丁 毅， 劉貴超， 喬立新

(1.新鄉(xiāng)醫(yī)學(xué)院第一附屬醫(yī)院，河南 衛(wèi)輝 453100;2.南陽(yáng)市骨科醫(yī)院，河南南陽(yáng) 473000)

芪倍合劑的制備及臨床應(yīng)用

丁 毅1， 劉貴超2， 喬立新1

(1.新鄉(xiāng)醫(yī)學(xué)院第一附屬醫(yī)院，河南 衛(wèi)輝 453100;2.南陽(yáng)市骨科醫(yī)院，河南南陽(yáng) 473000)

目的 對(duì)芪倍合劑的制備及質(zhì)量控制進(jìn)行研究，并觀察該制劑對(duì)慢性潰瘍性結(jié)腸炎臨床治療作用。方法 建立該制劑的質(zhì)量控制方法，并將136例慢性潰瘍性結(jié)腸炎患者隨機(jī)分成對(duì)照組和治療組進(jìn)行治療前后的比較，并隨訪6個(gè)月比較兩組的復(fù)發(fā)率。結(jié)果 制備工藝簡(jiǎn)單，鑒別方法專屬性強(qiáng)，重現(xiàn)性好，質(zhì)量可控;治療組療效和復(fù)發(fā)率均明顯優(yōu)于對(duì)照組。結(jié)論 本制劑工藝可行，組方合理，有穩(wěn)定可控的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)和良好的臨床療效，復(fù)發(fā)率低，宜于臨床推廣。

芪倍合劑;制備;慢性潰瘍性結(jié)腸炎;臨床應(yīng)用

慢性潰瘍性結(jié)腸炎(Ularative Cotitis，UC)又稱慢性非特異性潰瘍性結(jié)腸炎，屬現(xiàn)代難治病，世界衛(wèi)生組織將其定為14種難治性疾病之一。其病因多元復(fù)雜，是一種病因未明的直腸和結(jié)腸炎性病變。此病病程較長(zhǎng)，常反復(fù)發(fā)作，遷延難愈，被視為癌前病變［1］。西藥近期治療和遠(yuǎn)期療效都不甚理想，芪倍合劑(豫藥制字Z04070018)是新鄉(xiāng)醫(yī)學(xué)院一附院中藥制劑室研制的純中藥制劑，臨床上用于治療慢性潰瘍性結(jié)腸炎，效果良好。

1 制備

1.1 處方 黃芪300 g，附子(制)60 g，大黃50 g，干姜30 g，五倍子50 g，赤石脂600 g，白及50 g。

1.2 制備 以上七味藥，白及粉碎成細(xì)顆粒狀，加溫蒸餾水(約50～60 ℃)浸泡(10倍、8倍、5 倍;6 h、4 h、4 h)，并不時(shí)攪拌，以4層紗布過(guò)濾，合并濾液，濃縮成白及膠漿備用。黃芪等六味藥共同加水煎煮2次(10倍、8倍;2 h、1 h)，濾過(guò)，合并濾液，濃縮至適量(1∶1)，靜置冷藏24 h，過(guò)濾，將白及膠漿及尼泊金乙酯0.5 g、甜蜜素2 g一并加入，攪勻，調(diào)整總量為1 000 mL，分裝，消毒即得。

1.3 質(zhì)量控制

1.3.1 性狀 本品為黃棕色至棕褐色的液體;氣微香，味微苦、微澀。

1.3.2 鑒別

1.3.2.1 赤石脂理化鑒別 取供試液10 mL置坩堝中炙灼，殘?jiān)酉←}酸(1 mol/L)適量，攪拌使溶解，過(guò)濾取濾液分成兩份。一份加氫氧化鈉試液，即生成膠狀沉淀，用離心機(jī)(2 000 r/min)離心10 min，棄去上清液，加過(guò)量氫氧化鈉試液，沉淀溶解;另一份加氨試液至生成膠狀沉淀，用離心機(jī)(2 000 r/min)離心10 min，棄去上清液，滴加茜素磺酸鈉指示液數(shù)滴，沉淀即顯櫻紅色。

