西南大學(xué)榮昌校區(qū)水產(chǎn)系 陳鵬飛 何張萍西南大學(xué)榮昌校區(qū)動物醫(yī)學(xué)系 伍 莉＊

蛋白質(zhì)是水產(chǎn)動物生長的重要營養(yǎng)元素，又是影響飼料成本的重要因子，而作為水產(chǎn)動物飼料中重要的動物蛋白源，由于其資源量下降，價格昂貴，成為影響飼料成本的主要因素之一。因此，尋找適宜的魚粉比例可以充分利用緊缺的動物蛋白，最大限度地滿足養(yǎng)殖對象的生長需求 （陸陽等，2010；江仁黨等，2004）。丁鱥（Tinca tinca）屬鯉形目鯉科雅羅魚亞科丁鱥屬，是廣泛分布于歐洲大陸、亞洲高加索山脈和西伯利亞地區(qū)的一種重要的經(jīng)濟(jì)魚類，其含肉率高達(dá)73.59%，魚肉蛋白質(zhì)含量19.73%，脂肪含量1.29%，氨基酸總量18.13%，其中必需氨基酸量為7.04%（黃峰等，2004）。丁鱥肌肉所含人體必需氨基酸占氨基酸總量的百分比高于WHO/FAO提出標(biāo)準(zhǔn)，必需氨基酸指數(shù)為74.38，尤其富含多聚不飽和脂肪酸，二十碳五烯酸含量及二十二碳六烯酸含量在總脂中分別達(dá)到了5.14%和6.0%，而被歐洲人視為保健食品（Vacha 和 Eva，1995）。近年來，丁鱥在我國部分地區(qū)已有養(yǎng)殖，關(guān)于幼魚生長、營養(yǎng)及飼料的研究已有少量報道（馮新忠等，2008），但有關(guān)丁鱥配飼中適宜的蛋白水平還很少報道。本試驗以魚粉作為動物蛋白源，豆柏、菜餅為植物蛋白源來配制試驗飼料，旨在探討丁鱥配飼中適宜的魚粉比例，為丁鱥應(yīng)用配合飼料的研制提供參考。

1 材料與方法

1.1 試驗魚 丁鱥幼魚購于四川隆昌縣古宇湖漁場，均重（6.5±0.22）g，共計 900 尾。

1.2 試驗飼料 根據(jù)丁鱥屬肉食性兼雜食性魚類的特點(diǎn)，飼料以魚粉作動物蛋白源，豆粕、菜餅為植物蛋白源，并按魚粉比例占飼料蛋白0%、20%、40%、60%、80%、100%配成 6種飼料，分別投喂試驗組丁鱥。為提高飼料的適口性，在飼料中加入少量腥味誘食劑，同時加入適量水產(chǎn)黏合劑，基礎(chǔ)日糧配方及營養(yǎng)水平見表1。

1.3 試驗設(shè)計與飼養(yǎng)管理 試驗魚隨機(jī)分為6組，每組設(shè)3個重復(fù)，每個重復(fù)50尾，用3%食鹽水消毒后養(yǎng)殖于水族箱 （100 cm×48 cm×50 cm）中，暫養(yǎng)1周，待其適應(yīng)環(huán)境、正常攝食后開始試驗。24 h充氧，每日投喂2次（09∶00和16∶00），投飼率為3%～5%。試驗期間根據(jù)養(yǎng)殖水體混濁度采用虹吸法每2～3 d換水一次，每次換水量約占總水量的30%。試驗期間水溫控制在22～25℃，pH為8.10～8.50，溶氧＞7.0 mg/L，氨 ＜0.30 mg/L，試驗時間56 d。試驗結(jié)束時禁食（自由飲水）24 h后稱重，統(tǒng)計每組魚的生長數(shù)據(jù)，再與試驗前的數(shù)據(jù)進(jìn)行比較，即可得出不同比例的魚粉對試驗魚生長的影響。

