HBsAg及AFP在肝細(xì)胞癌組織中的表達(dá)及其相關(guān)性

蘇士珂，潘 雷，孟凡迎，代學(xué)強(qiáng)，周 旭*

(1山東大學(xué)附屬省立醫(yī)院，濟(jì)南250021;2齊河縣人民醫(yī)院)

肝細(xì)胞癌(HCC)是世界上最常見(jiàn)的惡性腫瘤之一，且其發(fā)病率在許多國(guó)家呈上升趨勢(shì)。病因?qū)W研究顯示，約53%的HCC與HBV感染有關(guān)，HBV感染是原發(fā)性HCC的重要誘因，但具體致癌機(jī)制仍不清楚［1］。甲胎蛋白(AFP)是HCC的重要標(biāo)志物，在其早期診斷及術(shù)后復(fù)發(fā)診斷方面起重要作用。但血清HBsAg和AFP水平難以準(zhǔn)確反映HCC組織狀態(tài)，易受多種因素的影響。2006年6月～2009年6月，我們測(cè)定了40例HCC患者癌組織中HBsAg及AFP的表達(dá)情況，并對(duì)兩者相關(guān)性進(jìn)行了分析。現(xiàn)報(bào)告如下。

1 資料與方法

1.1 臨床資料 同期外科手術(shù)切除的HCC癌組織標(biāo)本40份(均附癌旁肝組織)，患者中男28例，女12例;年齡17～69歲，平均41.5歲。根據(jù)Edmonton［2］分級(jí)標(biāo)準(zhǔn)Ⅰ級(jí)3例，Ⅱ級(jí)13例，Ⅲ級(jí)19例，Ⅳ級(jí)5例;癌旁肝組織均有肝硬化或不同程度纖維化。設(shè)正常肝組織6份為對(duì)照。

1.2 癌組織中HBsAg及AFP表達(dá)檢測(cè) 標(biāo)本均經(jīng)10%中性甲醛固定，常規(guī)石蠟包埋，連續(xù)切片(厚4 μm)，分別行HE和免疫組織化學(xué)染色(SP法)，染色前采用高壓法進(jìn)行抗原修復(fù)。結(jié)果判定標(biāo)準(zhǔn):HBsAg及AFP免疫組化染色以細(xì)胞質(zhì)或細(xì)胞膜出現(xiàn)棕黃色顆粒為陽(yáng)性，其中陽(yáng)性細(xì)胞數(shù)＜5%為陰性、6%～25%為+、26%～75%為++、＞76%為+++［3］。

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 采用SPSS13.0軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)處理。計(jì)數(shù)資料比較采用χ2檢驗(yàn)，檢驗(yàn)水準(zhǔn)α=0.05。

2 結(jié)果

2.1 HBsAg及AFP表達(dá) 正常肝組織中HBsAg及AFP表達(dá)均為陰性。HCC和癌旁肝組織中HBsAg及AFP表達(dá)陽(yáng)性細(xì)胞形態(tài)有全漿型、大包涵體型、小包涵體型、碎點(diǎn)狀及膜型，其中癌旁肝組織陽(yáng)性細(xì)胞形態(tài)以大包涵體和全漿型多見(jiàn)，表達(dá)強(qiáng);HCC細(xì)胞內(nèi)以小包涵體型、碎點(diǎn)狀及膜型為主，且表達(dá)弱［4］。HCC和癌旁肝組織HBsAg表達(dá)陽(yáng)性率分別為70%(28/40)、90%(36/40)，兩者比較P＜0.05;其中表達(dá)陰性者分別為12、4例，表達(dá)為+者分別為7、9例，表達(dá)為++者分別為11、15例，表達(dá)為+++者分別為10、12例。HCC和癌旁肝組織AFP表達(dá)陽(yáng)性率分別為87.5%(28/40)、82.5%(29/40)，兩者比較P＞0.05;其中表達(dá)陰性者分別為12、11例，表達(dá)為+者分別為8、6例，表達(dá)為++者分別為12、13例，表達(dá)為+++者分別為8、10例。

