張 知,黃昌艷,張?jiān)7?,?春,朱春梅
(江西省贛州市立醫(yī)院檢驗(yàn)科,江西 贛州 341000)
由于人絨毛膜促性腺激素(HCG)濃度的變化幅度很大,對(duì)其定量檢測(cè)經(jīng)常需要進(jìn)行稀釋[1]。稀釋定量的通常做法是先測(cè)定一次,然后根據(jù)第一次的情況確定稀釋倍數(shù)再測(cè)定第二次,有時(shí)甚至要調(diào)整稀釋倍數(shù)測(cè)定第三次。為簡(jiǎn)化操作,降低成本,一年來(lái),贛州市立醫(yī)院檢驗(yàn)科嘗試著對(duì)血HCG定量檢測(cè)先做定性檢測(cè)、再確定稀釋倍數(shù),發(fā)現(xiàn)是可行的,基本上能一次稀釋、定量檢測(cè)到位?,F(xiàn)報(bào)告如下。
1.1 標(biāo)本來(lái)源 2011年5月25日至2011年5月17日期間來(lái)本院就診或住院病人240例門診或住院患者。
1.2 儀器與試劑 HCG定性檢測(cè)試劑條 (常規(guī)檢測(cè)尿HCG試條)。SIEMENS公司出產(chǎn)的ADVIA Centaur CP全自動(dòng)化學(xué)發(fā)光免疫分析儀,具有自動(dòng)稀釋及換算功能。SIEMENS公司出產(chǎn)的ADVIA Centaur HCG檢測(cè)試劑、輔助試劑、校準(zhǔn)品、質(zhì)控品及其他配套使用耗材等。
1.2 方法
1.2.1 將血樣離心分離后,先吸出儀器檢測(cè)用所需的血清300μl至專用樣品管。
1.2.2 將定性檢測(cè)試劑條插入剩余血清中,5~10s后取出,平放5min左右。
1.2.3 判讀定性檢測(cè)結(jié)果,僅對(duì)照線顯色為陰性,檢測(cè)線也顯色、但比對(duì)照線更淡為弱陽(yáng)性,兩處顯色基本接近為陽(yáng)性,檢測(cè)線顏色比對(duì)照線明顯更深為強(qiáng)陽(yáng)性。
1.2.4 根據(jù)定性檢測(cè)結(jié)果確定定量檢測(cè)的稀釋倍數(shù)(見(jiàn)表1)。
表1 定性檢測(cè)結(jié)果稀釋倍數(shù)參考
1.2.5 將先前已加入300μl血清的樣品管放入化學(xué)發(fā)光儀,在儀器操作系統(tǒng)中選擇點(diǎn)擊自動(dòng)稀釋倍數(shù),進(jìn)行定量檢測(cè)。
根據(jù)表2可知,在這240例中,只有2例強(qiáng)陽(yáng)性者稀釋200倍未能出結(jié)果,于是進(jìn)行了第二次稀釋、即2000倍。一次稀釋、定量檢測(cè)到位的238例,比率為99.2%,其中:未稀釋的檢測(cè)結(jié)果最低為0 mIU/ml、最高為 679.9mIU/ml; 10 倍、100 倍、200 倍稀釋的檢測(cè)結(jié)果范圍分別為97.6~2759.9mIU/ml、844.0~82857.4mIU/ml、11888.3~215755.1mIU/ml。
表2 240例HCG稀釋定量檢測(cè)各稀釋倍數(shù)的檢測(cè)例數(shù)統(tǒng)計(jì)表
HCG是由胎盤絨毛膜滋養(yǎng)層細(xì)胞合成、分泌的激素,其檢測(cè)主要是用于早期妊娠的診斷,也常用于妊娠相關(guān)疾病、腫瘤等的診斷及鑒別診斷[2,3]。因血中HCG變化較快,能及時(shí)反映絨毛的分泌活動(dòng),加之檢測(cè)方法也從酶標(biāo)免疫法、放射免疫法發(fā)展到了現(xiàn)在的熒光免疫法、化學(xué)發(fā)光法,檢測(cè)的速度和準(zhǔn)確性都大為提高,故血HCG檢測(cè)正日益受到臨床醫(yī)生和患者的青睞。
SIEMENS公司的ADVIA Centaur HCG檢測(cè)的檢出范圍為2.0~1000mIU/ml,其自動(dòng)稀釋倍數(shù)有5、10、100、200 四個(gè)。 因此,10、100、200 倍稀釋的檢出范圍分別為 20~1 萬(wàn)、200~10 萬(wàn)、400~20 萬(wàn) mIU/mL;可以進(jìn)一步看到的是,結(jié)果在400~1萬(wàn)mIU/mL的樣本,無(wú)論稀釋10、100、200倍,都能一次檢出,依此類推……所以,對(duì)判讀定性檢測(cè)結(jié)果并不要求很精確。先定性然后一次稀釋、定量到位,這是可行的,而且是簡(jiǎn)易的。
[1]方春元,張建祥.膠體金試紙定性檢測(cè)與血β-HCG定量檢測(cè)的相關(guān)性[J].實(shí)驗(yàn)與檢驗(yàn)醫(yī)學(xué),2011,29(1):79.
[2]葉應(yīng)嫵,王毓三,申子瑜.全國(guó)臨床檢驗(yàn)操作規(guī)程[M].第3版,南京:東南大學(xué)出版社,2006:300-301.
[3] 李筱莉,陳 燕,葉 倩,等.血清總β-HCG在妊娠滋養(yǎng)細(xì)胞疾病診治中的臨床應(yīng)用價(jià)值[J].實(shí)驗(yàn)與檢驗(yàn)醫(yī)學(xué),2010,28(6):641-642.