黃 菊，王沂峰，蘇向輝，林瓊燕，陳高文，吳秋華

（廣州醫(yī)學(xué)院第三附屬醫(yī)院，廣州 510150）

非人靈長類動物在解剖結(jié)構(gòu)，生殖生理，代謝功能等方面與人類極其相似，是研究人類健康和疾病的理想動物模型，被廣泛的應(yīng)用于傳染病、遺傳性疾病、心血管疾病、內(nèi)分泌疾病、藥理學(xué)和毒理學(xué)等研究領(lǐng)域［1］，應(yīng)用此類實驗動物進(jìn)行實驗研究，容易掌握人類相似疾病的發(fā)病機(jī)制并找出治療疾病的方法。特別是在生殖生理方面，它們擁有與人類相似的單子宮，盤狀血絨毛型胎盤的動物［2］。在全世界范圍內(nèi)應(yīng)用較多的靈長類動物為獼猴，但獼猴繁殖的季節(jié)性以及馴養(yǎng)困難，應(yīng)用受到一定的限制，而食蟹猴在實驗動物學(xué)的應(yīng)用則逐漸增多，約占9％左右。食蟹猴為獼猴屬的一種，體型比獼猴稍小，性情溫順，月經(jīng)周期約為29d左右，其繁殖季節(jié)性不明顯，全年都可以交配繁殖，華南靈長類研究所的陳乾生早在80年代對其研究所內(nèi)1066頭繁殖母猴正常的分娩月份進(jìn)行了記錄，其分娩月份分布在全年各個月份，六七月和十，十一月份相對分娩率較高，因此認(rèn)為幾乎與人相似，每個月經(jīng)周期均會排卵［3］。故其在生殖生理方面跟人更為相似，在進(jìn)行此方面的研究時更能模擬人的相關(guān)疾病。本實驗對懷孕晚期食蟹猴的血液生理等指標(biāo)進(jìn)行了檢測，為今后實驗研究提供了理論依據(jù)。

1 材料和方法

1.1 實驗動物

食蟹猴由華南靈長類動物研究所提供［SCXK（粵）2009-0010］，3～7歲懷孕晚期食蟹猴15只，體重4.3～6.2kg，4～6歲非懷孕食蟹猴10只，體重2.5～4.6kg。

1.2 測定方法

1.2.1 血液生理學(xué)指標(biāo)的測定：上述動物，禁食12h后，于上午8：00～11：00點后肢股靜脈采血4mL分別置于EDTA抗凝管及檸檬酸鈉抗凝管中，用Sysmex XE-2100血液分析儀、Sysmex CA-7000凝血分析儀對以下指標(biāo)進(jìn)行測定：白細(xì)胞總數(shù)（WBC）、白細(xì)胞分類、紅細(xì)胞計數(shù)（RBC）、血紅蛋白（Hb）、紅細(xì)胞壓積（HCT）、紅細(xì)胞平均容積（MCV）、平均紅細(xì)胞血紅蛋白含量（MCH）、平均紅細(xì)胞血紅蛋白濃度（MCHC）、血小板總數(shù)（PLT）、凝血酶原時間（PT）、部分凝血酶時間（APTT），纖維蛋白原含量（Fbg）。

1.2.2 血生化測定：上述動物禁食12～14h后，上午8：00～11：00采靜脈血2mL于無抗凝管中，離心取血清，通過OL YMPUS AU600型全自動生化分析儀對血液進(jìn)行生化分析。具體指標(biāo)如下：丙氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶（ALT）、天門冬氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶（AST）、堿性磷酸酶（ALP）、總蛋白（TP）、白蛋白（Alb）、總膽紅素（T.Bili）、尿素氮（BUN）、肌酐（CreA）、血糖（Glu）、膽固醇（CHOL）、甘油三脂（TG）、鈣（Ca）、鐵（Fe）、磷（P）、肌酸激酶（CK）、乳酸脫氫酶（LDH）、羥丁酸脫氫酶（HBDH）。

1.3 統(tǒng)計學(xué)方法

2 結(jié)果

2.1 基本數(shù)據(jù)比較

15只孕晚期食蟹猴平均年齡為4.60±1.35年，而10只非孕同齡食蟹猴平均年齡為4.7±0.82年，兩組比較無顯著性差異（P＞0.05）；而孕晚期食蟹猴平均體重為5.03±0.55kg，非孕同齡食蟹猴平均體重為2.98±0.48kg，兩組比較差異顯著（P＜0.01）。

