奶牛隱性乳房炎的檢測(cè)及其治療方法

余彥國(guó),張 瑾

(甘肅畜牧工程職業(yè)技術(shù)學(xué)院,甘肅 武威 733006)

奶牛隱性乳房炎的檢測(cè)及其治療方法

余彥國(guó),張 瑾＊

(甘肅畜牧工程職業(yè)技術(shù)學(xué)院,甘肅 武威 733006)

奶牛乳房炎是困擾奶牛養(yǎng)殖業(yè)發(fā)展最嚴(yán)重的疾病之一,特別是隱性乳房炎,臨床癥狀不明顯,不僅導(dǎo)致奶牛產(chǎn)乳量和乳質(zhì)量的降低,還可能傳染給其他奶牛,導(dǎo)致疾病的擴(kuò)散。因此,只有對(duì)乳汁進(jìn)行檢測(cè),通過(guò)其生理、生化等指標(biāo)變化來(lái)判斷乳房炎的發(fā)生情況。為減少該病的發(fā)生、提高乳質(zhì)量,本文總結(jié)了奶牛隱性乳房炎的微生物學(xué)檢驗(yàn)、細(xì)胞學(xué)檢查、酶學(xué)指標(biāo)等檢測(cè)方法以及用乳腫消膏、鹽酸左旋咪唑、消炎增乳散、生物制劑、生殖股神經(jīng)封閉等治療措施。

奶牛;隱性乳房炎;檢測(cè);治療

前言

乳房炎是奶牛常見(jiàn)的頑固性疾病,全世界每年因其造成的經(jīng)濟(jì)損失達(dá)20億美元,平均每頭每年損失約200美元。我國(guó)每年因其造成的損失超過(guò)3億元[1]。美國(guó)國(guó)家乳房炎委員會(huì)根據(jù)乳房和乳汁有無(wú)肉眼可見(jiàn)變化,將奶牛乳房炎分為臨床型和隱性型兩種[2]。據(jù)報(bào)道,臨床型與隱性型發(fā)病之比為1∶15～1∶45[3]。隱性乳房炎是病原從乳頭表面或乳頭管經(jīng)乳池、乳導(dǎo)管入侵乳腺泡引起的[4],其乳腺組織和乳汁無(wú)肉眼可見(jiàn)變化,而乳汁理化性質(zhì)、成分、體細(xì)胞數(shù)及產(chǎn)乳量會(huì)改變。

1 檢測(cè)方法

1.1 乳中病原微生物檢驗(yàn)

奶牛隱性乳房炎由細(xì)菌、真菌、病毒、支原體等非特定病原引起,主要病原有鏈球菌、金黃色葡萄球菌、大腸埃希氏菌(占病原菌的90%)[5]等,有些病原菌雖存在于乳房?jī)?nèi),但不一定致病,因此,病原菌診斷并不可靠,只能根據(jù)病原菌的種類、數(shù)量初步診斷,而且該法成本高,需要時(shí)間長(zhǎng)。

1.2 乳酶檢驗(yàn)

乳中含多種酶,而許多酶在隱性乳房炎的病理過(guò)程中有十分重要的意義,所以乳酶作為奶牛隱形乳房炎的診斷指標(biāo)已成為國(guó)內(nèi)外研究的熱點(diǎn)。

用于奶牛隱性乳房炎檢測(cè)的酶指標(biāo)有:髓過(guò)氧化物酶(MPO)、N-乙?；?β-D-氨基葡萄糖苷酶(NAGase)、乳過(guò)氧化物酶(LP)、過(guò)氧化氫酶(CAT)、脂酶、谷胱甘肽過(guò)氧化物酶(GPx)等[6]。如患隱性乳房炎的奶牛乳汁堿性磷酸酶(ALP)、脂酶等的活性高于健康牛乳[7]。國(guó)外已有商品化的MPO ELISA試劑盒,NAGase是乳腺上皮細(xì)胞破壞的標(biāo)志。但酶活性受溫度、時(shí)間、p H、介質(zhì)中的離子濃度、底物等的影響,決定了酶活性不是很穩(wěn)定的指標(biāo),所以酶活性要成為診斷指標(biāo)還需進(jìn)行大量的研究和探索工作。

