印楝素乳油對(duì)三葉草斑潛蠅存活和產(chǎn)卵量的影響

崔旭紅 陳 陽(yáng) 李曉宇 林 俊 商晗武

（1中國(guó)計(jì)量學(xué)院生命科學(xué)學(xué)院生物計(jì)量檢驗(yàn)檢疫技術(shù)實(shí)驗(yàn)室，浙江杭州 310018；2江蘇吳江出入境檢驗(yàn)檢疫局，江蘇吳江 215200）

三葉草斑潛蠅〔Liriomyza trifolii（Burgess）〕屬于雙翅目（Diptera）、潛蠅科（Agromyzidae）、斑潛蠅屬（Liromyza），是一種為害蔬菜、花卉等多種經(jīng)濟(jì)作物和園藝植物的重要害蟲(chóng)。由于殺蟲(chóng)劑的廣泛使用，三葉草斑潛蠅已對(duì)多種化學(xué)農(nóng)藥產(chǎn)生了不同程度的抗性，使其防治更加困難，篩選新型、不易產(chǎn)生抗性的殺蟲(chóng)劑顯得尤為重要（Ferguson，2004）。印楝素（Azadirachtin）是從印楝（Azadirachta indica）中提取的一種四環(huán)三萜類(lèi)固醇化合物，具有殺蟲(chóng)范圍廣，害蟲(chóng)不易產(chǎn)生抗藥性，對(duì)人畜、天敵較安全等優(yōu)點(diǎn)，被認(rèn)為是21世紀(jì)最有發(fā)展前景的植物源農(nóng)藥。在國(guó)外，印楝素已被用于防治多種斑潛蠅，但防治效果存在一定差異（Weintraub & Horowitz，1997；AzaMet al.，2003）。三葉草斑潛蠅是我國(guó)近年來(lái)新發(fā)生的重要害蟲(chóng)，國(guó)內(nèi)尚未有印楝素對(duì)其防治效果的報(bào)道。為了明確印楝素對(duì)三葉草斑潛蠅的控制作用，本試驗(yàn)測(cè)定了0.5 %印楝素乳油對(duì)三葉草斑潛蠅存活和產(chǎn)卵量的影響，以期為印楝素的合理利用提供理論依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 供試蟲(chóng)源、寄主植物和藥劑

試驗(yàn)于2008～2009年在中國(guó)計(jì)量學(xué)院生命科學(xué)學(xué)院生物計(jì)量檢驗(yàn)檢疫技術(shù)實(shí)驗(yàn)室進(jìn)行。

供試三葉草斑潛蠅采自本實(shí)驗(yàn)室長(zhǎng)期維持的種群。寄主植物為菜豆（Phaseolus vulgarisLinn.）品種:天馬地豆。菜豆種子經(jīng)催芽后播種，待長(zhǎng)出2片真葉后用于種群維持和試驗(yàn)。

0.5 %印楝素乳油由光明印楝產(chǎn)業(yè)開(kāi)發(fā)有限責(zé)任公司生產(chǎn)，用超純水稀釋成1.25、2.50、5.00、10.00、20.00 mg·L-15個(gè)濃度的溶液用于試驗(yàn)。

