王一明 張海蘭 謝鵬貴 伊犁職業(yè)技術(shù)學院 835000

1 豬精子的特點

1.1 豬精液的理化特性

正常公豬的精液單次射精量為200-500m L，密度為2-3億/m L，顏色為乳白色或淺灰色，呈云霧狀，略帶腥味，PH值為7.0-7.5。

1.2 豬精子的形態(tài)和結(jié)構(gòu)

豬精子分頭部、頸部和尾部等三個主要部分，表面有質(zhì)膜覆蓋，是含有遺傳物質(zhì)并有活動能力的雄配子。

（1）頭部

豬精子的頭主要由細胞核構(gòu)成，內(nèi)含遺傳物質(zhì)DNA。

（2）頸部

豬精子的頸部位于頭的基部，是頭和尾的連接部，也可作為精子頭的部分。精子尾部有纖絲在該部與頭相連接。頸部是精子最脆弱的部分，特別是精子在成熟、體外處理和保存過程中，某些不利因素的影響極易造成尾的脫離，形成無尾精子。

（3）尾部

精子最長的部分，是精子的代謝和運動器官。精子主要靠尾部的鞭索波動推動精子向前運動，由于精子能量來自尾的中段，頭部有缺陷或損傷的精子仍可有運動的能力。

（4）畸形率及畸形精子分類

畸形率是指異常精子的百分率，一般要求畸形率不超過18%，其測定可用普通顯微鏡,但需伊紅或姬姆沙染色,相差顯微鏡可直接觀察活精子的畸形率。公豬使用過頻或高溫環(huán)境會出現(xiàn)精子尾部帶有原生質(zhì)滴的畸形精子;畸形精子種類有很多,如巨型精子、短小精子、雙頭或雙尾精子、頂體膨脹或脫落、精子頭部殘缺或與尾部分離、尾部變曲。要求每頭公豬每2周檢查一次精子畸形率。

2 實驗室精液質(zhì)量檢測指標

2.1 感官檢測

（1）顏色

正常的精液是乳白色或淺灰色，呈云霧狀，精子密度越高，色澤愈濃，其透明度愈低。異常精液：如帶有綠色或黃色是混有膿液或尿液;帶有淺紅色或紅褐色是含有血液，表明精液中有炎癥物，這樣的精液應舍棄不用，并會同獸醫(yī)尋找原應，及時治療。

（2）氣味

正常豬精液略帶腥味，如果氣味異常，可能是混有尿液、膿液、糞渣或其他異物的表現(xiàn)，應廢棄不用。氣味異常常伴有顏色的變化，因此可將色澤和氣味檢查結(jié)合進行，使鑒定結(jié)果更為準確。

（3）pH

以pH計或pH試紙測量。正常精液的pH值為7.0-7.5，呈中性或弱堿性。

（4）采精量的測定

測量精液量主要用電子天平稱量法。按1g=1m L計，精液量（g）=（精子的質(zhì)量+集精杯的質(zhì)量）-集精杯子的質(zhì)量。避免以量筒等轉(zhuǎn)移精液盛放容器的方法測量精液的體積，減少精子的死亡。

豬的射精量因品種、年齡、使用頻率不同有較大的差異，通常公豬的一次射精量為200-500m L。公豬射精過多或過少，應分析原因。采精次數(shù)過多，公豬生殖機能衰退，日常管理不當，采精技術(shù)不熟練均可能造成一次采精量過少；一次采精量過多則可能是由于混入過多的副性腺分泌物及尿液等。

2.2 顯微鏡檢測

（1）精子活率的檢測

精子的活率是指精液在37℃條件下呈直線運動的精子占全部精子總數(shù)的百分率，它與精子授精能力密切相關(guān)，是評定精液品質(zhì)的重要指標。精子活率的評定一般用目測估測法在顯微鏡下觀察精子活率，按0.1-1.0的十級評分法進行評估。檢查活率時應在37℃條件下進行。

（2）精子密度檢查

精子密度值即每毫升精液中含有的精子數(shù)量，是確定精液稀釋倍數(shù)、評定精液品質(zhì)的一個重要指標，正常公豬的精子密度為2-3億／m L，有的可高達5億/m L。檢測精子密度的方法主要有估測法、精子密度儀法、血細胞計數(shù)方法等。

①估測法

在顯微鏡下觀察精子的分布，精子與精子之間的距離少于一個精子長度為“密”，其距離相當于一個精子的長度為“中”，其距離大于一個精子的長度為“稀”。此種方法主觀性強，誤差大，只能進行粗略的估計。

②血細胞計數(shù)方法

該方法最準確，但速度太慢，生產(chǎn)實踐中主要用于校正精子密度儀的讀數(shù)。

血細胞計數(shù)方法：①以微量加樣器取具有代表性原精液200μ1，用3%Nac1稀釋10倍；②在血細胞計數(shù)板上放一塊蓋玻片，取一滴稀釋液后精液置于計數(shù)板的槽中，靠虹吸將精液吸入計數(shù)室內(nèi)；③在高倍鏡下計數(shù)5個中方格內(nèi)的精子總數(shù)，將該數(shù)乘以50萬，即得原精液每毫升的精子數(shù)（即精液密度）。

