王 麗,秦春華,哈 敏,張麗萍,張德喜,孟 華,王樹(shù)聰,史遠(yuǎn)剛＊,2

(1.寧夏四正生物工程技術(shù)研究中心,寧夏 銀川 750200;2.寧夏大學(xué)農(nóng)學(xué)院,寧夏 銀川 750021)

奶牛凍精生產(chǎn)中值得注意的問(wèn)題

王 麗1,秦春華1,哈 敏1,張麗萍1,張德喜1,孟 華1,王樹(shù)聰1,史遠(yuǎn)剛＊1,2

(1.寧夏四正生物工程技術(shù)研究中心,寧夏 銀川 750200;2.寧夏大學(xué)農(nóng)學(xué)院,寧夏 銀川 750021)

作者從原精、冷凍前、冷凍過(guò)程中、冷凍后的幾個(gè)環(huán)節(jié)論述了質(zhì)量控制過(guò)程中的幾個(gè)值得注意的問(wèn)題。

奶牛;冷凍精液;生產(chǎn)過(guò)程;質(zhì)量控制

近幾年,國(guó)家十分重視種公牛在提高整個(gè)牛群質(zhì)量的突出作用;相繼在2005年和2009年出臺(tái)了良補(bǔ)措施。凍精生產(chǎn)要經(jīng)歷采精,原精質(zhì)檢,原精稀釋,冷凍精液制作,冷凍精液質(zhì)檢等很多環(huán)節(jié),因此,要獲得優(yōu)良的凍精,保證較高的受胎率,必須加強(qiáng)每個(gè)環(huán)節(jié)的質(zhì)量控制。

1 原精的質(zhì)量控制

1.1 加強(qiáng)種公牛的飼養(yǎng)管理

種公牛飼養(yǎng)管理的,直接關(guān)系到精液原精的質(zhì)量。因此,為了讓公牛產(chǎn)生更加優(yōu)質(zhì)的精液,在種公牛飼養(yǎng)管理中,應(yīng)該做到①在營(yíng)養(yǎng)方面,要重視種公牛各飼料成分的全價(jià)和均衡,適當(dāng)加大維生素(如VA 、VB6、VB12、VE)的含量,有條件的可以在公牛舍增加舔磚,及時(shí)補(bǔ)充公牛所需要的維生素和微量元素;②在飼料搭配方面,合理選擇精飼料,限制青粗飼料的飼喂量,多飼喂優(yōu)質(zhì)的干草(如苜蓿和羊草);③在膘情方面,成年種公牛體況不易過(guò)肥,膘情以中等為宜,并依據(jù)公牛體重合理調(diào)整日糧水平,保持種公牛健康的體質(zhì)和旺盛的精力;④在管理方面,在管理上,要做到“三定”:即飼養(yǎng)人員固定,采精人員固定,采精時(shí)間固定。并且,讓公牛每天做運(yùn)動(dòng),經(jīng)常對(duì)種公牛刷試身體和按摩睪丸;⑤在疫病控制方面,經(jīng)常檢查牛蹄有無(wú)異常,對(duì)異常牛蹄要及時(shí)處理;要做好牛群的防疫和疾病控制工作,嚴(yán)格執(zhí)行防檢疫和獸醫(yī)衛(wèi)生制度,按照防疫規(guī)程,每年春秋兩季進(jìn)行牛的疫苗接種,定期對(duì)牛舍、運(yùn)動(dòng)場(chǎng)、采精室等進(jìn)行消毒,對(duì)飼養(yǎng)區(qū)實(shí)行封閉式管理,夏季做好滅蠅和滅蚊工作,減少和消除疫病的傳播。

1.2 提高精液原精的品質(zhì)

精液原精品質(zhì)包括精子活力、畸形率、精子密度等方面。在生產(chǎn)過(guò)程中,要區(qū)別對(duì)待種公牛,對(duì)于性欲差不容易爬跨的種公牛,要有足夠的耐心,讓其空爬跨或者在旁觀望,更換采精地點(diǎn)或臺(tái)牛來(lái)刺激其性欲。而且,對(duì)種公牛的采精頻率要適當(dāng),成年種公牛冬春兩季每周采精2次,每次射精兩回,采精間隔在30min左右,以利于體力及性欲的恢復(fù),維持強(qiáng)的性反射。種公牛的性欲旺盛,射精量大,一般射精量在4～10mL,精子密度在10～20億/mL,精液原精應(yīng)避免陽(yáng)光照射,并放在32℃水浴鍋內(nèi)等待稀釋。