1.3 乳汁細(xì)胞學(xué)檢驗(yàn)法

體細(xì)胞數(shù)是奶牛乳房健康狀況的一項(xiàng)重要指標(biāo),也是牛奶質(zhì)量的一項(xiàng)重要指標(biāo),乳中體細(xì)胞由巨噬細(xì)胞、淋巴細(xì)胞、中性粒細(xì)胞、酸性粒細(xì)胞和各種乳腺上皮細(xì)胞等組成,每毫升牛奶中含有這些細(xì)胞的數(shù)量即為體細(xì)胞數(shù)(somatic cellcounts,SCC),其數(shù)量受年齡、胎次、泌乳期、季節(jié)、個(gè)體特征等因素的影響。健康奶牛的體細(xì)胞數(shù)小于105個(gè)/m L,大部分是巨噬細(xì)胞和淋巴細(xì)胞,患乳房炎時(shí),乳汁中的體細(xì)胞數(shù)目增加(尤其白細(xì)胞數(shù)顯著增加),非正常升高的體細(xì)胞數(shù)表明乳腺的炎癥及其嚴(yán)重程度[8]。若體細(xì)胞數(shù)25～30萬(wàn)個(gè),表明乳腺受到感染;超過(guò)50萬(wàn)個(gè),表明已發(fā)生隱性乳房炎;超過(guò)100萬(wàn)個(gè),可能患有臨床型乳房炎[9]。

1.4 乳中體細(xì)胞直接計(jì)數(shù)法

1.4.1 顯微鏡計(jì)數(shù)法 最早的乳中體細(xì)胞直接計(jì)數(shù)法,是鮮乳涂片后,通過(guò)顯微鏡計(jì)數(shù)直接計(jì)算牛奶中SCC,是體細(xì)胞檢測(cè)中的標(biāo)準(zhǔn)方法,常用于校正其他方法的準(zhǔn)確性,但速度較慢。

1.4.2 白細(xì)胞分類計(jì)數(shù)法 白細(xì)胞分類計(jì)數(shù)的刻度管檢驗(yàn)法,是根據(jù)中性粒細(xì)胞占白細(xì)胞總數(shù)的多少來(lái)判定乳房炎的方法。中性粒細(xì)胞占白細(xì)胞總數(shù)的12%～20%定為可疑,20%以上則定為乳房炎[2]。

1.4.3 體細(xì)胞自動(dòng)計(jì)數(shù)儀 用專門的體細(xì)胞自動(dòng)計(jì)數(shù)儀來(lái)檢測(cè)乳中的體細(xì)胞數(shù)。如牛博士系列體細(xì)胞檢測(cè)法,取1滴生奶滴入試紙,再加3滴激活劑,插入檢測(cè)儀就能讀出體細(xì)胞準(zhǔn)確數(shù)據(jù)[9]。丹麥福斯公司出品的Foss Matic 5000系列奶牛體細(xì)胞測(cè)定儀,全自動(dòng)計(jì)算機(jī)操作,每小時(shí)可檢測(cè)樣品200～500個(gè)。Foss Matic 5000的工作原理是讓被染色的體細(xì)胞通過(guò)一個(gè)流路系統(tǒng),此流路非常狹窄,這樣被染色的體細(xì)胞就會(huì)一個(gè)個(gè)的通過(guò),體細(xì)胞的紅色光放大就可被光電倍增器作為光脈沖計(jì)數(shù)出來(lái)。

1.4.4 乳中體細(xì)胞間接計(jì)數(shù)法 乳中體細(xì)胞間接計(jì)數(shù)法原理為:乳汁中的體細(xì)胞在表面活性劑和堿性物質(zhì)的作用下,脂類物質(zhì)乳化,細(xì)胞破裂釋放出DNA,使乳汁產(chǎn)生沉淀或形成凝塊,根據(jù)沉淀或形成凝塊的強(qiáng)弱,間接判定乳汁體細(xì)胞含量。間接體細(xì)胞計(jì)數(shù)國(guó)外常用的為加州乳房炎檢測(cè)法(california mastitis test,CMT),國(guó)內(nèi)有杭州 HMT,蘭州LM T,上海SMT,北京BMT、黑龍江 HM T等。北京農(nóng)業(yè)大學(xué)以洗衣粉為主要成份配制乳房炎簡(jiǎn)易診斷液。東北農(nóng)學(xué)院潘軍等利用十二烷基磺酸鈉加指示劑制成改進(jìn)CMT試液。此類診斷液種類雖多,但其原理相同,主要成分為陰離子表面活性劑。

