張芾男，張卓男，滕 利，盧建建，胡國(guó)棟，靳小雷，歸 來(lái)

(1河北省人民醫(yī)院，石家莊050051;2河北醫(yī)科大學(xué)第二醫(yī)院;3中國(guó)醫(yī)學(xué)科學(xué)院整形外科醫(yī)院)

乳房肥大癥又稱(chēng)巨乳癥，多在青春期和妊娠期女性中發(fā)病，其病因及發(fā)生機(jī)制尚不完全清楚，有關(guān)其病因?qū)W的研究很少。雌激素在乳腺的生長(zhǎng)發(fā)育過(guò)程中起著重要作用。芳香化酶是催化雄激素轉(zhuǎn)化為雌激素的限速酶，能促進(jìn)雌激素的合成，從而使局部組織中雌激素的濃度升高。為明確芳香化酶在乳房肥大癥發(fā)生過(guò)程中的作用，2004年9月～2010年12月，我們采用免疫組化法檢測(cè)青春期乳房肥大癥和小乳癥患者乳腺組織中的芳香化酶?，F(xiàn)報(bào)告如下。

1 資料與方法

1.1 臨床資料 18例青春期乳房肥大癥患者(患者在青春期時(shí)發(fā)病，出現(xiàn)乳房過(guò)度發(fā)育，異常增大)，為乳房肥大癥組?；颊呔鶠榕裕挲g18～25歲，平均21.94歲。病程3～9年。所有病例手術(shù)日期均為月經(jīng)期后的第2～3周。每側(cè)切除乳腺重量368～836 g，平均516 g。排除以下患者:①有乳腺纖維腺瘤病史;②月經(jīng)周期不規(guī)律;③2個(gè)月內(nèi)有服用雌激素類(lèi)藥物史;④有妊娠史;⑤有乳腺癌家族史或病史;⑥乳頭溢液;⑦穿刺針吸或切除組織標(biāo)本中有囊腫、積液或積乳;⑧組織病理學(xué)檢查有非典型增生。手術(shù)日期均為月經(jīng)期后的第2～3周。另取12例原發(fā)性小乳癥患者為小乳癥組?；颊呔鶠榕?，年齡21～26歲，平均23.4歲。排除標(biāo)準(zhǔn)與乳房肥大癥組相同，手術(shù)日期同樣均為月經(jīng)期后的第2～3周。

1.2 芳香化酶的檢測(cè)及結(jié)果判定方法 將兩組患者手術(shù)切取的乳腺組織標(biāo)本用10%中性甲醛固定，石蠟包埋，4 μm連續(xù)切片，采用免疫組化法SP法檢測(cè)芳香化酶。操作按試劑盒說(shuō)明書(shū)進(jìn)行。用已知陽(yáng)性的組織做陽(yáng)性對(duì)照，用PBS緩沖液代替一抗做空白對(duì)照。由兩位病理科醫(yī)生在不知患者分組結(jié)果的情況下用光學(xué)顯微鏡分別觀察每張切片，有爭(zhēng)議的切片再請(qǐng)其他病理科醫(yī)生重新判定。芳香化酶的陽(yáng)性反應(yīng)為細(xì)胞質(zhì)內(nèi)出現(xiàn)棕黃色顆粒。每例標(biāo)本選取5個(gè)高倍鏡視野進(jìn)行細(xì)胞計(jì)數(shù)，計(jì)算染色陽(yáng)性的細(xì)胞占所計(jì)數(shù)細(xì)胞的百分比，取平均值。按陽(yáng)性染色細(xì)胞的比例半定量分級(jí):陽(yáng)性細(xì)胞比例＜5%為陰性，～25%為弱陽(yáng)性，＞26%為強(qiáng)陽(yáng)性。

2 結(jié)果

小乳癥組患者乳腺組織中芳香化酶表達(dá)均為陰性，乳房肥大癥組患者乳腺小葉內(nèi)導(dǎo)管上皮細(xì)胞中中均有芳香化酶的表達(dá)，其中8例強(qiáng)陽(yáng)性。

3 討論

乳腺作為性激素的靶器官，其生長(zhǎng)發(fā)育和功能均依賴(lài)于性激素的支持，其中雌激素尤為重要，乳腺的發(fā)育與其密切相關(guān)，如雌激素可以促進(jìn)青春期乳腺導(dǎo)管的生長(zhǎng)和妊娠期小葉腺泡的生長(zhǎng)，刺激促甲狀腺素、泌乳素等其他激素間接作用于乳腺。芳香化酶又稱(chēng)雌激素合成酶，是催化雄激素轉(zhuǎn)化為雌激素的限速酶，在許多雌激素敏感組織中表達(dá)，如芳香化酶的表達(dá)對(duì)于青春期乳房的發(fā)育是必需的［1］。雌激素在女性絕經(jīng)前主要由卵巢顆粒細(xì)胞合成，絕經(jīng)后隨著卵巢合成雌激素功能的的下降，性腺外組織合成的雌激素成為血循環(huán)中雌激素的主要來(lái)源［2，3］。絕經(jīng)后的女性，芳香化酶可在乳房、骨、脈管系統(tǒng)、腦組織局部產(chǎn)生高水平的雌激素，而不影響血循環(huán)中的雌激素水平。研究證實(shí)在雌激素依賴(lài)性腫瘤，如乳腺癌、子宮內(nèi)膜癌中都有芳香化酶的過(guò)度表達(dá)。乳腺癌組織局部表達(dá)的芳香化酶能促進(jìn)雌激素的合成，使乳腺癌組織局部雌激素的濃度升高［4，5］。