1.3 注意采精管理

采精要在飼喂或飲水半小時(shí)后進(jìn)行,并要密切注意觀察種公牛的射精動(dòng)作,以防形成抵人等惡癖。采精場(chǎng)所要干凈衛(wèi)生,采精完畢后要用高壓水槍對(duì)場(chǎng)所進(jìn)行沖刷,凡接觸到精液的器具要嚴(yán)格消毒,用完后先用清洗液沖刷干凈,然后在烘箱內(nèi)烘干并用紫外燈消毒,假陰道內(nèi)胎避免漏氣、漏水和形成皺折,防止采精時(shí)水進(jìn)入精液中影響其品質(zhì)。臺(tái)畜牛要選擇健康、體壯、大小適中、性情溫順的母?；蚬?。每次采精時(shí)對(duì)臺(tái)牛的后驅(qū),特別是尾根、臀部、肛門(mén)等部位要徹底清洗、消毒,再用衛(wèi)生紙擦干,而后將臺(tái)牛保定在采精架內(nèi)并將尾巴栓系,嚴(yán)格注意避免采精時(shí)交叉感染疾病。

2 冷凍前的質(zhì)量控制

2.1 注重實(shí)驗(yàn)室衛(wèi)生

雜質(zhì)、污垢、微生物、脂肪、微量藥品都會(huì)嚴(yán)重危害精子的生命,因此,務(wù)必使采精場(chǎng)所和凍精制作實(shí)驗(yàn)室隔離,實(shí)驗(yàn)室要有專人負(fù)責(zé)管理,勤打掃,保持地面清潔,常用紫外線對(duì)其消毒,操作人員保持個(gè)人衛(wèi)生,并經(jīng)常對(duì)實(shí)驗(yàn)儀器進(jìn)行維護(hù),保證儀器正常運(yùn)作。

2.1 精液原精的品質(zhì)鑒定

實(shí)驗(yàn)員將采集的精液掛上公牛號(hào)的標(biāo)識(shí)牌后,首先應(yīng)用分光廣度計(jì)測(cè)定精子密度,該儀器同時(shí)也能測(cè)出精液的稀釋量和預(yù)支數(shù);然后應(yīng)用帶有顯示器的相差顯微鏡評(píng)定精子活力,務(wù)必提前對(duì)顯微鏡鏡臺(tái)、載玻片、蓋玻片進(jìn)行預(yù)熱。在鏡檢前,滴一滴新鮮精液,進(jìn)行活力檢查,精子活力低于0.65的為不合格精液,廢棄。

2.3 稀釋液的配制

在配制稀釋液時(shí),必須準(zhǔn)確稱量各藥品,保證稀釋液為等滲稀釋液。稀釋液最好現(xiàn)用現(xiàn)配,所用卵黃要取自健康雞群的新鮮雞蛋,而且配好后100mL稀釋液中加青霉素、鏈霉素(人用)各5～10 IU,抑制和殺滅細(xì)菌。

2.4 精液的稀釋

稀釋時(shí),稀釋液與精液同溫,稀釋液可放入37℃的水浴鍋中進(jìn)行預(yù)熱,然后對(duì)精液進(jìn)行1∶1的稀釋,將稀釋后的精液在32℃的水浴鍋中暫存 15 min再加稀釋液到最終稀釋量。稀釋時(shí),要將稀釋液沿試管壁緩慢注入精液中,防止機(jī)械性損傷精子。

3 冷凍過(guò)程中的質(zhì)量控制

3.1 平衡時(shí)間要充足

稀釋后的精液,讓其在4 h左右時(shí)間內(nèi),溫度逐漸降到4℃?？缮衔邕M(jìn)行稀釋,下午進(jìn)行凍精制作。時(shí)間越長(zhǎng),解凍時(shí)影響精子的復(fù)蘇;時(shí)間不足,冷凍時(shí)精子不能迅速越過(guò)有害溫區(qū),損傷精子。并且,在平衡過(guò)程中一定要保證溫度不能回升,同時(shí)要避免強(qiáng)光進(jìn)入低溫柜。

