林向前

(福建省漳州市中醫(yī)院，福建 漳州 363000)

表1 提取工藝因素水平表

頸康片由桑枝、馬錢子、白芍、葛根、天麻、羌活、川芎等藥材組方，具有解肌鎮(zhèn)痛、舒筋通絡(luò)、祛風(fēng)除濕的功效，用于治療頸椎病、頸背肌筋膜炎、肩周炎等。羌活、川芎為方中主要成分，其揮發(fā)油含量很高，是重要的藥理活性成分。為了充分發(fā)揮揮發(fā)油的效用，增加其在制劑中的穩(wěn)定性，減少不良氣味，筆者將其揮發(fā)油提取后用β－環(huán)糊精包合，并對提取及包合的工藝條件進行研究，以得出最佳制備工藝。

1 儀器與試藥

TG328B型電光分析天平(上海天平儀器廠)；SH21－1型磁力恒溫攪拌器(上海梅穎浦儀器儀表制造有限公司)；FM101－2型鼓風(fēng)干燥箱(長沙儀器廠)；揮發(fā)油測定器(上海玻璃儀器廠)。β－環(huán)糊精(陜西省佳縣生物化學(xué)工業(yè)公司)；羌活、川芎(廣州片仔癀醫(yī)藥有限公司，批號分別為091008，1006031)；無水乙醇、乙醚、無水硫酸鈉均為分析純。

2 方法與結(jié)果

2.1 揮發(fā)油提取工藝研究

2.1.1 揮發(fā)油提取與分離

按處方比例稱取羌活、川芎藥材粉碎，過2號篩，置揮發(fā)油提取器中，加水浸泡后連續(xù)提取數(shù)小時，提取液冷卻后，用乙醚萃取3次，合并乙醚液，40℃以下回收乙醚，加無水硫酸鈉脫水，過濾，轉(zhuǎn)移至稱量瓶中，水浴加熱揮干殘存乙醚，得純揮發(fā)油，密閉保存。

2.1.2 提取工藝優(yōu)選[1－2]

因素水平設(shè)計：根據(jù)初步試驗結(jié)果，考察混合揮發(fā)油提取工藝中影響較大的3種因素，即浸泡時間(因素A)、加水量(因素B)、回流時間(因素C)，每個因素取3個水平，詳見表1。

正交試驗設(shè)計與結(jié)果：本試驗采用 L9(34)設(shè)計試驗表安排試驗，以揮發(fā)油總質(zhì)量為考察指標(biāo)，結(jié)果見表2，方差分析結(jié)果見表3。方差分析結(jié)果表明，影響因素排序為C＞B＞A。結(jié)合直觀分析與生產(chǎn)實際，確定最優(yōu)提取工藝條件為A1B1C3，即藥材浸泡1 h、加6倍量水、加熱回流提取7 h。

2.2 β－環(huán)糊精包合工藝研究

2.2.1 混合揮發(fā)油回收率測定[3]

精密量取混合揮發(fā)油1 mL，置500 mL燒杯中，加入蒸餾水200mL，按照2010年版《中國藥典(一部)》附錄揮發(fā)油測定項下甲法測定揮發(fā)油，用10mL乙醚洗滌揮發(fā)油測定器中殘留揮發(fā)油，分取乙醚，并入揮發(fā)油中，室溫放置4 h，使乙醚自然揮發(fā)，量取揮發(fā)油，計算回收率，重復(fù)操作3次。結(jié)果平均回收率為85.55%。

表2 提取工藝正交試驗設(shè)計與結(jié)果

表3 提取工藝方差分析結(jié)果

2.2.2 包合物制備

采用飽和水溶液法，精密稱取β－環(huán)糊精，置100mL具塞三角錐形瓶中，按1∶10的比例加入蒸餾水，加熱使之完全溶解，制成飽和水溶液，冷卻至所需溫度，用恒溫磁力攪拌器攪拌。精密移取混合揮發(fā)油1 mL置試管中，用無水乙醇稀釋，使揮發(fā)油與無水乙醇之比為1∶1。將揮發(fā)油的醇溶液用注射器緩緩注入錐形瓶中，邊加邊攪拌至規(guī)定時間，混合液靜置并冷藏24 h，抽濾并用乙醚洗滌3次，于40℃干燥至恒重，即得包合物。

