李大軍 高程程 王 寶 高峻崇
(吉林農(nóng)業(yè)大學(xué),長春,130118) (吉林省森林病蟲防治檢疫總站)
栗山天牛(Mallambyx raddei Blessig)是一種重要的蛀干害蟲,寄生于櫟、蘋果、梨、梅等林木和果樹,現(xiàn)階段主要通過燈光誘捕天牛成蟲來控制。民間早有食用昆蟲的習(xí)慣,天牛營養(yǎng)含量豐富,黃瓊等[1]的研究表明,星天牛(Anoplophora chinensis)和粗鞘雙條杉天牛(Semanotus sinoauster Gressitt)幼蟲蛋白質(zhì)為其鮮質(zhì)量的16%~18%,粗脂肪約為其鮮質(zhì)量的13%,其中不飽和脂肪酸所占比例約為總脂肪的77%。還有研究表明,天牛翼翅富含甲殼素[2-3]。李大軍等[4]的研究表明,栗山天牛成蟲干樣蛋白質(zhì)質(zhì)量分?jǐn)?shù)為46%,甲殼素抽提得率為17%,且含有豐富的游離氨基酸,食用后對(duì)動(dòng)物體具有潛在的生物學(xué)效果。但是《本經(jīng)逢原》記述,天牛:甘,溫,小毒;《中國藥用動(dòng)物志》記述,云斑天牛(Batocera horsfields)可活血祛瘀,鎮(zhèn)肝熄風(fēng),散瘀解毒?,F(xiàn)代對(duì)于天牛食用安全性方面的科學(xué)研究未見報(bào)道。在森林防護(hù)工作中,人工捕獲天牛成蟲需要繁重的人工投入,天?;厥樟看?。如能安全食用或飼用栗山天牛成蟲,對(duì)促進(jìn)林業(yè)害蟲人工防治工作有重要的實(shí)際意義。本研究把天牛處理后飼喂小鼠,分析比較進(jìn)食不同劑量的天牛粉后,小鼠血6種生化指標(biāo)的劑量效應(yīng)反應(yīng)關(guān)系,探討天牛食用的安全性和食藥開發(fā)潛力。
栗山天牛成蟲(吉林永吉林業(yè)站捕獲,冷凍致死,室溫風(fēng)干,研磨成粉,由吉林農(nóng)業(yè)大學(xué)食品科學(xué)與工程學(xué)院實(shí)驗(yàn)室儲(chǔ)備),玉米、豆餅、基礎(chǔ)飼糧為市售,實(shí)驗(yàn)動(dòng)物KM小鼠(吉林農(nóng)業(yè)大學(xué)食品科學(xué)與工程學(xué)院實(shí)驗(yàn)室自繁)。
參照實(shí)驗(yàn)動(dòng)物飼料標(biāo)準(zhǔn)[5],飼糧由基礎(chǔ)飼糧和玉米、豆餅、天牛粉組成,調(diào)整營養(yǎng)水平使其最大程度地保持相近,營養(yǎng)指標(biāo)見表1。KM小鼠飼糧天牛粉加入劑量分別為12.5%、25.0%、50.0%、100.0%,以不加天牛粉為對(duì)照。
表1 小鼠飼糧組成與營養(yǎng)指標(biāo) %
將平均體質(zhì)量為(22.50±1.70)g的60只清潔級(jí)KM小鼠編號(hào)并隨機(jī)分為5組,每組12只,雌雄各半,分別投給5種飼糧。雌、雄分籠飼養(yǎng)于潔凈度10 000級(jí)的SPF環(huán)境中28 d,室溫(23±4)℃,相對(duì)濕度(50±5)%,飲水瓶飲水,每日10 h光照。試驗(yàn)期監(jiān)測體質(zhì)量和進(jìn)食量變化。
試驗(yàn)期末摘除空腹小鼠眼球放血,放入Eppendorf管中,4℃、2 000 r/min、5 min離心分離取血漿,用CB171半自動(dòng)生化分析儀檢測血生化指標(biāo)。
血生化指標(biāo)檢測參照試劑盒標(biāo)明的方法,其中甘油三酯、總膽固醇、血糖水平檢測,采用醌亞胺比色法;白蛋白水平檢測,采用溴甲酚綠比色法;尿素氮、丙氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶、天門冬氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶水平檢測,采用煙酰胺腺嘌呤二核苷酸比色法;堿性磷酸酶水平檢測,采用對(duì)硝基苯酚比色法。