2.2 血液生理結(jié)果

懷孕晚期食蟹猴與同齡非懷孕食蟹猴WBC、NEU％、LYM％相比，有顯著性差異（P＜0.01），其他指標(biāo)差異不顯著（表1）。

表1 懷孕晚期食蟹猴與同齡非懷孕食蟹猴血液生理指標(biāo)測定結(jié)果Tab.1 The comparison of blood physiological index between two groups

2.3 凝血指標(biāo)測定結(jié)果

懷孕晚期食蟹猴與同齡非懷孕食蟹猴與同齡非孕食蟹猴凝血指標(biāo)相比，均顯著升高（P＜0.05）（表2）。

2.4 血液生化測定結(jié)果

懷孕晚期食蟹猴與同齡非懷孕食蟹猴與同齡非孕食蟹猴相比，TP，Alb，BUN，CreA，膽固醇，血糖，Ca、Fe等在食蟹猴孕晚期顯著降低（P＜0.05）。而LDH、HBDH等心肌酶在食蟹猴孕晚期則呈顯著性升高（P＜0.05）（表3）。

表2 懷孕晚期食蟹猴與同齡非懷孕食蟹猴血液凝血指標(biāo)測定結(jié)果Tab.2 The comparison of thromboxane index between two groups

表3 懷孕晚期食蟹猴與同齡非懷孕食蟹猴血液生化指標(biāo)測定結(jié)果Tab.3 The comparison of blood biochemical indicator between two groups

3 討論

3.1 血液常規(guī)

在人類，妊娠中晚期婦女，由于胎兒生長及孕婦各器官生理變化的需要，血容量及紅細(xì)胞會逐漸增加，但血漿增加大于紅細(xì)胞增加，出現(xiàn)血液稀釋現(xiàn)象［4］。本研究中，與同齡未孕食蟹猴相比，孕晚期食蟹猴的紅細(xì)胞、血紅蛋白、血小板雖有下降的趨勢，但無顯著性差異（P＞0.05），其他，如HCT、MCV、MCH、MCHC等指標(biāo)相比也無明顯差異。說明在食蟹猴孕期血液同樣有稀釋現(xiàn)象，但不明顯。孕晚期食蟹猴白細(xì)胞下降有顯著性差異（P＜0.05），而且中性粒細(xì)胞比例與淋巴細(xì)胞比例也發(fā)生變化，孕晚期中性粒細(xì)胞比例顯著增多（P＜0.05），而淋巴細(xì)胞比例顯著減少（P＜0.05）。在人類妊娠中晚期雖然中性粒細(xì)胞比例也會顯著增加，但是白細(xì)胞也會生理性的增加，而非下降，這有可能與孕猴血容量增加，導(dǎo)致血液稀釋有一定的關(guān)系。

3.2 凝血三項

在人類，妊娠期凝血因子會不同程度增高，纖維蛋白原增加（Fbg），凝血酶原時間（PT）、部分凝血酶原時間（APTT）顯著下降，血液處于高凝狀態(tài)，以利于預(yù)防分娩過程中的失血［5］。而本研究中，食蟹猴孕晚期PT、PTINR、APTT及Fbg均顯著升高（P＜0.05），這說明食蟹猴孕晚期處于相對易出血狀態(tài)或者機(jī)體凝血功能處于一種相對平衡狀態(tài)，但未見猴產(chǎn)后出血死亡的報道［6］。所以可能孕晚期食蟹猴的凝血功能處于相對平衡穩(wěn)定狀態(tài)。

3.3 肝功能

在妊娠期，體內(nèi)激素水平發(fā)生變化，血清中的雌激素、孕激素水平逐漸升高，并于妊娠晚期達(dá)到最高峰，這些類固醇激素影響肝臟的代謝、合成、分泌功能［7］。本結(jié)果顯示：孕晚期丙氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶（ALT）及天門冬氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶（AST）與同齡未孕食蟹猴數(shù)值相比有輕度下降的趨勢，但無顯著性差異（P＞0.05）。與人妊娠晚期變化報道相似。而堿性磷酸酶（ALP）相比則無顯著性差異（P＞0.05），此結(jié)果與人類由于胎盤ALP增加而致血清中ALP增加不同。另外，總蛋白（TP）、白蛋白（Alb）下降有顯著性差異（P＜0.05），與人類妊娠期間因血容量增加而導(dǎo)致血液稀釋，TP及Alb顯著下降一致。

