鄒 蘭，鄒 敏，李陸梅，黨啟峰，王樹杰

（1.新疆生產(chǎn)建設(shè)兵團(tuán)農(nóng)八師143團(tuán)農(nóng)業(yè)科，新疆 石河子 832021；2.青島易邦生物工程有限公司，山東 青島 266032；3.新疆西部牧業(yè)股份有限公司，新疆 石河子 832000）

附紅細(xì)胞體病（Eperythrogoonosis）是由附紅細(xì)胞體（Eperythrozoon）寄生于人和動物的紅細(xì)胞表面、血漿、組織液和脊髓中，引發(fā)的以發(fā)熱、黃疸性貧血、呼吸困難為主要特征引起一種傳染性人畜共患傳染病[1-2]。國內(nèi)外曾有人稱之為黃疸性貧血、類邊蟲病、赤獸體病或紅皮病。本病多發(fā)于夏秋季節(jié)，感染率和發(fā)病率均較高，目前世界上已有30多個(gè)國家和地區(qū)有關(guān)于本病的報(bào)道，我國是目前附紅細(xì)胞體病流行最為嚴(yán)重的國家之一[3]。目前，該病已對世界范圍內(nèi)的畜牧業(yè)發(fā)展及人類健康構(gòu)成了嚴(yán)重威脅，是一種急待控制的疫病之一?，F(xiàn)就本病的病原學(xué)、流行病學(xué)、診斷學(xué)以及現(xiàn)存的學(xué)術(shù)爭論綜述如下。

1 概述

1.1 病原學(xué)

根據(jù)《伯杰氏細(xì)菌鑒定手冊》第8版將附紅體列入立克次氏體目（Rickettsiaies）、無形體科（Anoplasmataceae）、血蟲體屬也稱附紅細(xì)胞體屬（Eperythrozoon）[4]。按照宿主的不同附紅細(xì)胞體可分為14種，具有致病性的主要有豬附紅體（E.suis）、綿羊附紅體（E.ovis）和人附紅體（E.humanus）等少數(shù)幾種[5]，病原具有嚴(yán)格的種特異性。附紅體為多形態(tài)單細(xì)胞、無明顯細(xì)胞器和胞核結(jié)構(gòu)的原生體；革蘭氏染色陰性，吉姆薩氏染色呈淡紅或淡紫色；外觀呈大、小球體，且小球體與大球體相連，或呈鏈狀、足掌狀、葫蘆狀，直徑0.3～1.5 μ m，厚約10nm，中心凹陷。人附紅細(xì)胞體的形態(tài)多變呈球狀、啞鈴狀、卵圓狀、星狀等，并呈各種扭動狀態(tài)，直徑為0.3～0.8 μ m。豬附紅細(xì)胞體較大，呈圓形—卵圓形，其表面包被有一層膜，平均直徑為0.2～2 μ m，單獨(dú)或成鏈狀附著于紅細(xì)胞表面。感染機(jī)體后，在紅細(xì)胞上以二分裂及出芽分裂法增殖。附紅細(xì)胞體對化學(xué)藥品及干燥的抵抗力弱，一般的堿性消毒藥幾分鐘即可殺死。在酸性溶液中活力明顯增強(qiáng)，但遇碘液即停止運(yùn)動，并不著色，在臨床上具有鑒別診斷意義。加熱60℃、30min，即可使附紅體失去致病活性。低溫冷凍情況下，可存活數(shù)年之久，這在本病的傳播上有重要意義。研究表明動物及人患附紅體病治愈后數(shù)年內(nèi)繼續(xù)呈隱性感染狀態(tài)，甚至終生攜帶。