1.5 乳酸度檢測(cè)法

正常鮮牛乳的pH6.2～6.6。乳房炎病牛乳汁的p H上升,呈堿性,堿性的高低反應(yīng)炎癥的程度。

1.5.1 麝香草酚蘭檢驗(yàn)法(BTB) BTB法有試管法和玻片法兩種,操作簡(jiǎn)單,但檢出率較低,因顏色判斷易出現(xiàn)較大誤差甚至錯(cuò)誤[10],特別是泌乳末期奶牛乳汁易出現(xiàn)假陽(yáng)性。

1.5.2 試紙法 按保存于4℃的乳樣1滴直接滴于精密試紙上,按試紙顏色判定乳樣酸度?，F(xiàn)有奶牛乳房炎試紙和BPB濾紙片。

1.5.3 酸度計(jì)檢驗(yàn)法 酸度計(jì)的基本原理:指示電極(玻璃電極)的電極電位隨溶液中氫離子濃度變化而變化,而參比電極(甘汞電極)電極電位不變,所以將電極插入被測(cè)溶液后電池電動(dòng)勢(shì)即與溶液的p H有關(guān),進(jìn)而測(cè)定其p H。

1.6 乳汁電導(dǎo)率檢查法

該法的技術(shù)依據(jù)是牛血漿與牛奶的滲透壓相等,健康奶牛乳汁滲透壓約75%由氯化鈉和乳糖形成。當(dāng)奶?；既榉垦缀?乳上皮組織細(xì)胞產(chǎn)生乳糖能力下降,乳汁滲透壓降低,使血液成分滲進(jìn)乳汁,特別使乳汁中氯化鈉含量增加,使乳汁電導(dǎo)率升高。方海田等研究表明,牛乳電導(dǎo)率的變化與體細(xì)胞數(shù)呈正相關(guān)[11]。

1.7 乳成分檢驗(yàn)

隱性乳房炎乳的成分發(fā)生變化:例如乳糖含量降低,但乳糖下降程度與炎癥嚴(yán)重性不成正相關(guān)。乳蛋白量增加,其中血清淀粉樣A蛋白(SAA)、結(jié)合珠蛋白(Hp)被認(rèn)為是炎癥反應(yīng)最敏感的指標(biāo),陳國(guó)燦等通過(guò)對(duì)奶樣中SAA和Hp的檢測(cè)證明,健康奶牛乳中幾乎不含或含量很少以至無(wú)法檢測(cè)到,而在43%隱性乳房炎奶牛乳中均可檢測(cè)到SAA和Hp[12]。乳房炎乳的乳脂率顯著低于健康奶牛乳。

另外,還可用苛性鈉凝乳試驗(yàn)、氯化物硝酸銀試驗(yàn)等方法進(jìn)行檢驗(yàn)。

2 治療藥物及其使用方法

2.1 乳腫消膏

乳腫消膏是由黃柏、蒲公英、紫花地丁、三棱、莪術(shù)等10味中藥材制成的復(fù)方膏藥。方法:擠奶后,將乳房洗凈擦干,將藥膏加熱溶化后均勻涂于患病乳區(qū)1～2 mm厚,每個(gè)乳區(qū)約20 g,每?jī)商旖o藥1次,治愈后為鞏固療效再給藥1次。郭斌等臨床試驗(yàn)發(fā)現(xiàn)該藥對(duì)奶牛隱性乳房炎治愈率達(dá)86.54%。

2.2 乳康寧及鹽酸左旋咪唑

李峰等用乳康寧和鹽酸左旋咪唑分別治療隱形乳房炎感染奶牛,方法為:試驗(yàn)1組奶牛拌料飼喂乳康寧,劑量150 g/(d·頭),試驗(yàn)2組拌料飼喂鹽酸左旋咪唑,劑量2.5g/(d·頭),均連喂5 d,結(jié)果:乳康寧對(duì)隱形乳房炎有效率為92.11%,治愈率為52.63%;鹽酸左旋咪唑有效率為58.97%,治愈率為10.25%。