1.3.2.2 黃芪薄層色譜鑒別 取本品5 mL，加水飽和的正丁醇提取3次(20、20、15 mL)，合并正丁醇液，用氨試液提取2次(20 mL、20 mL)，棄去氨液，再以正丁醇飽和的水洗滌至中性，正丁醇液水浴揮干，殘?jiān)蛹状? mL使溶解，作為供試液。另取黃芪甲苷對(duì)照品，加甲醇制成每1 mL含1 mg的溶液，作為對(duì)照品溶液。照薄層色譜法(中國(guó)藥典2000年版一部附錄VI B)試驗(yàn)，吸取上述兩種溶液各3 μL，分別點(diǎn)于同一硅膠G薄層板上，以三氯甲烷-乙酸乙酯-甲醇-水(10∶20∶11∶5)10℃以下分層的下層液為展開(kāi)劑，展開(kāi)，取出，晾干，噴以10%硫酸乙醇液，105℃烘烤，結(jié)果供試品色譜中，在與對(duì)照品色譜的相應(yīng)位置上，自然光下顯相同的棕褐色斑點(diǎn)。在紫外光(365 nm)下顯相同的橙黃色熒光斑點(diǎn)。

1.3.2.3 大黃的薄層色譜鑒別 取本品20 mL，加鹽酸2 mL，置水浴上加熱30 min，立即冷卻，用乙醚萃取2次(20、20 mL)，合并乙醚液，揮去溶劑，殘?jiān)蛹状? mL使溶解，作為供試品溶液。另取大黃藥材0.1 g，加甲醇20 mL超聲提取30 min，濾過(guò)，取濾液5 mL，蒸干，加水10 mL使溶解，以下同供試品制備方法，從“再加鹽酸2 mL……”起制成對(duì)照藥材溶液。再取大黃素對(duì)照品加甲醇制成每1 mL含1 mg的溶液，作為對(duì)照品溶液。照薄層色譜法(中國(guó)藥典2000年版一部附錄VI B)試驗(yàn)，吸取上述供試品溶液5 μL，對(duì)照藥材溶液4 μL，對(duì)照品溶液2 μL，分別點(diǎn)于硅膠 H-CMC薄層板上，以正己烷-乙酸乙酯-甲酸(30∶10∶0.5)為展開(kāi)劑，展開(kāi)，取出，晾干，供試品色譜中，在與對(duì)照藥材色譜相應(yīng)的位置上，顯相同的5個(gè)橙黃色熒光主斑點(diǎn);在與對(duì)照品色譜相應(yīng)的位置上，顯相同的橙黃色熒光斑點(diǎn)，置氨蒸氣中熏后，日光下檢視，斑點(diǎn)變?yōu)榧t色。

1.3.3 檢查

1.3.3.1 烏頭堿限量檢查 取本品50 mL，加氨水10 mL混勻，加乙醚100 mL，振搖30 min，放置2 h，分取乙醚層，蒸干，加無(wú)水乙醇1 mL使溶解，作為供試品溶液。另精密稱取烏頭堿對(duì)照品，加無(wú)水乙醇制成每1 mL含1 mg的溶液，作為對(duì)照品溶液。照薄層色譜法(中國(guó)藥典2010年版一部附錄VI B)試驗(yàn)，吸取供試品溶液9 μL，對(duì)照品溶液4 μL，分別點(diǎn)于同一硅膠G-CMC薄層板上，以石油醚(30～60℃)-三氯甲烷-乙醇(2∶4∶3)為展開(kāi)劑，展開(kāi)，取出，晾干，置碘蒸氣中熏至斑點(diǎn)清晰。供試品色譜中，在與對(duì)照品色譜相應(yīng)位置上，顯淺于對(duì)照品色譜顏色的斑點(diǎn)或不出現(xiàn)斑點(diǎn)。

