氣相色譜法測(cè)定復(fù)方薄荷腦洗劑中樟腦與薄荷腦含量

黃文濤，張耕，程璐

(武漢市第一醫(yī)院制劑中心，430022)

復(fù)方薄荷腦洗劑(制劑文號(hào):H20083025)是武漢市第一醫(yī)院的醫(yī)院制劑，由薄荷腦、樟腦用乙醇溶解，將苯酚液化，分別加入到基質(zhì)中制得，其中含樟腦1%、薄荷腦0.5%。該制劑具有清涼止癢、消毒潔膚的作用，用于皮膚瘙癢癥等。為了控制質(zhì)量，筆者參考文獻(xiàn)［1-2］，采用氣相色譜(gas chromatography，GC)法測(cè)定該制劑中的薄荷腦和樟腦含量。

1 儀器與試藥

1.1 儀器 氣相色譜儀(日本島津GC-14C)，浙大N2000色譜工作站，電子天平(德國(guó)Sartorius ME215S，d=0.01 mg)。

1.2 試藥 樟腦對(duì)照品(中國(guó)藥品生物制品檢定所，含量測(cè)定用，批號(hào):110747-200507)，薄荷腦對(duì)照品(中國(guó)藥品生物制品檢定所，批號(hào):110728-200506)，萘(中國(guó)藥品生物制品檢定所，內(nèi)標(biāo)物，批號(hào):111673-200602)，復(fù)方薄荷腦洗劑(武漢市第一醫(yī)院生產(chǎn)，批號(hào):100117，100312，100423)，環(huán)己烷(色譜純，天津市四友精細(xì)化學(xué)品有限公司)。

2 方法與結(jié)果

2.1 色譜條件與系統(tǒng)適應(yīng)性 色譜柱:島津CBPM25-025(25 m×0.22 mm，0.25 μm);以聚乙二醇-20M為固定相，涂布濃度為10%;載氣:氮?dú)?氮?dú)饬魉?40 mL·min-1;氫氣流速:30 mL·min-1;空氣流速:400 mL·min-1;柱溫:150℃;進(jìn)樣口溫度和檢測(cè)器溫度均為220℃;FID為檢測(cè)器;進(jìn)樣量1 μL;理論塔板數(shù)按樟腦計(jì)不低于1 500。樟腦、薄荷腦、內(nèi)標(biāo)物峰的分離度應(yīng)符合要求。

2.2 內(nèi)標(biāo)溶液的制備 取萘適量，精密稱定，加環(huán)己烷制成每毫升含萘1 mg的溶液，即得。

2.3 對(duì)照品溶液的制備 精密稱定樟腦、薄荷腦對(duì)照品適量，加環(huán)己烷溶解，制成每毫升分別含樟腦、薄荷腦1和0.5 mg的溶液，即得。

2.4 供試品溶液的制備 取本品2.0 g，精密稱定，置25 mL量瓶中，加內(nèi)標(biāo)溶液至刻度，振搖20 min，即得。

2.5 線性關(guān)系考察 精密稱取樟腦對(duì)照品202.3 mg，薄荷腦對(duì)照品104.2 mg，置20 mL量瓶中，加內(nèi)標(biāo)溶液溶解并稀釋至刻度，得對(duì)照品儲(chǔ)備液。精密量取該儲(chǔ)備液0.5，1.0，2.0，3.0，4.0，5.0 mL 至10 mL 量瓶中，加內(nèi)標(biāo)溶液至刻度，搖勻，各精密量取1 μL，進(jìn)樣測(cè)定峰面積，以樟腦、薄荷腦與內(nèi)標(biāo)物的峰面積比(Y)為縱坐標(biāo)，對(duì)照品溶液濃度(X)為橫坐標(biāo)，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，得樟腦、薄荷腦的回歸方程分別為:Y=29 802.7X+509.6(n=6)，r=0.999 9;Y=10 025X+9.9(n=6)，r=0.999 9。結(jié)果表明樟腦、薄荷腦濃度分別在0.51～5.06及0.26～2.61 mg·mL-1范圍內(nèi)有良好的線性關(guān)系。

