王丹丹 綜述 李燕華 審校

卵巢癌(ovarian carcinoma)是女性生殖道常見(jiàn)的惡性腫瘤之一，盡管其發(fā)病率在女性生殖系統(tǒng)腫瘤中居第3位，死亡率卻居第1位［1］。不同期別卵巢癌預(yù)后差異很大，早期卵巢癌患者通過(guò)手術(shù)和化療其5年生存率可在90%以上，但目前能在早期獲得診斷的患者不足25%。因此，早期診斷對(duì)提高卵巢癌患者生存率尤為重要。CA125是目前公認(rèn)的卵巢癌術(shù)前診斷、療效觀察、術(shù)后復(fù)發(fā)和預(yù)后評(píng)估最具價(jià)值的觀測(cè)指標(biāo)，但CA125的合成受許多因素影響，如子宮內(nèi)膜異位癥，盆腔炎癥等均可見(jiàn)CA125不同程度地升高，有研究發(fā)現(xiàn)40% ～50%的Ⅰ～Ⅱ期卵巢癌患者的血清CA125檢測(cè)值并不升高［2］，所以將CA125作為卵巢癌早期診斷唯一的指標(biāo)仍有一定的局限性。近年來(lái)隨著對(duì)卵巢癌發(fā)病機(jī)制的深入研究，多種過(guò)度表達(dá)的蛋白及其受體在卵巢癌發(fā)生發(fā)展中的作用受到重視，并作為用于卵巢癌診斷的腫瘤標(biāo)志物。本文就目前最新的如人附睪蛋白-4(HE4)等標(biāo)志物在卵巢癌中的診斷應(yīng)用進(jìn)展作一綜述。

1 HE4與卵巢癌

人附睪蛋白4(HE4，又名WFDC2)基因的cDNA最早由Kirchhoff等［3］首先從附睪的上皮遠(yuǎn)端分離出來(lái)，是1種可能與精子成熟度有關(guān)的蛋白酶抑制劑，但至今未能證實(shí)它具有蛋白抑制功能。目前已有大量實(shí)驗(yàn)表明HE4在卵巢癌早期診斷中的價(jià)值明顯優(yōu)于CA125。Drapkin等［4］用免疫組織化學(xué)方法描述了HE4在不同組織類型卵巢癌中的表達(dá)，發(fā)現(xiàn)HE4在93%的卵巢漿液性癌、50%的卵巢透明細(xì)胞癌及100%卵巢子宮內(nèi)膜樣癌中高表達(dá)，而在卵巢黏液性癌及正常卵巢組織中不表達(dá)。Moore等［5］研究表明，就單一標(biāo)志物而言，HE4用于診斷卵巢癌的敏感性高達(dá)72.9%、特異性達(dá)95%，而CA125的敏感性為27% ～66%，特異性為75.2%。就聯(lián)合檢測(cè)物而言，CA125聯(lián)合HE4的檢測(cè)敏感性達(dá)76.4%、特異性95%，明顯高于單項(xiàng)檢測(cè)HE4或CA125的敏感度。在此基礎(chǔ)上進(jìn)一步研究了CA125再聯(lián)合其他標(biāo)志物檢測(cè)，其敏感性并無(wú)明顯變化。對(duì)于Ⅰ期病變，HE4為最佳的單一標(biāo)志物，聯(lián)合檢測(cè)CA125或其他標(biāo)志物不能增加其敏感性。Montaqnana等［6］研究顯示卵巢癌患者血清CA125和HE4水平明顯高于正常人、卵巢良性腫塊、宮頸癌及子宮內(nèi)膜腫瘤患者，且血清HE4的敏感性和特異性高于CA125。Huhtinen等［7］研究顯示聯(lián)合檢測(cè) HE4和 CA125血清濃度可增加卵巢癌的診斷準(zhǔn)確率，并可從卵巢子宮內(nèi)膜異位囊腫中鑒別卵巢癌。Abdel-Azeez等［8］研究顯示血清HE4為單獨(dú)檢測(cè)早期卵巢癌最敏感的腫瘤標(biāo)記物(早期檢出率為76.9%)。Kim等研究顯示［9］聯(lián)合檢測(cè)附件腫塊患者血清HE4和CA125水平可成功地將可能發(fā)展為卵巢癌的高風(fēng)險(xiǎn)組和低風(fēng)險(xiǎn)組患者區(qū)分開(kāi)(敏感性 87.5%，特異性 93.8%)。然而 Montagnana等［10］研究顯示HE4聯(lián)合CA125對(duì)于評(píng)估盆腔腫塊發(fā)展為卵巢癌的風(fēng)險(xiǎn)并不優(yōu)于單獨(dú)檢測(cè)血清HE4。還有研究顯示［11］，在復(fù)發(fā)的卵巢癌患者中，CA125檢測(cè)的敏感度為96%，HE4的敏感度為100%，其中52%(14/27)的患者血清HE4水平上升比血清CA125的上升提前6～69周出現(xiàn)。Lamy等［12］研究也表明，在復(fù)發(fā)的卵巢癌患者中血清HE4比血清CA125提前5～8個(gè)月出現(xiàn)異常表達(dá)，HE4可作為很好的預(yù)測(cè)卵巢癌復(fù)發(fā)的指標(biāo)。綜上所述，HE4作為新的卵巢癌早期診斷標(biāo)志物具有較高的敏感性和特異性。