表1 飼料組成及營養(yǎng)水平（理論值）

1.4 生長性能測定 參考李愛杰（1996）和劉永堅等（2002）的方法測定。計算公式如下：

增重率（WGR）/%=100×（終末尾均重－初始尾均重）/初始尾均重；

特定生長率（SGR）/（%/d）=（1n 終末尾均重-ln 初始尾均重）/天數(shù)×l00；

飼料系數(shù)（FCR）= 攝食量/增重×l00；

蛋白質(zhì)效率（PER）/%=（終末尾均重-初始尾均重）/蛋白質(zhì)攝入量×100。

1.5 消化酶活性測定

1.5.1 酶液制備 參照王愛民等（2010）方法制備粗酶提取液，并于24 h內(nèi)分析完畢。

1.5.2 蛋白酶測定 參照 《生化技術(shù)導(dǎo)論》（中山大學(xué)生物系，1979）進(jìn)行。在 pH 7.6，（30±1）℃下保溫15 min，以1 min水解酪蛋白產(chǎn)生1 μg酪氨酸為一個活性單位。

1.5.3 淀粉酶 參照 《臨床生化檢驗》（上海市醫(yī)學(xué)化驗所，1979）進(jìn)行。 在 pH 7.6，（30±1）℃下，100 mL酶液在30 min內(nèi)完全水解10 mg淀粉為一個活性單位。

1.5.4 脂肪酶 參照 《生化技術(shù)導(dǎo)論》（中山大學(xué)生物系，1979）進(jìn)行。 在 pH 7.6，（30±1）℃下，脂肪酶水解脂肪1 min產(chǎn)生1 μg分子脂肪酸的酶量定義為一個活性單位。

1.6 數(shù)據(jù)處理 采用SPSS 17.0對試驗數(shù)據(jù)進(jìn)行單因素方差分析（One-way ANOVA），差異顯著時進(jìn)行Duncan’s多重比較，P＜0.05表示差異顯著，P＜0.01表示差異極顯著。

2 結(jié)果

2.1 不同比例的魚粉對丁鱥幼魚生長及飼料利用的影響 由表2可見，隨著魚粉比例的提高，丁鱥的增重率、特定生長率和蛋白效率也隨之增高，且在魚粉為60%時達(dá)到最大，此時飼料系數(shù)為最低。但魚粉超過60%后，增重率、特定生長率和蛋白效率呈下降趨勢，飼料系數(shù)開始升高。增重率和特定生長率各試驗組之間除第Ⅴ組與第Ⅵ組差異不顯著（P＞0.05）外，其余各組間差異極顯著（P＜0.01）；飼料系數(shù)以第Ⅳ組最低，但與Ⅲ、Ⅴ組比較差異不顯著（P＞0.05），與Ⅰ、Ⅱ、Ⅵ組比較差異顯著（P＜0.05）；蛋白質(zhì)效率以第Ⅳ組最高，但與Ⅲ、Ⅴ、Ⅵ組比較差異不顯著（P＞0.05），與Ⅰ、Ⅱ組比較則差異顯著（P＜0.05）。

