖不補而自補;大棗、甘草甘緩調(diào)和。諸藥共奏甘溫培中、健脾助運之效。

本研究表明:參芪健胃湯對胃癌患者血清 VEGFC表達具有抑制作用,同時,能有效改善化療患者的臨床癥狀體征、減輕化療藥物的血液學毒性。由此我們認為,VEGF-C可能為參芪健胃湯治療胃癌的分子靶點之一,從而從抗血管生成的角度進一步闡明了健脾復方對胃癌的治療機理。今后,可在此基礎上,進一步擴大樣本量,為中醫(yī)藥抗腫瘤復發(fā)轉(zhuǎn)移機制提供新的依據(jù),并為腫瘤抗血管生成治療開辟新途徑。

[1] KakejiY, MaeharaY, SumiyoshiY,et al.Angiogenesis as a target for gastric cancer Surgery.2002,131(1Suppl):S48-54.

[2] 葉春祥.VEGF-C在胃癌中的表達及其與淋巴管生成和淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移相關性研究進展[J].牡丹江醫(yī)學院學報,2008,29(6):60-62.

[3] 楊洪生,楊宇飛.胃癌中西綜合治療 [M].北京:人民衛(wèi)生出版社,2002:11.

[4] 羅 君,吳小翎.血管內(nèi)皮生長因子與胃癌的研究進展 [J].重慶醫(yī)學,2007,36(7):663-665.

[5] 龔 宇,胡國華.V EGF-C調(diào)控機制研究進展 [J].重慶醫(yī)科大學學報,2007,32(12):1353-1356.