1.2 疫病史及分布

附紅細(xì)胞體最早由Schilling[6]于1928年在嚙齒類動物體內(nèi)查到類球狀血蟲體（E.coccoides）。1937年Neitz等[7]在綿羊紅細(xì)胞上或在其周圍發(fā)現(xiàn)有多形態(tài)的微生物寄生，命名為綿羊附紅體（E.ovis）。1950年Splitter[8]首次在豬身上發(fā)現(xiàn)了由這種微生物引起的疾病。1986年，Puntaric等[9]正式描述了人類的附紅體病。到現(xiàn)在本病已遍布世界五大洲共27個(gè)國家。我國對此病的研究較晚，直至1981年以后才相繼報(bào)道在畜、禽中發(fā)現(xiàn)附紅體病[10]。1991年，內(nèi)蒙古自治區(qū)邰秀珍等[11]在國內(nèi)首次報(bào)告人的附紅體病病例。1993年由我國衛(wèi)生部組織的相關(guān)流行病學(xué)研究證實(shí)了附紅體病在人群中的感染。2003年我國農(nóng)業(yè)部組織的全國豬附紅細(xì)胞體病流行病學(xué)調(diào)查發(fā)現(xiàn)，該病在我國主要養(yǎng)豬省份均有分布，并在一些地區(qū)呈地方性流行，但死亡率較低。

1.3 致病性

附紅細(xì)胞體病是由多種因素引起的條件性疫病，只有當(dāng)動物或人體內(nèi)的附紅細(xì)胞體達(dá)到一定數(shù)量，機(jī)體抵抗力下降或處于應(yīng)激狀態(tài)（生理性或病理性的）時(shí)發(fā)病。摘除脾臟、幼齡、高齡、免疫功能發(fā)育不全及減退的動物，附紅體的感染率、發(fā)病率高?；颊弑冉】等巳焊腥韭曙@著增高；應(yīng)用免疫抑制劑治療者，附紅體感染均較嚴(yán)重。附紅體的發(fā)病機(jī)制是復(fù)雜的、多方面的，迄今尚不清楚。推測既有繁殖侵襲性的，也有毒素代謝性的，還有免疫遺傳、免疫缺陷及自身免疫性的。

1.4 疫病危害

附紅細(xì)胞體感染人或動物以后，多呈隱性經(jīng)過，當(dāng)機(jī)體抵抗力下降、體內(nèi)附紅體達(dá)到一定數(shù)量后導(dǎo)致發(fā)病。本病可通過水平方式、垂直方式傳播。病原可通過器械、生物制品和蚊蟲叮咬傳播，從而在動物間或人群中造成大面積感染，一旦發(fā)生應(yīng)激反應(yīng)、機(jī)體免疫力降低便會在人群或動物中引起暴發(fā)。該病易與豬瘟、豬流感、藍(lán)耳病等動物疫病并發(fā)或繼發(fā)，容易引起誤診或漏診，引起死亡。動物一旦發(fā)生附紅體病，可導(dǎo)致生產(chǎn)能力下降，乳、肉產(chǎn)量減少，生長發(fā)育受阻，母畜流產(chǎn)、早產(chǎn)或死胎，嚴(yán)重時(shí)引起死亡。隱性感染動物長期帶毒、耐過動物長期甚至終生散毒是本病難以控制的主要原因。近年來，該病的感染率、發(fā)病率及死亡率逐年上升，給我國的畜牧業(yè)發(fā)展、公共衛(wèi)生安全帶來了巨大的損失和危害。

2 診斷及預(yù)防

2.1 流行病學(xué)特征

病人、病畜以及耐過者的分泌物、排泄物及體液都是本病的重要傳染源。主要傳播方式包括:被污染的針頭、剪刀、手術(shù)器械、保定器械，吸血的節(jié)肢動物如血虱、疥螨、蚊蠅等，胎盤感染垂直傳染，血液、體液，耐過的帶菌動物。易感動物有豬、牛、羊、雞、驢、犬、馬、狐、兔、馬、鼠、人等 14 種[5]。其中以豬、牛、羊、犬、兔、鼠和人發(fā)病較多。附紅體具有嚴(yán)格的種特異性，不同種動物間一般不會相互感染。該病的發(fā)生具有季節(jié)性，夏秋季發(fā)病較多，多呈地方流行性。以豬為例，將感染豬引入易感群是本病發(fā)生的主要原因，不同日齡、品種的豬均可感染此病，仔豬、育肥豬和懷孕母豬最易感，哺乳仔豬的發(fā)病率和死亡率可達(dá)80%～90%，其他豬多為隱性感染。季節(jié)變化及長途運(yùn)輸?shù)葘?dǎo)致的應(yīng)激反應(yīng)、過度疲勞、缺乏營養(yǎng)、伴發(fā)或繼發(fā)其他疾病和寄生蟲病引起機(jī)體免疫力下降等都是引發(fā)本病的原因之一。在診斷時(shí)應(yīng)對相關(guān)流行病學(xué)資料、流行病學(xué)因子進(jìn)行充分了解。