1.2 試驗(yàn)方法

1.2.1 印楝素乳油對(duì)三葉草斑潛蠅不同蟲(chóng)態(tài)存活的影響 卵:將菜豆清潔苗放入工氣候箱〔溫度（26±1）℃，相對(duì)濕度70 %±5 %，光照時(shí)間16 h/8 h（晝/夜）〕中的養(yǎng)蟲(chóng)籠（30 cm×30 cm×30 cm）內(nèi)，每籠接入30對(duì)成蟲(chóng)，任其取食產(chǎn)卵，24 h后驅(qū)除成蟲(chóng)并將植株從籠中取出。在體視顯微鏡下用記號(hào)筆對(duì)卵進(jìn)行標(biāo)記，為了避免蟲(chóng)口密度過(guò)大造成競(jìng)爭(zhēng)，保持每1 cm2葉片上的卵數(shù)≤1個(gè)，多余的卵用解剖針扎死。將標(biāo)記好的菜豆苗分成5組，隨后用噴霧器將稀釋的印楝素乳油溶液（1.25、2.50、5.00、10.00、20.00 mg·L-1）噴灑于植株正反葉面，直至藥液滴落。待藥液不滴后將植株重新放回人工氣候箱，2 d后開(kāi)始觀(guān)察記錄卵的孵化情況，隨后每隔24 h調(diào)查1次，直至沒(méi)有卵孵化。每個(gè)處理的卵數(shù)不少于20粒。

幼蟲(chóng):將菜豆清潔苗放入養(yǎng)蟲(chóng)籠中，接蟲(chóng)24 h后驅(qū)除成蟲(chóng)并取出植株，隨后將接好蟲(chóng)的植株放入培養(yǎng)箱，待卵孵化發(fā)育至3齡幼蟲(chóng)時(shí)用于試驗(yàn)。幼蟲(chóng)齡期參考鄭丹等（2009）的方法和葉片上潛道寬度變化情況來(lái)確定，將葉片上3齡幼蟲(chóng)留下，其余蟲(chóng)態(tài)用針扎死。將接好蟲(chóng)的菜豆分成5組，隨后用噴霧器將稀釋好的印楝素藥液噴灑于植株正反葉面，直至藥液滴落。待藥液不滴后將植株重新放回人工氣候箱，24 h后開(kāi)始觀(guān)察記錄幼蟲(chóng)化蛹情況，以后每隔24 h調(diào)查1次，直到?jīng)]有幼蟲(chóng)化蛹為止。每個(gè)處理的幼蟲(chóng)數(shù)量不少于25頭。

蛹:隨機(jī)采集三葉草斑潛蠅蛹放入培養(yǎng)皿中，培養(yǎng)皿底部鋪有濾紙，隨后用噴霧器將稀釋的印楝素藥液噴灑于培養(yǎng)皿內(nèi)，1 min后注意用濾紙將多余藥液吸去。24 h后開(kāi)始觀(guān)察記錄蛹羽化的情況，直至沒(méi)有蛹羽化。每個(gè)處理的蛹數(shù)量不少于25頭。

以噴灑清水的處理作為空白對(duì)照。每個(gè)處理3次重復(fù)。

1.2.2 印楝素乳油對(duì)三葉草斑潛蠅成蟲(chóng)產(chǎn)卵量的影響 將噴灑過(guò)不同濃度印楝素藥液和清水的菜豆苗各1株隨機(jī)擺放在養(yǎng)蟲(chóng)籠中，接入25對(duì)三葉草斑潛蠅成蟲(chóng)（♀∶♂=1∶1），48 h后采用染色法（Parrella & Robb，1982）調(diào)查記錄每片葉上的卵量。各處理3次重復(fù)。

1.3 數(shù)據(jù)分析

采用統(tǒng)計(jì)軟件SPSS10.0和SPSS Inc（USA）進(jìn)行數(shù)據(jù)分析。用單因素方差分析（One-way Analysis，S-N-K test）來(lái)檢驗(yàn)不同處理間的差異顯著性。