1.3.3.2 pH值 應(yīng)為4.0 ～6.0(中國(guó)藥典 2010 年版一部附錄VII G)。

1.3.3.3 相對(duì)密度 應(yīng)不低于1.03(中國(guó)藥典2010年版一部附錄VII A)。

1.3.3.4 其它檢查應(yīng)符合《中國(guó)藥典》2010年版一部附錄合劑項(xiàng)下有關(guān)的各項(xiàng)規(guī)定［2］。

2 臨床應(yīng)用

2.1 一般資料 入選病例136例，均來(lái)自新鄉(xiāng)醫(yī)學(xué)院第一附屬醫(yī)院2009年8月—2010年3月消化內(nèi)科住院病人。診斷標(biāo)準(zhǔn)符合2000年中華醫(yī)學(xué)會(huì)消化病學(xué)會(huì)制定的《對(duì)炎癥性腸病診斷治療規(guī)范的建議》中關(guān)于炎癥性腸炎的診斷標(biāo)準(zhǔn)。將136患者隨機(jī)分成兩組:治療組69例，男40例，女29例，年齡20～63歲，平均年齡40.8歲，病程3個(gè)月～17年，其中乙狀結(jié)腸潰瘍29例，直腸潰瘍24例，降結(jié)腸潰瘍16例;對(duì)照組67例，男37例，女30例，年齡18～65歲，平均41.3歲，病程1年～20年，其中乙狀結(jié)腸潰瘍30例，直腸潰瘍23例，降結(jié)腸潰瘍14例。兩組在性別、年齡、病程、病變范圍及程度上無(wú)顯著性差異(P＞0.05)，具有可比性。

2.2 治療方法 兩組患者均給予一般對(duì)癥治療，在治療期間保持精神愉快，注意勞逸結(jié)合，進(jìn)食清淡、易消化、高營(yíng)養(yǎng)的食物，忌辛辣、生冷、油膩食物。對(duì)照組給予柳氮磺胺吡啶(SASP)片口服，1 g/次，4次/日，療程40 d。治療組給予芪倍合劑，每次100 mL，加熱至38℃，每晚便后保留灌腸，1次/日，療程40 d。觀察及詳細(xì)記錄藥物的不良反應(yīng)。

2.3 治療結(jié)果

2.3.1 療效判斷標(biāo)準(zhǔn) 痊愈:臨床癥狀消失，結(jié)腸鏡檢查黏膜大致正常;有效:臨床癥狀基本消失，結(jié)腸鏡檢查黏膜有輕度炎癥表現(xiàn);好轉(zhuǎn):臨床癥狀改善，結(jié)腸鏡檢查黏膜病變減輕;無(wú)效:臨床癥狀及結(jié)腸鏡檢黏膜病變無(wú)明顯改善，或有復(fù)發(fā)。

2.3.2 療效結(jié)果 見(jiàn)表1。

表1 2組患者臨床療效比較

2.3.3 不良反應(yīng) 治療期間兩組均未發(fā)生與藥物有關(guān)的毒副反應(yīng)及不良反應(yīng)，治療前后血、尿常規(guī)和肝、腎功能均在正常范圍內(nèi)。

2.3.4 療程結(jié)束后，兩組的治愈病例均隨訪6個(gè)月，治療組復(fù)發(fā)1例，占3.125%，對(duì)照組復(fù)發(fā)3例，占25.0%，治療組的復(fù)發(fā)率明顯低于對(duì)照組。

3 討論

3.1 在對(duì)大黃進(jìn)行薄層色譜時(shí)，原展開(kāi)劑為石油醚(30～60℃)-甲酸乙酯-甲酸(15∶5∶1)，展開(kāi)后，斑點(diǎn)分離效果不佳，Rf值偏低，且有邊緣效應(yīng)，經(jīng)篩選后，采用正己烷-乙酸乙酯-甲酸(30∶10∶0.5)為展開(kāi)劑，控制溫度為18℃，相對(duì)濕度為42%，同時(shí)預(yù)飽和30 min，所得斑點(diǎn)Rf值適中，分離效果好。