2.2 臨床癥狀

2.2.1 豬附紅體病 又稱“紅皮病”。臨床上以仔豬多發(fā)，最早3日齡發(fā)病。常發(fā)生于斷奶后特別是閹割后幾周的仔豬。急性表現(xiàn)為41～42℃的高熱稽留，厭食或絕食，鼻鏡干燥無汗發(fā)熱甚至龜裂。病初眼結(jié)膜潮紅或蒼白，后期黃染，耳廓邊緣、尾部、四肢末斷、腹下、股內(nèi)側(cè)皮膚發(fā)暗紅色或青紫色，指壓不退色、肢斷溫度比身體中心的溫度低，尿黃，糞先稀后干，公豬尿鞘積尿，精神差。病程長的耳廓發(fā)生壞死變干或翻卷，個(gè)別豬只有咳嗽和氣喘現(xiàn)象。病豬最后臥地不起，衰竭死亡，一般病程1～14 d。急性不死一周后即轉(zhuǎn)為慢性，表現(xiàn)為消瘦，體重快速下降，但有飲欲，皮膚蒼白，有時(shí)有不規(guī)則淤斑，可視黏膜發(fā)黃、蒼白、生長發(fā)育不良料重比增加。育肥豬主要表現(xiàn)為高熱稽留42℃，頑固性厭食，皮膚發(fā)紅，后期發(fā)紫，1周左右很快消瘦，貧血，若無其它病原感染，死亡率不高。懷孕母豬整個(gè)懷孕期都有可能感染，急性感染后的母豬發(fā)燒至42℃，厭食、糞便干燥、乳房和陰戶水腫持續(xù)1～3 d，產(chǎn)后缺奶，母性較差，哺乳缺乏耐性。慢性表現(xiàn)為繁殖障礙，如不發(fā)情，屢配不孕，空懷，流產(chǎn)，產(chǎn)弱仔，有時(shí)可自愈，但生產(chǎn)能力下降。

2.2.2 羊附紅體病 綿羊和山羊都能感染發(fā)病，但以綿羊更易感。發(fā)病后，體溫升高達(dá)41℃以上，呼吸、心跳加快，反芻和噯氣停止，糞便干燥，有時(shí)帶有暗紅色血液，排尿次數(shù)增加，尿液透明，呈淡黃色；鼻孔周圍有粘液性黃色結(jié)痂；可視黏膜水腫，呈淡紅色，有像針尖或綠豆樣大的出血點(diǎn)或斑，口腔內(nèi)側(cè)、齒齦、舌背面及兩側(cè)有粟粒樣大的出血點(diǎn)，全身皮膚都有密集的像黃豆或蠶豆樣大小的出血斑點(diǎn)。

2.2.3 牛附紅體病 各品種、各年齡的牛都易感，其中以奶牛附紅細(xì)胞體病對畜牧業(yè)發(fā)展造成的危害最大。感染發(fā)病后，病牛體溫升高至40℃以上、流清鼻涕、精神差、食欲下降、呼吸急促、嚴(yán)重貧血、皮膚及可視黏膜蒼白，個(gè)別牛有血尿、四肢無力、步態(tài)不穩(wěn)、喜臥等。

2.2.4 家兔附紅體病 附紅細(xì)胞體是條件性致病菌，所以家兔感染后多呈隱性經(jīng)過。嚴(yán)重感染病例精神不佳，結(jié)膜黃染，食欲減退，糞便時(shí)稀時(shí)干，尿黃，呼吸加快心悸或衰弱，全身無力，消瘦，貧血，喜臥，體溫較高，有時(shí)會出現(xiàn)神經(jīng)癥狀。