表2 飼料中不同比例的魚粉對丁鱥幼魚生長的影響

2.2 不同比例的魚粉對丁鱥幼魚消化酶活性的影響 由表3可見，隨著魚粉比例的增加，丁鱥蛋白酶顯著升高，并在飼料魚粉比例為60%時（第Ⅳ組）達(dá)到最大，其中腸蛋白酶活性與Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅵ組比較差異顯著（P＜0.05），肝胰臟蛋白酶活性差異極顯著（P＜0.01）。之后，隨著魚粉比例繼續(xù)增加，蛋白酶活性、淀粉酶活性開始下降。結(jié)果顯示，飼料中動植物蛋白水平的一定配比可以使腸和肝胰臟蛋白酶活性增加。同時，隨著魚粉比例的增加，丁鱥腸淀粉酶與肝胰臟淀粉酶活性亦呈上升趨勢，飼料魚粉比例在60%時（第Ⅳ組）達(dá)到最大（分別為 348.63 U/mg和 443.76 U/mg），但腸淀粉酶活性第Ⅳ組與Ⅲ、Ⅴ組比較差異不顯著（P＞0.05），與Ⅰ、Ⅱ、Ⅵ組比較差異顯著（P ＜ 0.05），第Ⅳ組肝胰臟淀粉酶活性與試驗各組比較差異極顯著（P＜0.01）；在相同魚粉比例條件下，肝胰臟淀粉酶活性高于腸淀粉酶活性，表明適宜的魚粉比例對激活肝胰臟淀粉酶活性具有促進(jìn)分泌的作用。魚粉比例的變化對腸和肝胰臟的脂肪酶活性均無顯著影響，各試驗組之間差異不顯著 （P＞0.05）。

表3 飼料中不同比例的魚粉對丁鱥腸道及肝胰臟消化酶活性的影響U/mg

3 討論

3.1 不同比例的魚粉對丁鱥幼魚生長及飼料利用的影響 韓慶等（2002）研究發(fā)現(xiàn)，隨著動物蛋白含量的增高，黃顙魚增重、蛋白質(zhì)效率也增高，飼料系數(shù)下降，但當(dāng)動物蛋白含量高于67%時，其增重、蛋白質(zhì)效率變化不明顯，飼料系數(shù)反而會略升。中華鱘飼料中動植物蛋白比為1∶1時，幼鱘的生長就能達(dá)到較好的效果，當(dāng)動植物蛋白比達(dá)3∶1時，既能發(fā)揮中華鱘生長迅速的潛力，又可獲得良好的經(jīng)濟(jì)效益（莊平等，2002）。但并非動物蛋白含量越高，魚類生長效果越好 （宋學(xué)宏等，2004）。本試驗結(jié)果表明，隨著魚粉含量從0%上升到60%，試驗魚體增重率、特定生長率也隨之增加，達(dá)60%時效果最佳，且與其他試驗組差異極顯著（P＜0.01），此時飼料系數(shù)最低，蛋白質(zhì)效率最高，這與動物蛋白具有比植物蛋白更豐富的必需氨基酸等因素密切相關(guān) （周凡和邵慶均，2007）。但當(dāng)魚粉含量超過60%后，增重率、特定生長率隨之降低，其原因可能有兩種：一是由于飼料中魚粉比例過高，而作為主要植物蛋白源的豆粕比例較少時，雖然能保證飼料總蛋白含量一致，但因飼料中必需氨基酸比例失調(diào)而降低了魚類對飼料的轉(zhuǎn)換率，使其生長速度減緩；二是由于飼料蛋白全由魚粉提供，或者魚粉含量過高，在加工和貯存過程中致使魚粉中的油脂氧化產(chǎn)生毒性，導(dǎo)致魚類對飼料的利用率降低所致（向梟等，2008）。

3.2 不同比例的魚粉對丁鱥幼魚消化酶活性的影響 大量研究表明，飼料蛋白水平在一定范圍內(nèi)，蛋白酶活性隨蛋白水平的增加而升高 （石英等，2009；錢曦等，2007；黃峰等，2003）。同時，不同的飼料品質(zhì)也將影響魚類的消化酶活性，如鱖魚胃、腸、肝胰臟蛋白酶活性以飼喂動物性餌料增加幅度最大（孫翰昌，2009）。本試驗結(jié)果顯示，隨著飼料中魚粉含量的提高，能顯著提高丁鱥的蛋白酶活性，并在含量為60%時，其蛋白酶活性最高。但隨著飼料中魚粉比例的進(jìn)一步提高，丁鱥腸和肝胰臟的蛋白酶活性反而呈下降趨勢，這與魚粉含量過高，飼料在加工和貯存過程中致使魚粉中的油脂氧化，對魚類產(chǎn)生毒性，導(dǎo)致對消化酶的分泌產(chǎn)生負(fù)反饋調(diào)節(jié)有關(guān)（向梟等，2008）。丁鱥腸的蛋白酶活性比肝胰臟的蛋白酶活性高，這與肝胰臟分泌的無活性胰蛋白酶原，在進(jìn)入腸道后被腸激酶或已有活性的胰蛋白酶所激活有關(guān) （楊蕙萍和童圣英，1998）。