2.2 HBsAg、AFP表達(dá)的關(guān)系 HCC中HBsAg陽(yáng)性者和陰性者AFP表達(dá)陽(yáng)性率分別為85.73%(24/28)、66.7%(8/12)，兩者比較P＜0.05;癌旁肝組織中HBsAg陽(yáng)性和陰性者AFP表達(dá)陽(yáng)性率分別為68.9%(20/29)、54.5%(6/11)，兩者比較P＜0.05。

3 討論

流行病學(xué)資料顯示，中國(guó)HBV慢性感染男性人群中，至少40%死于HCC，HBV感染與HCC的發(fā)生密切相關(guān)。廖嫦英、黃水仙等報(bào)道原發(fā)性肝癌患者HBsAg陽(yáng)性率為90.2%，比江蘇啟東縣調(diào)查結(jié)果(94%)略低，比上海調(diào)查結(jié)果(88.9%)稍高，但三者基本接近，進(jìn)一步支持HBV與HCC之間存在密切關(guān)系。據(jù)報(bào)道HCC發(fā)病率以沿海地區(qū)及東南一帶較高，可能與上述地區(qū)高HBV感染率有關(guān)。據(jù)統(tǒng)計(jì)，全球約半數(shù)以上HCC患者發(fā)病與HBV感染有關(guān)，而國(guó)內(nèi)報(bào)道肝癌周圍肝組織HBsAg陽(yáng)性率總體水平為80.2%［5］，提示 HBV感染可能參與了HCC的發(fā)生、發(fā)展。

本研究顯示，正常肝組織中HBsAg及AFP表達(dá)均為陰性;HCC和癌旁肝組織HBsAg表達(dá)陽(yáng)性率均較高，其中后者顯著高于前者?？赡軝C(jī)制:HBV可將其自身DNA整合至宿主肝細(xì)胞基因組中，從而在肝細(xì)胞癌變中起關(guān)鍵作用［6］;HBV感染者肝細(xì)胞中HBV-DNA可產(chǎn)生HBsAg，其中部分HBV-DNA被整合至宿主肝細(xì)胞基因組中，致使肝癌組織中亦能檢出HBsAg，但整合的后復(fù)制效率可能受抑，致使其檢出率降低。近年來(lái)研究表明，血清HBeAb陽(yáng)性并非意味組織學(xué)轉(zhuǎn)向良好，部分患者體內(nèi)HBV仍在復(fù)制，而且HBeAb陽(yáng)性者HBV整合機(jī)會(huì)較HBeAb陰性者大;HBcAb陽(yáng)性提示HBV復(fù)制活躍，使HBVDNA整合到宿主肝細(xì)胞基因中的機(jī)率升高，因此HCC形成的可能性增加。

AFP是目前公認(rèn)的診斷HCC的重要指標(biāo)之一，原發(fā)性肝癌患者血清AFP水平與HBV感染有密切關(guān)系。此與HBV可通過(guò)與肝癌細(xì)胞整合，而使肝癌細(xì)胞合成AFP的能力增強(qiáng)有關(guān)。本研究顯示，HCC及癌旁肝組織AFP表達(dá)陽(yáng)性率亦較高(且大部分AFP陽(yáng)性細(xì)胞呈彌漫性分布)，其中前者顯著高于后者。提示AFP在HCC及癌旁肝組織中的表達(dá)敏感度高，其合成、加工和分泌的主要部位在胞質(zhì);HCC細(xì)胞及癌旁肝細(xì)胞合成AFP后釋放入血［7］，血清AFP水平可間接反映HCC細(xì)胞合成和加工AFP的能力。此外，本研究顯示，HCC及癌旁肝組織HBsAg陽(yáng)性細(xì)胞內(nèi)肝癌標(biāo)志物 AFP均顯著高于HBsAg陰性細(xì)胞。提示HBV可能通過(guò)免疫反應(yīng)引起肝組織損傷［8］，致使肝細(xì)胞非典型增生、HCC發(fā)生，并最終激發(fā)AFP基因重新開(kāi)放，合成和分泌AFP。

綜上所述，HBV感染可能通過(guò)誘發(fā)肝細(xì)胞產(chǎn)生AFP參與HCC發(fā)病，具體機(jī)制有待進(jìn)一步研究。

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