（3）精子畸形率檢測

精子畸形率的大小對精子的受精能力存在一定的影響。先前的研究指出，精液中畸形的精子比率過高將會減少精液的受精能力，但對于畸形率過高的精液通過增加精液的用量也可以提高其受精效果。

精子畸形率的測定可以用伊紅或姬姆薩等染料對精子進行染色后用普通顯微鏡觀察，或者用相差顯微鏡直接觀察或精子的畸形率。

3 精液體外處理過程中的注意事項

3.1 精液稀釋注意事項

（1）稀釋液在精液稀釋前1-2h配置，均勻攪拌，再過濾一次，密封，置于37℃恒溫水浴箱中。在精液稀釋前幾分鐘添加抗生素，太早易失效。

（2）精液稀釋要求與精液直接接觸的器材，用蒸餾水清洗并進行高溫消毒。

（3）精液稀釋要在25℃的恒溫室內(nèi)進行，新鮮精液未經(jīng)品質(zhì)檢查或檢查不合格 （直線運動活率＜0.7，區(qū)別于活力）的精液不能稀釋。

（4）新鮮精液采集后應盡快稀釋，原精貯存時間不宜超過3m in。

（5）稀釋時嚴禁太陽光照射精液，應處于暗處操作。

（6）精液要求等溫稀釋。精液與稀釋液的溫差不能超過1℃，以精液溫度為標準，來調(diào)節(jié)稀釋液的溫度。

（7）稀釋時，將稀釋液沿杯（瓶）壁緩慢加入到精液中，然后輕輕搖動或用消毒玻璃棒沿一個方向緩慢攪拌，使其混合均勻。

（8）高倍稀釋時，應先進行低倍稀釋（1：1-2），稍待片刻后將余下的稀釋液沿壁緩慢加入，以防造成“稀釋打擊”。

（9）稀釋倍數(shù)的確定：精液稀釋的比例應根據(jù)原精液的品質(zhì)、輸精量、配種母豬頭數(shù)以及是否需要運輸和貯存而定。一般以每個輸精計量含有效精子數(shù)40億以上，輸精量為80-100m L來確定稀釋倍數(shù)。

（10）稀釋后要求靜置片刻再作精子活率檢查。如果稀釋前后精子活率無太大變化，即可進行分裝與保存；如果活率下降過快，說明稀釋液的配置或稀釋操作有問題，不宜使用，并應查明原因加以改進。

3.2 精液保存注意事項

（1）將分裝完的精液置22-25℃的室溫1-2h后，放入17℃恒溫箱貯存，也可以將精液瓶用幾層紗布或干毛巾包好后直接放置于17℃恒溫箱中，讓其溫度緩慢下降，避免因溫度下降過快造成死精子數(shù)增多等。

（2）保存過程中要求每12h將精液搖勻一次，防止精子沉淀而引起死亡。每次搖勻時動作要輕緩均勻，同時觀察精液的色澤狀態(tài)，并做好記錄，發(fā)現(xiàn)異常及時處理。

（3）保存過程中要切實注意冰箱內(nèi)溫度的變化（通過溫度計的顯示），以免因意想不到的原因而造成電壓不穩(wěn)而導致溫度升高或降低。

（4）盡量減少精液保存箱開關(guān)次數(shù)，以減少對精子的影響。

（5）使用前對保存的精液進行活率檢查，活率＜0.6的精液應棄之不用。

（6）用短效稀釋液稀釋的精液可保存3天，中效稀釋液可保存4-6天，用長效稀釋液稀釋的精液可保存7天以上。但無論何種稀釋液保存精液，都應盡快用完，否則會影響使用效果。

3.3 精液運輸應注意的事項

（1）精液在運輸前必須經(jīng)過嚴格的檢查，活率＜0.7的精液嚴禁調(diào)出。

（2）包裝瓶或包裝袋中應盡量排出空氣，以減少在運輸過程中的震蕩。

（3）在運輸過程中，應嚴格避光。

（4）精液運輸?shù)竭_目的地后，檢查精子活率，合格后方可接收。

4 小結(jié)

精子檢測的主要目的就是快速、準確地確定其精液活率，以滿足生產(chǎn)的需要。利用目測及光學顯微鏡來評價精液的常規(guī)指標，保證了輸精質(zhì)量，減少了因精液質(zhì)量差而引起的空懷；反映了種公豬精液品質(zhì)的好壞，精液品質(zhì)好的就充分發(fā)揮其遺傳潛力，反之做以治療或淘汰，從而減少成本，減少母豬返情，提高受胎率和產(chǎn)仔數(shù)等。

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