試驗結(jié)果還顯示，隨著魚粉含量從0%～60%增加，腸和肝胰臟的淀粉酶活性逐漸提高。但隨著魚粉比例的進(jìn)一步增加（超過60%），腸和肝胰臟的淀粉酶活性均有所下降，該結(jié)果與其他學(xué)者（李芹和刁曉明，2009；王海英等，2008）的研究具有相似性。分析原因，可能是過高的魚粉用量導(dǎo)致粗纖維含量降低，對腸刺激減弱，從而抑制丁鱥腸和肝胰臟淀粉酶活性。同時，丁鱥肝胰臟的淀粉酶活性比腸高，但兩者相差不大，說明丁鱥腸和肝胰臟的淀粉酶對淀粉的消化能力差別不大，在一定程度上證明了魚類對淀粉的消化是由腸和肝胰臟的淀粉酶共同來完成的（尾崎久雄，1985）。

宋理平等（2010）發(fā)現(xiàn)，魚類的脂肪酶活性與食物組成之間沒有明顯的相關(guān)性。王重剛等（1998）發(fā)現(xiàn)，真鯛幼魚脂肪酶活性與食物中脂肪含量呈負(fù)相關(guān)趨勢。本試驗顯示，不同比例的魚粉對丁鱥脂肪酶活性影響并不顯著（P＞0.05），這與高攀等（2009）和錢曦等（2007）的研究結(jié)果一致。究其原因，與飼料中適宜脂肪水平已能滿足魚類對能量的需要所致。

4 結(jié)論

綜上所述，飼喂不同比例魚粉的飼料可以影響丁鱥的消化酶活性和生長，當(dāng)魚粉含量為60%時，丁鱥腸和肝胰臟蛋白酶和淀粉酶活性最高，增重率、特定生長率、飼料蛋白效率達(dá)到最大，飼料系數(shù)最低。

[1]馮新忠，茍萍，蘇俊，等.額爾齊斯河野生丁鱥營養(yǎng)成分分析[J].食品工業(yè)科技，2008，6：276 ～ 279.

[2]高攀，蔣明，文華，等.不同蛋白能量比飼料對草魚魚種消化酶活性的影響[J].淡水漁業(yè)，2009，39（6）：54 ～ 58.

[3]韓慶，羅玉雙，夏維福.不同飼料蛋白源對黃顙魚生長的影響[J].上海水產(chǎn)大學(xué)學(xué)報，2002，11（3）：259 ～ 263.

[4]黃峰，蘇德學(xué)，田永勝，等.丁鱥的含肉率及其營養(yǎng)價值的分析[J].動物學(xué)雜志，2004，39（1）：76 ～ 79.

[5]黃峰，嚴(yán)安生，張桂蓉，等.不同蛋白含量飼料對南方鲇胃蛋白酶和淀粉酶活性的影響[J].水生生物學(xué)報，2003，27（5）：451 ～ 456.

[6]江仁黨，林建斌，黃種持，等.不同動植物蛋白比飼料對虹鱒生長的影響[J].淡水漁業(yè)，2004，34（3）：41 ～ 43.

[7]李愛杰.水產(chǎn)動物營養(yǎng)與飼料學(xué)[M].北京：中國農(nóng)業(yè)出版社，1996.89～107.

[8]李芹，刁曉明.不同餌料對瓦氏黃顙魚稚魚生長和消化酶活性的影響[J].水生態(tài)學(xué)雜志，2009，2（1）：98 ～ 102.