2.6 專(zhuān)屬性實(shí)驗(yàn) 照本品處方及生產(chǎn)工藝，分別制備樟腦陰性樣品溶液、薄荷腦陰性樣品溶液、樟腦薄荷腦陰性樣品溶液，同“2.4”項(xiàng)制備陰性供試品溶液，各取1 μL按擬定的色譜條件進(jìn)行測(cè)定。結(jié)果供試品溶液主峰的保留時(shí)間與對(duì)照品溶液主峰的保留時(shí)間一致，空白對(duì)照在樟腦、薄荷腦對(duì)照品色譜峰相應(yīng)的保留時(shí)間處沒(méi)有出峰，表明樣品中樟腦、薄荷腦峰與其他組分色譜峰達(dá)到分離效果，陰性樣品中色譜峰對(duì)測(cè)定無(wú)干擾，表明本法可行。見(jiàn)圖1。

2.7 精密度實(shí)驗(yàn) 取同一份對(duì)照品溶液，重復(fù)進(jìn)樣6次，以樟腦、薄荷腦與內(nèi)標(biāo)物的峰面積比計(jì)算RSD，樟腦為0.54%，薄荷腦為0.62%，精密度良好。

2.8 重復(fù)性實(shí)驗(yàn) 取復(fù)方薄荷腦洗劑(批號(hào):100117)，按“2.4”項(xiàng)制備方法平行制備6份，照供試品測(cè)定方法測(cè)定其含量，結(jié)果樟腦、薄荷腦分別為標(biāo)示含量的97.5%，98.6%，RSD分別為1.34%，1.21%，說(shuō)明本法重復(fù)性良好。

圖1 5種溶液的GC圖A.對(duì)照品;B.樣品;C.缺樟腦的陰性溶液;D.缺薄荷腦的陰性溶液;E.缺樟腦薄荷腦的陰性溶液;1.樟腦;2.薄荷腦;3.萘(內(nèi)標(biāo)物)

2.9 穩(wěn)定性實(shí)驗(yàn) 取復(fù)方薄荷腦洗劑(批號(hào):100117)適量，按“2.4”項(xiàng)制備供試品溶液，在相同色譜條件下分別于0，3，6，9，12 h 測(cè)定，以樟腦、薄荷腦與內(nèi)標(biāo)物峰面積比計(jì)算RSD，結(jié)果樟腦為0.43%，薄荷腦為0.58%。表明供試品溶液在12 h內(nèi)基本穩(wěn)定。

2.10 回收率實(shí)驗(yàn) 精密稱取樟腦對(duì)照品145.3 mg，薄荷腦對(duì)照品64.2 mg，置20 mL量瓶中，加內(nèi)標(biāo)溶液溶解并稀釋至刻度，得對(duì)照品儲(chǔ)備液。精密量取已知含量的供試品(批號(hào):100117，樟腦、薄荷腦含量分別為標(biāo)示含量的97.5%，98.6%)1.0，2.0，3.0 mL各3份，分別精密加入對(duì)照品儲(chǔ)備液1.0，2.0，3.0 mL，按“2.4”項(xiàng)方法操作，測(cè)定并計(jì)算回收率。結(jié)果見(jiàn)表1。樟腦平均回收率99.3%，RSD=0.67%;薄荷腦平均回收率99.1%，RSD=0.88%。

2.11 樣品含量測(cè)定 取批號(hào)為100117，100312，100423的復(fù)方薄荷腦洗劑，按照“2.4”項(xiàng)方法制備供試品溶液，按擬訂色譜條件測(cè)定并計(jì)算含量，結(jié)果3批樣品樟腦含量分別為97.6%，101.5%，96.4%，薄荷腦含量分別為101.3%，99.7%，98.2%。

3 討論

［3-5］方法，筆者實(shí)驗(yàn)了10%聚乙二醇20M的玻璃填充柱及HP2INNOWAX石英毛細(xì)管色譜柱(30 m×0.320 mm，0.25 μm)。結(jié)果表明，聚乙醇-20M填充柱能達(dá)到各組分的分離，效果良好，且柱效高，保留時(shí)間較短，達(dá)到快速分析的目的。

表1 復(fù)方薄荷腦洗劑中樟腦與薄荷腦的加樣回收率實(shí)驗(yàn)結(jié)果

文獻(xiàn)［6-7］中測(cè)定樟腦和薄荷腦含量，采用程序升溫法。本實(shí)驗(yàn)比較了一系列程序升溫條件，結(jié)果發(fā)現(xiàn)采用程序升溫法色譜峰的拖尾因子較高，重復(fù)性差，采用150℃恒溫時(shí)可以達(dá)到各色譜峰基線分離，峰形對(duì)稱，重復(fù)性高。

選用水楊酸甲酯為內(nèi)標(biāo)因與樣品薄荷腦的峰重疊，而只有萘的峰不與之重疊，故選擇萘為內(nèi)標(biāo)物質(zhì)。

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