2 OPN與卵巢癌

骨橋蛋白(Osteopontin，OPN)是1種磷酸化糖蛋白，基因定位于人染色體4q21-25，由7個(gè)外顯子和6個(gè)內(nèi)含子構(gòu)成，分子量為41～75 KD，OPN參與細(xì)胞外基質(zhì)的形成，是1種可分泌細(xì)胞因子［13，14］。OPN蛋白有8個(gè)α螺旋和6個(gè)β折疊的二級(jí)結(jié)構(gòu)，其中含有特異性的精氨酸-甘氨酸-天冬氨酸序列(簡(jiǎn)稱RGD序列)。近年來(lái)，較多的研究發(fā)現(xiàn)OPN與卵巢癌侵襲、轉(zhuǎn)移密切相關(guān)。Kim等［15］利用ELISA法對(duì)107例健康婦女、46例良性卵巢疾病、47例其他婦科癌癥患者以及51例上皮性卵巢癌患者進(jìn)行血清OPN檢測(cè)，發(fā)現(xiàn)51例卵巢癌患者術(shù)前血清OPN水平顯著高于其他3組患者。同時(shí)還發(fā)現(xiàn)，在漿液性、黏液性、透明細(xì)胞性和內(nèi)膜樣卵巢癌患者血清中OPN的表達(dá)無(wú)顯著性差異。Meinhold Heerlein等［16］用酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)(ELISA)發(fā)現(xiàn)卵巢癌患者血清中OPN的表達(dá)明顯增強(qiáng)，并可作為卵巢癌早期診斷及病情監(jiān)測(cè)及評(píng)價(jià)預(yù)后的生物標(biāo)志物之一。尚有研究指出，血漿OPN升高可提示卵巢癌復(fù)發(fā)［17］。Ye等［18］發(fā)現(xiàn)早期卵巢癌患者尿液中OPN片段增加，與修飾型嗜酸細(xì)胞源性神經(jīng)毒素結(jié)合后具有93%的檢出率和72%的敏感性，可用于早期卵巢癌的非侵襲性篩查。Visintin等［19］通過(guò)ELISA分析評(píng)估362例健康婦女、156例新診斷的卵巢癌患者血清中蛋白表達(dá)水平，結(jié)果發(fā)現(xiàn)OPN與CA125聯(lián)合應(yīng)用對(duì)卵巢癌的檢測(cè)敏感性達(dá)95.3%，特異性達(dá)99.4%，而單獨(dú)應(yīng)用 CA125時(shí)敏感性僅為84.4%。Bao等［20］應(yīng)用免疫組化法檢測(cè)了40例三期卵巢癌患者腫瘤原發(fā)灶和轉(zhuǎn)移灶的OPN水平，結(jié)果顯示其中32例患者卵巢癌轉(zhuǎn)移灶中OPN顯著增加，且這些患者預(yù)后極差。Matsuura等［21］研究顯示卵巢透明細(xì)胞癌的癌細(xì)胞侵襲能力與OPN的上升或下降有關(guān)，因此OPN處于正常水平對(duì)卵巢透明細(xì)胞癌的治療至關(guān)重要。Zhang等［22］研究顯示OPN在卵巢癌中的表達(dá)顯著高于卵巢交界性腫瘤和良性腫瘤(P＜0.05)，OPN在低分化卵巢癌中的陽(yáng)性率明顯高于中、高度分化的卵巢癌(P＜0.05)，OPN的陽(yáng)性率與淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移率高(P＜0.05)有關(guān)，但與年齡和病理類型無(wú)關(guān)。Tilli等［23］研究表明，骨橋蛋白-C的剪接異構(gòu)體有助于卵巢癌惡化，因此選擇性地下調(diào)OPN-C可能有助于改變卵巢腫瘤的進(jìn)展，成為新的治療卵巢癌的方法。OPN作為卵巢癌轉(zhuǎn)移機(jī)制的重要參與者，可能成為與CA125互補(bǔ)的、有前景的、新的卵巢癌生物學(xué)標(biāo)志物。