[9]劉永堅，劉棟輝，田麗霞，等.飼料蛋白質(zhì)和能量水平對紅姑魚生長和魚體組成的影響[J].水產(chǎn)學(xué)報，2002，26（3）：242 ～ 246.

[10]陸陽，楊雨虹，王裕玉，等.不同比例膨化豆粕替代魚粉對虹鱒生長、體成分及血液學(xué)指標(biāo)的影響[J].動物營養(yǎng)學(xué)報，2010，22（1）：221 ～ 227.

[11]錢曦，王桂芹，周洪琪.飼料蛋白水平及豆粕替代魚粉比例對翹嘴紅鲌消化酶活性的影響[J].動物營養(yǎng)學(xué)報，2007，19（2）：182 ～ 187.

[12]上海市醫(yī)學(xué)化驗所.臨床生化檢驗（上冊）[M].上海：上?？萍汲霭嫔?，1979.366～368.

[13]石英，冷向軍，李小勤，等.飼料蛋白水平對血鸚鵡魚種生長、體組成和腸道蛋白消化酶活性的影響[J].水生生物學(xué)報，2009，33（5）：874 ～ 880.

[14]宋理平，韓勃，冒樹泉，等.脂肪水平對厚唇弱棘鯻生長及腸道脂肪酶活性的影響[J].廣東海洋大學(xué)學(xué)報，2010，30（1）：13 ～ 17.

[15]宋學(xué)宏，凌去非，蔡春芳，等.丁鱥的營養(yǎng)素需要量及飼料最適能量蛋白比[J].飼料工業(yè)，2004，25（9）：53 ～ 56.

[16]孫翰昌.不同飼料對鱖生長性能及消化酶活性的影響 [J].中國飼料，2009，24：12 ～ 35.

[17]王愛民，呂富，楊文平，等.飼料脂肪水平對異育銀鯽生長性能、體脂沉積、肌肉成分及消化酶活性的影響[J].動物營養(yǎng)學(xué)報，2010，22（3）：625 ～633.

[18]王海英，孫謐，薛長湖，等.大菱鲆配合飼料中植物蛋白替代魚粉的可行性研究[J].海洋科學(xué)，2008，32（6）：9 ～ 12，34.

[19]王重剛，陳品健，顧勇，等.不同餌料對真鯛稚魚消化酶活性的影響[J].海洋學(xué)報，1998，20（1）：103 ～ 106.

[20]吳尚忠譯（尾崎久雄著）.魚類消化生理（下冊）[M].上海：上?？茖W(xué)技術(shù)出版社，1985.390～398.

[21]向梟，周興華，陳建，等.動植物蛋白比對鯉魚消化酶活性的影響[J].糧食與飼料工業(yè)，2008，7：37 ～ 39.

[22]楊蕙萍，童圣英.國內(nèi)外關(guān)于水產(chǎn)動物消化酶研究的概況[J].大連水產(chǎn)學(xué)院學(xué)報，1998，9（3）：64 ～ 69.

[23]中山大學(xué)生物系.生化技術(shù)導(dǎo)論[M].北京：人民教育出版社，1979.52～54.

[24]周凡，邵慶均.不同蛋白源替代魚粉的研究進(jìn)展[J].飼料研究，2007，6：9～11.

[25]莊平，陳喜斌，曾翠平，等.中華鱘幼鱘飼料中適宜動植物蛋白比的研究[J].動物營養(yǎng)學(xué)報，2002，14（1）：61 ～ 64.

[26]Vacha F，Eva T.Content of polyunsaturated fatty-acids and cholesterol in muscle tissue of tench （Tinca tinca），common carp（Cyprinus carpio）and hybrid of bighead carp （Aristichthys nobilis）with silver carp （Hypophthalmichthys molitrix）[J].Polskie archiwum hydrobiology，1995，42（1 ～ 2）：152 ～ 157.