2 結(jié)果與分析

2.1 印楝素乳油對(duì)三葉草斑潛蠅不同蟲(chóng)態(tài)存活的影響

由表1可知，用1.25～20.00 mg·L-1的印楝素噴灑菜豆后，葉片上三葉草斑潛蠅卵的孵化率超過(guò)90.0 %，與對(duì)照差異不顯著。3齡幼蟲(chóng)的死亡率隨著印楝素藥液濃度的升高迅速升高。當(dāng)印楝素濃度為1.25 mg·L-1時(shí)，超過(guò)90 %的3齡幼蟲(chóng)能夠正常化蛹，與對(duì)照差異不顯著；印楝素濃度為2.50 mg·L-1及以上時(shí)，3齡幼蟲(chóng)的死亡率迅速上升；印楝素濃度為20.00 mg·L-1時(shí)，3齡幼蟲(chóng)全部死亡。三葉草斑潛蠅蛹經(jīng)過(guò)印楝素處理后，死亡率迅速上升，遠(yuǎn)高于卵和3齡幼蟲(chóng)。當(dāng)噴灑1.25 mg·L-1印楝素后，蛹死亡率超過(guò)70 %；經(jīng)過(guò)10.00 mg·L-1印楝素處理后，三葉草斑潛蠅的蛹全部死亡。因此，印楝素對(duì)三葉草斑潛蠅卵孵化沒(méi)有顯著影響，但對(duì) 3齡幼蟲(chóng)和蛹致死作用明顯。

表1 印楝素藥液處理后三葉草斑潛蠅的死亡率和成蟲(chóng)產(chǎn)卵量、產(chǎn)卵忌避率

2.2 印楝素乳油對(duì)三葉草斑潛蠅成蟲(chóng)產(chǎn)卵量的影響

經(jīng)1.25～20.00 mg·L-1的印楝素處理后，菜豆葉片上三葉草斑潛蠅成蟲(chóng)的產(chǎn)卵量顯著低于對(duì)照，且隨著印楝素濃度的增加，三葉草斑潛蠅成蟲(chóng)產(chǎn)卵量呈現(xiàn)出逐漸降低的趨勢(shì)，印楝素對(duì)三葉草斑潛蠅雌蟲(chóng)產(chǎn)卵具有明顯的忌避作用（表1）。

3 結(jié)論與討論

印楝素對(duì)三葉草斑潛蠅卵孵化沒(méi)有顯著影響，對(duì)幼蟲(chóng)、蛹有明顯的致死作用，其中對(duì)蛹的致死作用大于幼蟲(chóng)，這與前人對(duì)美洲斑潛蠅和南美斑潛蠅的研究結(jié)果一致（Weintraub & Horowitz，1997；Hossain，2005）。因此，根據(jù)三葉草斑潛蠅的發(fā)生狀況選擇使用印楝素的時(shí)機(jī)對(duì)提高其防治效果非常重要。

根據(jù)報(bào)道，印楝素對(duì)南美斑潛蠅產(chǎn)卵量沒(méi)有顯著影響（Weintraub & Horowitz，1997），但本試驗(yàn)表明，2.50 mg·L-1的印楝素即對(duì)三葉草斑潛蠅成蟲(chóng)表現(xiàn)出明顯的產(chǎn)卵忌避作用（產(chǎn)卵忌避率＞50 %）；成蟲(chóng)產(chǎn)卵量隨著印楝素濃度的增加顯著下降。這可能與印楝素的施用方式有關(guān)，采用噴霧葉片的方式使用印楝素對(duì)多種害蟲(chóng)的產(chǎn)卵有抑制作用，灌根的方式則產(chǎn)卵忌避較差（文吉輝 等，2007）。成蟲(chóng)的產(chǎn)卵情況對(duì)害蟲(chóng)后代種群發(fā)展具有重要影響，因此使用印楝素防治三葉草斑潛蠅時(shí)宜采用噴霧的方式。

文吉輝，侯茂林，盧偉，黎家文．2007．印楝素乳油不同施用方式對(duì)煙粉虱寄主選擇和產(chǎn)卵的影響．中國(guó)生物防治，23（4）:333-337.

鄭丹，崔旭紅，李志江，陳陽(yáng)，商晗武．2009．三葉草斑潛蠅對(duì)6種寄主植物的選擇適應(yīng)性及其與寄主化學(xué)物質(zhì)含量的關(guān)系．植物保護(hù)，36（3）:93-96.

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