3 YKL-40與卵巢癌

甲殼質(zhì)酶蛋白40(YKL-40)是哺乳類動(dòng)物甲殼酶蛋白家族的一員，最早在非泌乳期牛的乳汁分泌物中發(fā)現(xiàn)，YKL-40含383個(gè)氨基酸，編碼的蛋白序列與糖基水解酶相似［24］，位于染色體1q32，它的結(jié)構(gòu)類似甲殼質(zhì)酶蛋白，被稱為甲殼質(zhì)酶蛋白40，亦稱人軟骨糖蛋白-39(HCgp-39)，其生物功能目前還不十分清楚。Johansen等［25］研究證實(shí)，YKL-40在腫瘤細(xì)胞的增生、分化、生長(zhǎng)、侵襲和轉(zhuǎn)移、血管發(fā)生、炎癥反應(yīng)以及腫瘤周圍細(xì)胞外基質(zhì)的重塑中起重要作用。Dupont等［26］對(duì)卵巢癌中YKL-40的研究發(fā)現(xiàn)卵巢癌Ⅰ期和Ⅱ期患者中65%血清YKL-40升高，Ⅲ和Ⅳ期患者中74% ～91%血清YKL-40升高，首次復(fù)發(fā)卵巢癌患者中55%血清YKL-40升高。血清YKL-40水平與腫瘤分期和腫瘤負(fù)荷有關(guān)，且血清YKL-40≥80 U者預(yù)后差，腫瘤復(fù)發(fā)率為71%，血清YKL-40對(duì)于早期卵巢癌診斷的敏感性高于CA125和CA15-3，因此認(rèn)為血清YKL-40水平可作為檢測(cè)早期卵巢癌的標(biāo)志物，并且血清中YKL-40水平升高與早期卵巢癌患者的復(fù)發(fā)和生存期短相關(guān)。Gronlund等［27］研究發(fā)現(xiàn)血清YKL-40水平升高增加了卵巢癌二線化療藥物耐藥性的風(fēng)險(xiǎn)，從生物學(xué)角度說(shuō)明YKL-40表達(dá)增高可能與卵巢癌細(xì)胞的增殖和抗凋亡有關(guān)。有研究發(fā)現(xiàn)，65%的Ⅰ、Ⅱ期卵巢癌患者，74% ～91%的Ⅲ、Ⅳ期卵巢癌患者及55%的首次復(fù)發(fā)的卵巢癌患者術(shù)前血清 YKL-40 水平明顯升高［28，29］。彭春杰等［30］研究卵巢上皮性腫瘤組織中YKL-40和CA125的表達(dá)時(shí)發(fā)現(xiàn)YKL-40和CA125表達(dá)水平隨卵巢漿液性腫瘤惡性程度的增加而表達(dá)增高。Yang等［31］應(yīng)用免疫組化法檢測(cè)86例卵巢上皮性癌和20例正常卵巢組織標(biāo)本的YKL-40表達(dá)，結(jié)果顯示YKL-40在正常卵巢組織中呈陰性或低水平表達(dá)，在卵巢癌組織中高表達(dá)，并且YKL-40的過(guò)度表達(dá)與卵巢上皮性癌的臨床階段有關(guān)，且YKL-40過(guò)度表達(dá)患者的總生存時(shí)間明顯低于YKL-40正常表達(dá)者。Hogdall等［32］應(yīng)用免疫組化法檢測(cè)了181例卵巢交界性腫瘤和473例卵巢上皮性癌患者組織中的YKL-40水平，并用ELISA法檢測(cè)了19例卵巢交界性腫瘤和76例卵巢上皮性癌患者血清中的YKL-40水平，結(jié)果顯示卵巢上皮性癌患者組織和血清中YKL-40均高表達(dá)，但只有血清中YKL-40可作為卵巢上皮性癌患者的預(yù)后指標(biāo)。Zou等［33］用ELISA法檢測(cè)了49例卵巢癌患者的YKL-40及CA125水平，結(jié)果顯示對(duì)于卵巢癌的診斷YKL-40的敏感性為92.9%，特異性為94.4%，YKL-40聯(lián)合 CA125檢測(cè)時(shí)其敏感性提高至98.2%，但特異性下降至81.3%。YKL-40可能不是個(gè)獨(dú)立的卵巢癌預(yù)后因素。鑒于血清YKL-40在檢測(cè)卵巢癌、監(jiān)測(cè)病情、評(píng)價(jià)手術(shù)療效及評(píng)估預(yù)后方面的作用，血清YKL-40水平有可能成為早期診斷卵巢癌的1個(gè)很好的標(biāo)志物。