芳香化酶屬于細(xì)胞色素P450家族，在人體見(jiàn)于卵巢、胎盤(pán)、睪丸、腦、乳腺、脂肪組織、骨與皮膚及某些病理組織如乳腺癌組織、子宮內(nèi)膜腫瘤組織、異位的子宮內(nèi)膜組織、子宮平滑肌瘤組織，正常無(wú)病的成年肝、腎上腺和子宮組織沒(méi)有芳香化酶的表達(dá)［6］。芳香化酶在這些組織中分別以不同的作用機(jī)制發(fā)揮其生理或病理功能，并受其他多種因素的影響。芳香化酶的數(shù)量和活性直接決定正?；虍惓＝M織中雌激素的水平，從而維持正常組織中與雌激素相關(guān)的生理功能，以及影響雌激素依賴(lài)性疾病的發(fā)生、發(fā)展和預(yù)后。

目前在乳腺疾病的研究中，由于健康人正常的乳腺組織難以獲取，故不得不選取良性或惡性乳腺腫瘤病灶周?chē)娜橄俳M織作為對(duì)照，但嚴(yán)格地講這并不是絕對(duì)正常的組織，因?yàn)榻?jīng)證實(shí)這種組織中甾體激素受體的含量常常增加。因此本研究沒(méi)有采用這種對(duì)照方法，而是選擇與乳房肥大癥相對(duì)應(yīng)的小乳癥患者作為對(duì)照。本研究結(jié)果顯示，青春期乳房肥大癥乳腺組織中芳香化酶的陽(yáng)性表達(dá)明顯高于原發(fā)性小乳癥，由此提示青春期乳房肥大癥的發(fā)生可能與乳腺組織中芳香化酶的表達(dá)情況有一定關(guān)系。筆者推測(cè)乳腺組織中芳香化酶的表達(dá)增加促進(jìn)了性腺外雌激素的生物合成，使乳腺組織局部雌激素的濃度升高，從而導(dǎo)致了乳腺的過(guò)度發(fā)育。有學(xué)者通過(guò)檢測(cè)青春期乳房肥大癥乳腺組織中芳香化酶mRNA的表達(dá)情況，發(fā)現(xiàn)乳房肥大癥患者患者乳腺組織中香化酶mRNA的表達(dá)明顯高于正常乳腺組，這從基因水平支持了我們的設(shè)想。

由于本研究以小乳癥作為對(duì)照，因此本研究結(jié)果僅能證明青春期乳房肥大癥患者乳腺組織中芳香化酶的陽(yáng)性表達(dá)明顯高于原發(fā)性小乳癥患者乳腺組織中芳香化酶的陽(yáng)性表達(dá)，尚不能得出青春期乳房肥大癥患者乳腺組織中芳香化酶表達(dá)高于正常水平的結(jié)論。我們?cè)谝院蟮难芯恐腥孕柙O(shè)法選取正常乳腺組織作為對(duì)照，以進(jìn)一步證實(shí)青春期乳房肥大癥乳腺組織中是否存在芳香化酶的高水平表達(dá)。

［1］Simpson ER，Clyne C，Rubin G，et al.Aromatase-a brief overview［J］.Annu Rev Physiol，2002，64(4):93-127.

［2］Brodie AM，Njar VC.Aromatase inhibitors and their application in breast cancer treatment［J］.Steroids，2000，65(4):171-179.

［3］Pauley RJ，Santner SJ，Tait LR，et al.Regulated CYP19 aromatase transcription in breast stromal fibroblasts［J］.J Clin Endocrinol Metab，2000，85(2):837-846.

［4］Yue W，Wang JP，Hamilton CJ，et al.In situ aromatization enhances breast tumor estradiol levels and cellular proliferation［J］.Cancer Res，1998，58(5):927-932.

［5］Lu Q，Nakmura J，Savinov A，et al.Expression of aromatase protein and messenger ribonucleic acid in tumor epithelial cells and evidence of functional significance of locally produced estrogen in human breast cancers［J］.Endocrinology，1996，137(7):3061-3068.

［6］Hinshelwood MM，Mendelson CR.Tissue-specific expression of the human CYP19(aromatase)gene in ovary and adipose tissue of transgenic mice［J］.J Steroid Biochem Mol Biol，2001，79(1-5):193-201.