3.2 黃芪與柴胡所含有效成分黃芪甲苷、柴胡皂苷均為三萜皂苷，故筆者選用同一種提取方法制備的供試品溶液，即可對(duì)兩種藥材分別進(jìn)行TLC鑒別。在對(duì)黃芪進(jìn)行實(shí)驗(yàn)時(shí)，原展開(kāi)劑為三氯甲烷-甲醇-水(65∶35∶10)，雖可將黃芪甲苷檢出，但Rf＞0.95，且斑點(diǎn)呈扁圓形，經(jīng)選用三氯甲烷-乙酸乙酯-甲醇-水(10∶20∶11∶5)10℃以下放置的下層溶液為展開(kāi)劑［3］，展開(kāi)時(shí)溫度控制在30℃以下，相對(duì)濕度45%～58%，所得斑點(diǎn)Rf值適中，圓而清晰。

3.3 附子主要含烏頭堿型生物堿，其中以雙酯型烏頭堿毒性最強(qiáng)，附子經(jīng)過(guò)炮制，使極毒的雙酯型烏頭堿水解，為了防止附子提取過(guò)程中烏頭堿水解不完全而引起中毒事故，故檢查中對(duì)烏頭堿進(jìn)行TLC限量檢查。

3.4 慢性潰瘍性結(jié)腸炎為自身免疫疾病，因此，本病的治療應(yīng)從調(diào)節(jié)免疫功能，消除引起異常免疫反應(yīng)因素著手。芪倍合劑是在中醫(yī)理論的指導(dǎo)下，將張仲景的“大黃附子湯”、“桃花湯”合方進(jìn)行加減，在其原方的基礎(chǔ)上重用黃芪補(bǔ)脾益氣，再配伍五倍子、白及，制成合劑，能調(diào)節(jié)機(jī)體免疫功能，增強(qiáng)抗菌、抗炎、抗過(guò)敏的能力，同時(shí)能有效地保護(hù)潰瘍面，增強(qiáng)自身的修復(fù)功能。近年來(lái)研究表明，黃芪［4］、附子、干姜都具有免疫調(diào)節(jié)作用［4］592，大黃有消炎及免疫調(diào)節(jié)和使局部血管收縮的止血作用［5］，五倍子能使黏膜、潰瘍等局部組織蛋白凝固而呈現(xiàn)收斂作用，能加速血液凝固止血，對(duì)多種細(xì)菌均有明顯抑制和殺滅作用，赤石脂能吸附消化道的毒物和炎性滲出物，使炎癥得以緩解［4］391。

上述諸藥合用，可有效的清除腸道內(nèi)引起異常免疫反應(yīng)的致病菌。此方不僅能調(diào)節(jié)人體免疫功能，并且能改善微循環(huán)，促進(jìn)結(jié)腸潰瘍的修復(fù)，控制結(jié)腸炎性反應(yīng)，同時(shí)有較好的解痙止痛和收斂作用，達(dá)到止瀉、促進(jìn)疾病的修復(fù)痊愈。

［1］田海河.慢性潰瘍性結(jié)腸炎中醫(yī)辨治體會(huì)［C］∥全國(guó)腸道炎性疾病研究新進(jìn)展論文集.北京:1995.

［2］國(guó)家藥典委員會(huì).中華人民共和國(guó)藥典:2010年版一部［S］.北京:中國(guó)醫(yī)藥科技出版社，2010:附錄I G.

［3］國(guó)家藥典委員會(huì).中華人民共和國(guó)藥典中藥薄層色譜彩色圖集［M］.廣州:廣東科技出版社，1993:66.

［4］陰 鍵，郭力弓.中藥現(xiàn)代化研究與臨床應(yīng)用(I)［M］.北京:學(xué)苑出版社，1993:50.

［5］黎磊石，劉志紅，張景紅，等.大黃延緩慢性腎衰的臨床及實(shí)驗(yàn)研究［J］.中國(guó)中西醫(yī)結(jié)合雜志，1991，11(7):392-396，387.

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1001-1528(2011)08-1459-02

2010-12-14

丁 毅(1973—)，女，主管藥師，主要從事中藥的研制及檢驗(yàn)工作。Tel:13598665402，E-mail:dy0373@163.com