綜上所述，腫瘤標(biāo)志物存在于血液、細(xì)胞、組織或體液中，在腫瘤細(xì)胞異常表達(dá)，是反映腫瘤存在和生長(zhǎng)的一類物質(zhì)(包括蛋白質(zhì)、激素、酶和多胺等)。在正常組織或良性疾病中不表達(dá)或者僅輕微表達(dá)，但可在腫瘤患者的血清、組織或體液及排泄物中檢測(cè)到。腫瘤標(biāo)志物在腫瘤診斷方面的作用有:①早期檢測(cè)惡性腫瘤;②用于良、惡性腫瘤的鑒別診斷;③對(duì)于治療后隨診的惡性腫瘤患者，可作為判斷腫瘤預(yù)后和隨診的指標(biāo);④可用于化療患者的療效觀察。檢測(cè)HE4，OPN，YKL-40可能是鑒別卵巢良、惡性腫瘤的1種更有效的指標(biāo)，并且其在早期卵巢癌的診斷中敏感度明顯高于CA125，雖然其在晚期卵巢癌診斷中的敏感度與CA125相當(dāng)，但特異度明顯高于后者，彌補(bǔ)了CA125的不足。盡管目前HE4，OPN，YKL-40在卵巢癌中發(fā)病機(jī)制的研究尚處于早期階段，但隨著更多的研究及臨床診療的實(shí)踐，必將進(jìn)一步證實(shí)和拓寬其應(yīng)用。HE4，OPN，YKL-40都可能成為卵巢癌腫瘤標(biāo)志物新的方向，在卵巢癌的鑒別、早期診斷、治療、預(yù)后及監(jiān)測(cè)等方面發(fā)揮較好的作用。

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