采用SPSS11.0軟件,以LSD法檢驗(yàn)各處理組的血生化指標(biāo)與對(duì)照組的統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。
進(jìn)食天牛粉飼糧小鼠的血生化指標(biāo)如表2所示。與對(duì)照相比,試驗(yàn)結(jié)束時(shí),飼糧為100%天牛粉的小鼠體質(zhì)量顯著降低,血漿總膽固醇、尿素氮水平顯著升高(p<0.05),白蛋白值顯著降低(p<0.05),堿性磷酸酶活性降低(p=0.063);飼糧含50%天牛粉處理的小鼠,其尿素氮、天門冬氨基轉(zhuǎn)移酶活性升高(p<0.05)。
天牛粉具有高蛋白(46.3%)、高脂肪(15.2%)的營養(yǎng)特點(diǎn)。在小鼠飼糧中添加天牛粉的比例越高,蛋白質(zhì)和脂肪水平越高。飼糧天牛粉質(zhì)量分?jǐn)?shù)50%以下時(shí),并沒有引起小鼠血漿甘油三酯、總膽固醇和血糖水平的顯著變化,顯示該劑量的飼糧脂肪水平能夠被小鼠接受。然而,進(jìn)食全天牛粉飼糧小鼠的血漿總膽固醇升高,可直接導(dǎo)致碳水化合物供應(yīng)不足使血糖降低。天牛殼聚糖含量豐富[2],但其對(duì)調(diào)節(jié)血糖水平的影響還需要試驗(yàn)驗(yàn)證。天牛粉比例大于50%,飼糧蛋白質(zhì)水平則大于32%,相比GB 14924.3—2001推薦量20%的蛋白質(zhì)水平[4]已經(jīng)過高,致使小鼠血尿素氮水平顯著升高。反映了蛋白質(zhì)營養(yǎng)過剩,這可能是引起一系列生化指標(biāo)變化的主要原因。高蛋白和高脂肪營養(yǎng)可能使機(jī)體代謝負(fù)擔(dān)加重,代謝平衡發(fā)生變化。由于全天牛粉日糧的蛋白質(zhì)和脂肪水平遠(yuǎn)高于推薦標(biāo)準(zhǔn),導(dǎo)致本試驗(yàn)的全天牛粉日糧組小鼠的肝臟對(duì)過量蛋白質(zhì)、脂肪的代謝負(fù)擔(dān)加重,飼糧理想氨基酸平衡變差,進(jìn)而引起機(jī)體合成白蛋白能力降低,免疫機(jī)能下降。肝、心、腎損傷或藥物作用可通過ALT、AST、ALP等酶指標(biāo)以及BUN、Glu、TCh、Alb 的變化反應(yīng)出來[6-7]。ALT 活性的降低和AST活性的提升,反映糖異生能力的下降和蛋白質(zhì)核酸代謝的活躍。這與飼糧天牛粉比例小于50%的條件下,實(shí)驗(yàn)動(dòng)物血糖水平降低,血漿白蛋白及尿素氮水平的波動(dòng)相關(guān)。ALP主要分布于肝臟、骨骼、腎臟等組織氣器,當(dāng)以上組織器官損傷時(shí),血清ALP可升高[6],極端營養(yǎng)條件下堿性磷酸酶活性的降低反映機(jī)體總體代謝機(jī)能的衰弱。酶學(xué)指標(biāo)變化幅度較小,總體反映出天牛粉不能對(duì)小鼠肝、心和腎產(chǎn)生實(shí)質(zhì)性損傷或毒性。
表2 進(jìn)食天牛粉飼糧小鼠的血生化指標(biāo)
小鼠以天牛粉為單一食物時(shí),高蛋白、高脂肪營養(yǎng)使總代謝氮水平和脂肪過剩導(dǎo)致血尿素氮和血清總膽固醇升高,白蛋白水平降低。碳水化合物供應(yīng)減少致使血糖水平傾向于下降。丙氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶、天門冬氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶、堿性磷酸酶水平?jīng)]有受到進(jìn)食全天牛粉飼糧的影響。小鼠正常進(jìn)食天牛粉比例小于25%的飼糧時(shí),天牛粉對(duì)小鼠生化指標(biāo)無異?;虿焕绊懀伙@示血生化指標(biāo)毒性效應(yīng)。
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