2.2.5 人附紅體病 人感染附紅細(xì)胞體后多呈隱性感染。輕度感染者無明顯臨床癥狀，實(shí)驗(yàn)室檢驗(yàn)基本正常。重癥病人長期不規(guī)則發(fā)熱，乏力，關(guān)節(jié)酸痛，食欲不振，易出汗，嗜睡；隨病程的延長，出現(xiàn)貧血，黃疸。病人有疲勞綜合征樣表現(xiàn)。

2.3 病理變化

2.3.1 豬附紅體病 主要病理變化為貧血、黃疸。血液稀薄，不易凝固，全身肌肉顏色變淡，皮下脂肪黃染，體表、肝臟、腎臟、肺臟、脾臟腫大，且有大小不一的出血點(diǎn)或出血斑。肝臟可見條狀壞死。脾臟邊緣不整齊，有粟粒大的結(jié)節(jié)。膽囊膨脹，膽汁濃稠。心包積液，心肌蒼白柔軟，心外膜及心冠脂肪出血黃染，有少量針尖狀出血點(diǎn)。全身淋巴結(jié)腫大，切面外翻，漿液滲出，切面有灰白色壞死灶或出血點(diǎn)。胃底部出血壞死嚴(yán)重，十二指腸黏膜脫落，腸管充血。膀胱蒼白、黏膜有少量的出血點(diǎn)，內(nèi)有積尿，顏色深黃或如濃茶。胸腹腔大量積液，腦軟膜充血、水腫、腦室液增多。

2.3.2 羊附紅體病 黏膜黃染、貧血、消瘦、腰背及四肢等末梢處瘀血、血液稀薄、腹腔及胸腔積水，淋巴結(jié)腫大等。

2.3.3 牛附紅體病 病牛血液稀薄、腹腔及胸腔積水、淋巴結(jié)腫大、肝腫大1～2倍、脾出現(xiàn)壞死灶、心肌擴(kuò)張、心間質(zhì)水腫、心冠脂肪出血和黃染、肺出現(xiàn)代償性肺氣腫、腎臟腫大變性、胃腸黏膜局部水腫。

2.3.4 兔附紅體病 剖檢可見血液稀薄，黏膜蒼白，脾腫大，膽囊腫脹，腹水多，胸膜脂肪和肝臟黃染。

2.3.5 人附紅體病 人患附紅體病后，主要表現(xiàn)為血相發(fā)生變化，黃疸和肝、脾腫大、不同部位的淋巴結(jié)腫大等。臨床檢驗(yàn)可出現(xiàn)紅細(xì)胞、血紅蛋白、紅細(xì)胞比容、血小板計(jì)數(shù)等降低，膽紅素增高；心電圖有變化，腎功能不全，肌酐、尿氮、非蛋白氮升高。

2.4 實(shí)驗(yàn)室診斷

2.4.1 病原學(xué) 無菌采取瀕死或病死動物的血液、淋巴結(jié)、肝、脾、肺、腎以及膽汁等作如下檢測。

2.4.1.1 壓片法檢查從耳靜脈或人的耳垂、無名指采血（或用抗凝血）1滴于載玻片上，加等量的生理鹽水稀釋，混勻，加蓋玻片，置400～600倍顯微鏡下觀察。被感染的紅細(xì)胞多失去球形立體形態(tài)，其邊緣不整而呈齒輪狀、星芒狀、刺球狀、不規(guī)則多邊形。

2.4.1.2 直接涂片鏡檢 目前仍然是診斷人、畜附紅體病的主要手段。用末梢血涂片，瑞氏染色，油鏡（1000×）下計(jì)數(shù)100個(gè)紅細(xì)胞，凡染有附紅體的紅細(xì)胞少于30個(gè)為輕度感染；30～60個(gè)為中度感染；大于60個(gè)為重度感染。