2.2.3 包合率測定

取干燥至恒重的包合物精密稱重，測定其揮發(fā)油含量。按下列公式計算包合物收率、揮發(fā)油包合率。包合物收得率=包合物質(zhì)量/(β－環(huán)糊精加入量+揮發(fā)油加入量)×100%，揮發(fā)油包合率=包合物揮發(fā)油測得量/(揮發(fā)油加入量×空白回收率)×100%，包合物收得率評分=包合物收得率×30，揮發(fā)油包合率評分=揮發(fā)油包合率×70，綜合評分=包合物收率評分+揮發(fā)油包合率評分。揮發(fā)油包合率權(quán)重系數(shù)定為0.7，包合物收得率作為次要篩選指標(biāo)，權(quán)重系數(shù)定為0.3，用綜合評分方法來確定最佳包合工藝。

2.2.4 包合工藝優(yōu)選[2－3]

因素水平設(shè)計：根據(jù)預(yù)試驗，對混合揮發(fā)油包合工藝影響較大的因素有3個，即揮發(fā)油與β－環(huán)糊精的比例(因素A)、包合溫度(因素B)、攪拌時間(因素C)，每個因素取3個水平，詳見表4。

表4 包合工藝因素水平表

正交試驗設(shè)計與結(jié)果：采用 L9(34)設(shè)計試驗表安排試驗，以包合物收率、揮發(fā)油包合率為評價指標(biāo)，結(jié)果見表5，方差分析結(jié)果見表6。方差分析結(jié)果表明，影響因素排序為A＞C＞B。結(jié)合直觀分析與生產(chǎn)實際，確定最佳包合工藝條件是A3B1C2，即揮發(fā)油與β－環(huán)糊精比例為1∶10，包合溫度為30℃，磁力攪拌時間為2 h。

表5 包合工藝正交試驗設(shè)計與結(jié)果

表6 包合工藝方差分析結(jié)果

2.3 驗證試驗

按處方比例稱取羌活、川芎，按最佳工藝條件進行3批驗證試驗。結(jié)果揮發(fā)油總質(zhì)量分別為0.98g，1.13g，0.96g，β－環(huán)糊精包合物的綜合評分分別為91.17，90.72，92.33分。結(jié)果表明，正交試驗優(yōu)選的最佳提取工藝及包合工藝在揮發(fā)油提取總質(zhì)量和包合物的綜合評分方面均優(yōu)于試驗中其他工藝。

3 討論

中藥制劑中多含揮發(fā)油與揮發(fā)性成分，由于揮發(fā)油對空氣、日光及溫度比較敏感，所以使用一般制劑方法難以對其進行有效的質(zhì)量控制。β－環(huán)糊精是一種較新的藥物包合材料，具有環(huán)狀中空筒形和環(huán)外親水、環(huán)內(nèi)疏水的特殊結(jié)構(gòu)，使其能與許多化學(xué)物質(zhì)，特別是使揮發(fā)性成分形成較穩(wěn)定的包合物，并在增加藥物的溶解度和穩(wěn)定性、防止揮發(fā)性成分揮散、減少刺激、降低毒副作用、掩蓋藥物臭味等方面有良好效果。本試驗采用正交試驗法對頸康片揮發(fā)油的提取及其包合物的制備工藝進行了研究，驗證試驗說明所選用的最佳工藝穩(wěn)定、可行。

[1]劉 梅，王擁軍，施 杞，等.復(fù)方芪麝片中川芎揮發(fā)油提取及包合工藝研究[J].上海中醫(yī)藥大學(xué)學(xué)報，2006(1)：66－68.

[2]郭愛國，李 偉，陳 興.羌活、蒼術(shù)混合提取揮發(fā)油的包合工藝研究[J].中國現(xiàn)代藥物應(yīng)用，2008，2(17)：9－10.

[3]國家藥典委員會.中華人民共和國藥典(一部)[M].北京：中國醫(yī)藥科技出版社，2010：附錄63.