甘軍紀(jì),趙 佳,李建基

(揚(yáng)州大學(xué)獸醫(yī)學(xué)院,江蘇 揚(yáng)州 225009)

羊傳染性膿皰皮炎,也稱為羊傳染性口瘡,是主要發(fā)生在家養(yǎng)山羊、綿羊和野生反芻動物的皮膚病。感染動物的臨床癥狀包括在唇、口鼻部形成丘疹,小皰和增生結(jié)痂,對成年動物來說,羊口瘡因?yàn)樗劳雎实?經(jīng)常不被認(rèn)為是重要的疾病。然而,它依然對新生羔羊有嚴(yán)重威脅,在二次感染并發(fā)的嚴(yán)重情況下死亡率可高達(dá)90%以上[1]。

1 發(fā)病情況及臨床癥狀

2009年3月,為教學(xué)試驗(yàn)所需從江蘇高郵地區(qū)購進(jìn)山羊10頭,12～18月齡,體重30～40 kg,飼養(yǎng)1月后有2頭羊先后發(fā)病。病羊癥狀不明顯,僅表現(xiàn)眼內(nèi)炎性分泌物增多,采食量稍減少。大體病變?yōu)樵诳诖街車つw發(fā)生不規(guī)則的角質(zhì)增生、疣狀結(jié)痂(圖1)。

圖1 山羊口唇周圍皮膚形成的結(jié)痂病變

2 實(shí)驗(yàn)室檢驗(yàn)[2]

2.1 樣品處理 取山羊痂皮組織加0.01 mol/L PBS研磨成均漿,-20℃凍融,8000 r/min離心2 min,吸取上清,22000 r/min離心10 min。

2.2 電子顯微鏡檢查 分別取上述離心的上清和沉淀物負(fù)染,置400目格柵上,在EM 208透射電子顯微鏡下(Philips)檢查。觀察到較多典型的傳染性膿皰皮炎病毒(圖2)。病毒粒子呈卵圓形,毛線球狀,大小約260×160 nm。未觀察到其他形態(tài)的病毒粒子。

圖2 病毒粒子呈卵圓形,毛線球狀,大小260×160 nm

2.3 細(xì)胞培養(yǎng)和病毒分離 痂皮組織用 0.01 mol/L PBS研磨制成乳劑,-70℃到37℃凍融3次,超聲波(50%)間斷處理1 min,4000 r/min離心30 min,上清中加入青霉素、鏈霉素至終濃度4000 IU/mL 、5000IU/m L,慶大霉素4000 IU/m L,37℃作用30 min,0.45μm微孔針頭濾器過濾,作為接種細(xì)胞的病毒樣品。

Vero細(xì)胞(非洲綠猴腎細(xì)胞系)培養(yǎng)于小方瓶或24孔培養(yǎng)板中,培養(yǎng)基使用含10%小牛血清的EMEM,待形成致密單層后接種病毒樣品,每孔60μL,37℃吸附2 h,加維持液(含 1%小牛血清)繼續(xù)培養(yǎng)。培養(yǎng)2 d后觀察到細(xì)胞病變。

3 治療

對發(fā)病羊口唇周圍形成的疣狀結(jié)痂用手術(shù)剪剪除,每天用5%碘酊涂擦創(chuàng)面消毒,連續(xù)4 d。每天用青霉素200萬IU/頭、硫酸鏈霉素160萬μg/頭肌肉注射,連用4 d。10 d后患病山羊痊愈。同群山羊也未有新發(fā)病例。

4 小結(jié)與討論

根據(jù)電鏡觀察的病毒粒子形態(tài)、大小以及病毒培養(yǎng)特性,可確診山羊患接觸傳染性膿皰皮炎。

山羊接觸傳染性膿皰皮炎經(jīng)常發(fā)生在產(chǎn)羔、剪毛和轉(zhuǎn)群期間。通過皮膚磨損產(chǎn)生感染。在綿羊和山羊病變經(jīng)常出現(xiàn)在口鼻和唇,有時(shí)也侵襲齒齦和舌,尤其在幼齡的羔羊。在感染動物的口、鼻皮膚上形成的疣狀結(jié)痂通常呈菜花狀,與羊痘等形成的結(jié)痂較易區(qū)別。

羊接觸傳染性膿皰皮炎的治療,目前尚無有效的治療藥物。通常使用抗生素阻止細(xì)菌的繼發(fā)感染[3]。結(jié)痂的手術(shù)處理有助于病羊痊愈,并可減少結(jié)痂脫落對環(huán)境的病毒污染。

該病毒可感染人,病變經(jīng)過2～4d的潛伏期,從麻疹到丘疹到大的結(jié)節(jié),有時(shí)形成乳頭狀瘤。病變最常局限于手、手臂或面部。因此,病料處理過程中操作人員應(yīng)注意防止感染。

[1] ChanKW,HsuWL,WangCY,etal.Differentialdiagnosis of orfvirusesbyasingle-stepPCR[J].JVirol Methods,2009,4:25.

[2]Vikφren T,Lillehaug A,Kers tedt JA ,etal .A severe outbreak of contagious ecthym a (orf)in a free-ranging mus kox(Ovibos moschatus)popu lation in Norway[ J] .Veterinary Microbiology ,2008 ,127 :10-20.

[3] 趙魁,賀文琦,高豐.羊傳染性膿皰皮炎病毒研究進(jìn)展[J].中國畜牧獸醫(yī),2008,35(11):133-136.