3.2 平衡后的鏡檢

在對(duì)稀釋精液進(jìn)行分裝前,要對(duì)平衡后的精液進(jìn)行鏡檢,對(duì)精子活力不太好的精液分裝幾支進(jìn)行"預(yù)冷凍",看其冷凍效果,如果冷凍效果不好,便把平衡后的精液廢棄。

4 冷凍后的質(zhì)量控制

4.1 冷凍精液的鏡檢

冷凍結(jié)束后,要快速裝袋,投入液氮中,待鏡檢。對(duì)每頭種公牛的凍精抽檢幾支,如活力大于0.35,則被認(rèn)為是合格產(chǎn)品,可以入庫(kù);活力低于0.35為不合格產(chǎn)品,廢棄。在出售前,要由專門(mén)的質(zhì)檢人員對(duì)凍精再進(jìn)行一次出站前檢驗(yàn),同樣,活力低于0.35的為不合格產(chǎn)品,廢棄,不能出售。除此之外,質(zhì)檢人員還要定期對(duì)總庫(kù)凍精五項(xiàng)質(zhì)量指標(biāo)進(jìn)行隨機(jī)抽檢,發(fā)現(xiàn)問(wèn)題及時(shí)向生產(chǎn)部門(mén)匯報(bào),使問(wèn)題及早得以解決,保證凍精高質(zhì)量生產(chǎn)。

4.2 冷凍精液的微生物學(xué)檢測(cè)

精液中的病原微生物和非病原微生物的含量對(duì)精液的品質(zhì)、保存及受胎效果都有重要影響,因此,為了監(jiān)控凍精的質(zhì)量,實(shí)驗(yàn)員要定期對(duì)凍精進(jìn)行微生物學(xué)檢測(cè)。利用平板計(jì)數(shù)法,觀察凍精中細(xì)菌菌落的數(shù)量,如果每份劑量?jī)鼍屑?xì)菌菌落數(shù)超過(guò)800個(gè),則為不合格產(chǎn)品。通過(guò)定期測(cè)定精液中細(xì)菌菌落的情況,掌握種公牛的健康狀況,進(jìn)而為種公牛的保健及其杜絕污染源制定措施提供重要依據(jù)。

總之,凍精生產(chǎn)從采精到出售涉及許多環(huán)節(jié),為了生產(chǎn)出更加優(yōu)質(zhì)的凍精,必須加強(qiáng)種公牛的飼養(yǎng)管理,實(shí)驗(yàn)室管理,凍精檢測(cè)等各個(gè)環(huán)節(jié)的質(zhì)量控制,最大發(fā)揮種公牛的種用價(jià)值,保證牛群品種改良工作順利進(jìn)行。

Deserving Noted Problems in Frozen Semen Production of Dairy Cattle

WANG Li1,QIN Chun-hua1,HA Min1,ZHANG Li-ping1,ZHANG De-xi1,MENG Hua1,WANG Shu-cong1,SHI Yuan-gang＊1,2

(1.S izheng Biological Engineering Technology Research Center,Yinchuan,Ningxia 750200;2.College of Agronomy,Ningxia University,Yinch uan,Ning xia 750021)

Several deserving noted problems during the quality control were described from the aspects of original semen,pre freezing,freezing process and post freezing.

Dairy Cattle;Frozen Semen;Production Process;Quality Control

S816.73

A

1001-9111-(2010)03-0077-02

2010-01-13

2010-01-19

現(xiàn)代農(nóng)業(yè)產(chǎn)業(yè)技術(shù)體系(奶牛)(nycytx-0106);公益性行業(yè)(農(nóng)業(yè))科研專項(xiàng)-(nyhyzx07-035)。

王麗(1980-),女,寧夏銀川人,助理畜牧師,主要從事牛冷凍精液生產(chǎn)工作。

＊通訊作者:史遠(yuǎn)剛(1962-),男,寧夏銀川人,教授,主要從事胚胎工程及遺傳育種研究。