3.4 腎功能

由于孕婦及胎兒代謝產(chǎn)物的增多，腎臟負(fù)擔(dān)增加，腎血漿流量及腎小球濾過率于孕早期增加，以后在整個孕期維持高水平，代謝產(chǎn)物BUN、CRE排泄增多，使血液BUN、CRE下降。本實驗結(jié)果顯示食蟹猴與人類相似，孕晚期BUN及CRE與同齡未孕組相比顯著下降（P＜0.05）。

3.5 妊娠期血脂

本結(jié)果顯示膽固醇（CHOL）、甘油三脂（TG）顯著性下降（P＜0.05），與人妊娠期雌激素升高，使脂肪沉積增多，加上腸道對脂肪吸收能力增強(qiáng)，血脂增加的結(jié)果相反。此結(jié)果的差異可能與猴的喂養(yǎng)有一定關(guān)系。在人類因孕期的營養(yǎng)需要，會增加營養(yǎng)物質(zhì)的攝入，而對猴這種等級制度森嚴(yán)的動物而言，營養(yǎng)的攝入不會得到較大改善，故血脂情況與人有一定的差異。

3.6 血糖

妊娠期孕猴能量消耗增加，而食物供給不一定增加，導(dǎo)致食蟹猴孕晚期血糖顯著下降。與人妊娠期血糖下降相符。

3.7 礦物質(zhì)

由于胎兒生長發(fā)育需要大量的Ca、P、Fe，會使孕婦血中Ca、Fe下降，而P因激素的作用會略有升高。本結(jié)果中孕晚期食蟹猴除Ca、Fe與同齡非孕食蟹猴相比下降顯著（P＜0.05），但P沒有因激素的作用升高（P＞0.05），可能與攝入不足有一定關(guān)系?？傮w上其礦物質(zhì)的情況與人類妊娠情況基本一致，與獼猴妊娠晚期情況相似［8］。

3.8 心肌酶

本結(jié)果顯示除肌酸激酶（CK）外，乳酸脫氫酶（LDH）、羥丁酸脫氫酶（HBDH）均呈上升趨勢（P＜0.05）?？赡芘c妊娠期膈肌升高，心博量增加，心臟負(fù)荷加大有關(guān)，與人類妊娠晚期情況相似。

由上可見，妊娠晚期食蟹猴在WBC、NEU％、LYM％、PT、APTT、Fgb、TP、Alb、BUN、CR、CHOL、Glu、Fe、LDK、HDBH上，與同齡未孕食蟹猴相比差異顯著，其它指標(biāo)雖在孕晚期有不同改變但無顯著性差異。食蟹猴孕晚期在血脂以及磷等指標(biāo)的變化上與人類妊娠晚期變化比較有差異，可能與妊娠期孕猴能量消耗增加，而食物供給不一定增加有一定關(guān)系?？傮w的血液學(xué)生理指標(biāo)變化與人類相比基本相似，為實驗用懷孕食蟹猴的應(yīng)用提供了一定的參考依據(jù)，特別為藥理學(xué)、藥物安全性評價等方面的實驗研究提供了參考指標(biāo)。

［1］王冬平，隋麗華，洪寶慶，等.食蟹猴與獼猴血液生理和生化指標(biāo)的比較［J］.中國比較醫(yī)學(xué)雜志，2007，17（7）：400-402，434.

［2］Davison BB，Cogswell FB，Baskin GB，et al.Plasmodium coatneyi in the rhesus monkey（Macaca mulatta）as a model of malaria in pregnancy［J］.Am J Trop Med Hyg，1998，59（2）：189-201.

［3］陳乾生，歐陽子焯.食蟹猴［J］.北京實驗動物科學(xué)與管理.1994，11（1）：63-68.

［4］樂杰，謝幸，豐有吉.婦產(chǎn)科學(xué)［M］.北京：人民衛(wèi)生出版社.2004：1：39.

［5］李艮亮，張霞，王馥美.妊娠晚期孕婦血凝四項指標(biāo)檢測及分析［J］.中國現(xiàn)代醫(yī)生，2007，45（11）：53.

［6］白壽昌，陳元霖，曾中興.獼猴［M］.北京：科學(xué)出版社，1985：11.

［7］曲榮美，董暉，胡亞莉，等.正常妊娠婦女不同孕期多項生化指標(biāo)分析［J］.中國實用婦科與產(chǎn)科雜志，2000，16（5）：297-298.

［8］Spicer EJ，Oxnard CE.Some haematological changes during pregnancy in the rhesus monkey（Macaca mulatta）［J］.Folia Primatol（Basel），1967，6（3）：236-242.