2.4.1.3 電鏡檢查 主要用于研究附紅體的形態(tài)、結(jié)構(gòu)、繁殖與紅細(xì)胞的關(guān)系、對紅細(xì)胞造成的破壞、影響等，也可用掃描及透射電鏡進(jìn)行確診。

2.4.2 生物學(xué)診斷 也稱為動物試驗(yàn)。用疑患附紅體病的人、畜血接種于健康小動物（如小鼠、兔、雞等）或雞胚，接種后觀察其表現(xiàn)，并采血檢查附紅體。用此法診斷耗時(shí)較長，但有一定的輔助診斷意義。

2.4.3 血清學(xué)診斷方法 用血清學(xué)方法檢查，不僅可以診斷附紅體病，還可以做流行病學(xué)調(diào)查及監(jiān)測。但對附紅體的血清學(xué)診斷方法國內(nèi)研究甚少，而國外對動物附紅體的血清學(xué)研究較多，建立了將附紅體與紅細(xì)胞分開、制備抗原的方法，并用去掉紅細(xì)胞的E.ovis抗原對羊進(jìn)行ELISA與間接血凝試驗(yàn)（IHA）的對比，發(fā)現(xiàn)ELISA比IHA的敏感性高8倍。所以ELISA法是該病的一種敏感、快速、特異的診斷方法。但此法不適于小豬及公豬的診斷，也不適于急性期診斷。而IHA主要用于對患豬的診斷。有人用免疫熒光試驗(yàn)（IFA）檢查羊的E.ovis感染表明，該法敏感、特異，保持時(shí)間長，但其敏感性低于ELISA法。

2.4.4 分子生物學(xué)技術(shù) 用此法檢查診斷附紅體病是近十年來才發(fā)展起來的，已建立了DNA雜交和PCR技術(shù)。1990年，Oberst等[12]從被E.suis感染的高峰期的患豬放血，分離E.suis，并提取DNA，以32P標(biāo)記制成分子探針。用此探針檢查各種樣品，其結(jié)果證明這種探針能區(qū)別豬是否被E.suis感染。1993年，Gwaltney等[13]用λgtⅡ構(gòu)建E.suis DNA基因庫，從中選出ksu-2克隆子。之后又以ksu-2 DNA中一部分作為引物，經(jīng)試驗(yàn)證明PCR敏感性可查到≥1 pg的DNA，還證明E.suis感染豬后24 h就可出現(xiàn)PCR陽性，擴(kuò)增產(chǎn)物約500 bp。結(jié)果表明PCR法比其他生物學(xué)診斷方法敏感性高、且快速、特異性強(qiáng)，在豬附紅細(xì)胞體早期診斷中具有重要應(yīng)用價(jià)值。

細(xì)菌16 S rRNA基因是目前最常用的分類鑒定基因，對16 S rRNA基因的序列分析已成為細(xì)菌種屬鑒定和分類的標(biāo)準(zhǔn)方法。Messick等[14]依據(jù)已經(jīng)擴(kuò)增并克隆的豬附紅細(xì)胞體的16 S rRNA基因設(shè)計(jì)特異性引物，可用競爭性PCR進(jìn)行定量檢測，最低檢出量可達(dá)57～800個(gè)附紅細(xì)胞體 。這是首次依據(jù)16 S rRNA基因診斷并定量檢測豬附紅細(xì)胞體，該法對附紅細(xì)胞體 感染不同階段均可很好的進(jìn)行檢測。目前，國內(nèi)外已經(jīng)建立了牛、貓、鼠等多種動物附紅細(xì)胞體感染的PCR檢測方法。周榮瓊等[15]報(bào)道，基于豬附紅細(xì)胞體重慶株16 S rRNA基因的序列，設(shè)計(jì)合成種特異性引物，建立了豬附紅細(xì)胞體PCR診斷方法，可用于豬附紅細(xì)胞體的臨床診斷和流行病學(xué)調(diào)查。

