張 巍 甘宏發(fā) 馬若蘭 龔作炯

非酒精性脂肪性肝?。∟onalcoholic fatty liver disease，NAFLD）和非酒精性脂肪性肝炎（Nonalcoholic steatohepatitis，NASH） 的研究越來越受到重視[1～6]。荔枝核是無患子科植物荔枝的干燥成熟種子，其性味甘、微苦，溫，歸肝、腎經(jīng)，具行氣散結(jié)、祛寒止痛之功效[7]。有研究表明，荔枝核提取物主要成分荔枝核皂苷能改善高脂血癥-脂肪肝大鼠胰島素抵抗，降低糖尿病大鼠血糖和血脂水平[8，9]。我們通過構(gòu)建NASH大鼠模型，以荔枝核提取物溶液干預(yù)，觀察了其對(duì)動(dòng)物肝臟組織病理學(xué)和血生化指標(biāo)的影響。

材料與方法

一、實(shí)驗(yàn)材料 荔枝核提取物為南京澤郎醫(yī)藥科技有限公司產(chǎn)品；自制熟豬油，植物油、蔗糖、高脂奶粉購(gòu)于武漢市中百超市；丙基硫氧嘧啶、膽固醇、膽鹽、吐溫80、丙二醇為江蘇昆山恒益藥品公司產(chǎn)品；SPF級(jí)雌性Wistar大鼠，體重150±10g，購(gòu)于湖北省疾病控制中心實(shí)驗(yàn)動(dòng)物部。

二、T模型的制備 參考王建青[10]和倪鴻昌等[11]報(bào)道的方法，配制脂肪乳劑如下:豬油15g、植物油15g、膽固醇7.5g、蔗糖15g、膽鹽1g、丙基硫氧嘧啶1g、高脂奶粉8g、吐溫80mL、丙二醇10mL，加蒸餾水至100mL。采用隨機(jī)數(shù)字表法，將35只大鼠隨機(jī)分為對(duì)照組（5只）、模型組（10只）、小劑量干預(yù)組（10只）和大劑量干預(yù)組（10只）。模型大鼠以高脂乳劑10mL.kg-1灌胃，每日上午一次，持續(xù)6周，所有大鼠自由飲水。干預(yù)組大鼠分別以250mg.kg-1體重和500mg.kg-1[12]體重的荔枝核提取物溶液灌胃，1次/日。實(shí)驗(yàn)結(jié)束時(shí)，禁食一夜，給予10%水合氯醛（3ml.kg-1）麻醉動(dòng)物，處死，心臟取血，分離血清于-20℃保存。采血后立即剖腹取肝臟，置10%甲醛溶液固定，常規(guī)行病理學(xué)檢查。

三、血生化學(xué)檢查 常規(guī)進(jìn)行（上海申索佑福醫(yī)學(xué)診斷用品有限公司）。

四、統(tǒng)計(jì)學(xué)處理 應(yīng)用SPSS13.0統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件，采用單因素和Oneway ANOVA檢驗(yàn)，組間兩兩比較用LSD檢驗(yàn)，P<0.05被認(rèn)為有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

結(jié)果

一、肝臟病理學(xué)變化 見圖1。

圖1 肝組織病理學(xué)變化（HE，400×）

二、各組大鼠血生化指標(biāo)的變化 見表1。

表1 各組大鼠血生化指標(biāo)（）的比較

表1 各組大鼠血生化指標(biāo)（）的比較

與對(duì)照組比，①P＜0.05；與模型組比，②P＜0.05

LDL（mmol/L）對(duì)照組 5 4.5±0.8 32.2±6.1 160.0±32.1 0.5±0.1 1.4±0.2 0.8±0.1模型組 10 9.1±0.8① 51.0±9.0① 200.0±31.5① 1.0±0.2① 1.9±0.3① 0.8±0.2小劑量 9 6.6±1.5② 41.4±14.6② 182.1±33.4 0.6±0.2② 1.8±0.4 0.9±0.2大劑量 9 0.7±0.3② 5.5±1.5② 38.6±6.3② 167.4±32.5② 0.6±0.2② 1.5±0.3②只數(shù)GLU（mmol/L）ALT（U/L）AST（U/L）TG（mmol/L）TC（mmol/L）HDL（mmol/L）

討論

本實(shí)驗(yàn)采用高脂乳劑聯(lián)合藥物灌胃，建造大鼠NASH模型。組織病理學(xué)顯示，模型組存在顯著的肝細(xì)胞索排列紊亂、脂肪變性、小葉內(nèi)炎細(xì)胞浸潤(rùn)、匯管區(qū)炎癥及肝細(xì)胞點(diǎn)、片狀壞死；小劑量干預(yù)組即有明顯的減輕炎性反應(yīng)的作用，大劑量干預(yù)組表現(xiàn)更為明顯，表明荔枝核提取物能減輕NASH大鼠肝組織脂肪變性。血生化檢測(cè)表明，荔枝核提取物能顯著減輕NASH大鼠糖、脂代謝紊亂和肝功能損害。

荔枝核提取物主要化學(xué)成分為α-亞甲環(huán)丙基甘氨酸、皂甙、鞣質(zhì)和纖維素等。關(guān)于α-亞甲環(huán)丙基甘氨酸對(duì)脂肪性肝病的作用尚未見文獻(xiàn)報(bào)道。

PurmováJ等[13]研究表明，皂甙類能抑制肝臟脂質(zhì)超氧化物的生成，降低血清膽固醇和血糖水平，活化免疫系統(tǒng)。Bhavsar SK等[14]用皂苷類治療C57BL/KsJ-db/db糖尿病小鼠，認(rèn)為皂苷通過增高adipsin、Glut4葡萄糖載體和過氧化物酶體增生物激活受體α基因表達(dá)，降低葡萄糖-6-磷酸酶和脂肪酸結(jié)合蛋白4酶基因表達(dá)，從而改善高脂血癥和高血糖癥。

MatsumotoK等給小鼠喂食添加了柿子的飼料，發(fā)現(xiàn)鞣酸和纖維素通過結(jié)合膽汁酸，從而增高糞便膽汁酸的排泄，上調(diào)固醇調(diào)節(jié)因子結(jié)合蛋白-2基因、膽固醇7-α羥化酶和低密度脂蛋白受體基因的表達(dá)，從而降低肝和血漿脂質(zhì)濃度，在小鼠發(fā)揮降血脂的作用。

荔枝核提取物是一種具有降血脂功能的理想藥物，安全無害，來源方便，具有天然降脂和護(hù)肝的作用。

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