2.5 預(yù)防

該病治療費(fèi)用昂貴，且療效不確切，至今仍沒有可有效控制該病的疫苗。附紅體發(fā)病多與其它疫病伴發(fā)或繼發(fā)，因此只能采用支持療法和綜合性預(yù)防性措施加以控制。加強(qiáng)動物飼養(yǎng)衛(wèi)生管理水平，提高營養(yǎng)水平以增強(qiáng)機(jī)體對病原的抵抗力，可起到預(yù)防本病的作用。

3 存在的問題

3.1 病原的分類學(xué)地位

目前很多資料認(rèn)為，附紅細(xì)胞體有宿主特異性，但有調(diào)查表明人群中與動物接觸密切的感染率高；也有人用病豬內(nèi)臟懸液接種小白鼠，再取小白鼠病料接種家兔獲得成功。王亞鳴[16]發(fā)現(xiàn)近交系BALB/c小鼠感染附紅細(xì)胞體是來自感染小牛血清。我國發(fā)現(xiàn)的附紅細(xì)胞體種除兔、山羊、雞的附紅細(xì)胞體已命名外，馬、騾、驢、駱駝等動物的附紅細(xì)胞體都沒有命名。Neimark[17]等對附紅體的16 S rRNA 基因，提出應(yīng)將其歸于Mycoplasmataceae科。

3.2 病原的生活史

附紅細(xì)胞體的生活史至今尚不十分清楚，國內(nèi)學(xué)者根據(jù)附紅細(xì)胞體病發(fā)生的季節(jié)性，認(rèn)為吸血節(jié)肢動物是該病的主要傳播媒介。許耀臣等[18]發(fā)現(xiàn)豬舍內(nèi)的蚊子體內(nèi)能查出典型的附紅細(xì)胞體。至于附紅體在人畜體內(nèi)及節(jié)肢動物體內(nèi)的生長仍不清楚。有的研究者從血液中找到裂殖體，也有實(shí)驗(yàn)表明附紅體在血液中主要利用葡萄糖。

3.3 致病機(jī)理

目前還不清楚，但多認(rèn)為寄生數(shù)量多時(shí)因破壞紅細(xì)胞而引起發(fā)病。

3.4 病原分離培養(yǎng)

多數(shù)學(xué)者認(rèn)為附紅細(xì)胞體在自然界不能獨(dú)立生存，因?yàn)椴≡嫠璧臓I養(yǎng)物質(zhì)如氨基酸、脂肪酸等自身不能合成，需由宿主細(xì)胞來提供，不能在體外直接分離和傳代。但近年來也有進(jìn)行體外培養(yǎng)取得成功的報(bào)道。Nonaka等[19]對豬附紅細(xì)胞體的體外培養(yǎng)特性進(jìn)行了系統(tǒng)的研究，認(rèn)為可以在含10%小牛血清的REM培養(yǎng)液中生長，厭氧或5%的CO2條件均可。張守發(fā)等[20]用RPMI 1640、M199和DMEM等3種培養(yǎng)液作為基礎(chǔ)培養(yǎng)基、加入40%的犢牛血清，進(jìn)行牛附紅細(xì)胞體的體外培養(yǎng)獲得成功。房春林等[21]用RPMI 1640和小牛血清按不同比例混合在體外培養(yǎng)豬和兔附紅細(xì)胞體也獲得成功。這些培養(yǎng)方法的建立和完善，對于未來附紅細(xì)胞體的生物學(xué)特性研究、治療藥物篩選、抗原制備及疫苗研制將提供有效的途徑。

4 小結(jié)

以前，由于附紅細(xì)胞體病沒有大范圍的流行，所以沒有引起重視。但近幾年來，在我國多數(shù)地區(qū)的人群、畜群中開始發(fā)生此病并且造成危害，引起了醫(yī)學(xué)界、獸醫(yī)界的重視并開始進(jìn)行研究。對于該病的診斷與治療，雖然已有報(bào)道，但對該病原體生活史、傳播途徑、發(fā)病機(jī)制等不十分清楚。而且該病隱性感染率高，潛在危險(xiǎn)性大，生產(chǎn)中還不能有效地預(yù)防和控制此病，亟待進(jìn)行深入流行病學(xué)調(diào)查及監(jiān)測研究。

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