2.3 生殖股神經(jīng)封閉

奶牛站立保定,在患隱性乳房炎乳房一側(cè)3～4腰椎橫突間,距背中線6 cm～7 cm的背最長(zhǎng)肌外緣斜進(jìn)針,注入2%鹽酸普魯卡因溶液20mL。

2.4 消炎增乳散

消炎增乳散主要由蒲公英、金銀花、當(dāng)歸、黃芪、蛇床子、木芙蓉花等十幾味中草藥粉碎而成。王飛等將消炎增乳散拌料喂服,每頭200 g/d,連用3 d,結(jié)果顯示,該藥對(duì)奶牛隱性乳房炎的治愈率為72.2%。

2.5 炎康注射液

炎康注射液主要成分為蟾酥與甘草。用炎康注射液5 m L加生理鹽水20mL稀釋,擠奶后注入陽(yáng)性乳區(qū),2次/d,試驗(yàn)發(fā)現(xiàn)對(duì)奶牛隱性乳房炎療效較好。

2.6 生物制劑

生物制劑具有高效、無(wú)毒、無(wú)殘留等優(yōu)點(diǎn),是治療奶牛乳房炎的理想藥物。如酶制劑,試驗(yàn)發(fā)現(xiàn)其有效率達(dá) 72.6%,溶菌酶有效率為85.60%～95.83%,還有細(xì)菌素、微生態(tài)制劑、乳鐵蛋白和乳鐵素、細(xì)胞因子、疫苗等都有很好的臨床作用,在奶牛乳房炎的防治中具有廣闊的應(yīng)用前景。

2.7 其他藥物

還可用金銀花、知母、連翹、蒲公英、穿心蓮、黃芪等中草藥防治?；蛎繃嵙咸砑幽膛Ｓ觅n力健10～50kg,配合乳房?jī)?nèi)灌注抗生素?；蛴眯√K打粉50 g,每天 2次內(nèi)服,連用6 d;補(bǔ)充維生素E和硒[9]?？股刂委?周慶新等藥敏試驗(yàn)證明奶牛乳房炎病原菌對(duì)頭孢噻吩鈉、諾氟沙星、氨芐西林、羧芐青霉素較敏感。

3 結(jié)束語(yǔ)

奶牛隱性乳房炎發(fā)病率為38%～62%,患病牛產(chǎn)乳量和乳品質(zhì)下降,每頭牛產(chǎn)奶量平均減少約15%,因此,要加強(qiáng)奶牛隱性乳房炎的防治工作,堅(jiān)持預(yù)防為主,防治結(jié)合的方針。其發(fā)病主要因飼養(yǎng)管理不當(dāng),環(huán)境因素不良造成的,還與胎次、泌乳時(shí)間、季節(jié)等有關(guān),所以要注重加強(qiáng)奶牛飼養(yǎng)管理、重視環(huán)境和牛體衛(wèi)生。

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Detection and Treatment of Bovine Subclinical Mastitis

YU Yan-guo,ZHANG Jin＊

(Gansu Polytechnic Co llege of Animal Husbandry&Eng ineering,Wu wei Gansu 733006,China)

Mastitis is one of the mostharmfuldiseases in dairy production,particularly subclinicalmastitis.Its symptom was not obvious and led to a decline in milk production of dairy cow s and low quality of milk.It also may spread to other cow s,leading to the spread of the disease.So through the changes of physiologicaland biochemicalindicators could test the situation of subclinical mastitis by milk testing.In order to reduce the incidence ofsubclinicalmastitis in dairy cow s and to increase their milk production,this paper summarized the detection methods such as microbiological testing,cytology,enzymology and using Ruzhongxiao plaster,Levamisole hydrochloride,Xiao Yan Zeng Ru pow der,biologicalagents,genitofemoralnerve seal treatment measures for bovine subclinical mastitis.

Dairy Cattle;Subclinical Mastitis;Detection;Treatment

S858.237.2+6

A

1001-9111(2011)04-0044-03

2011-03-28

2011-05-02

余彥國(guó)(1980-),男,甘肅天水市人,講師,主要從事畜牧獸醫(yī)教學(xué)研究。

＊通訊作者:張 瑾(1980-),女,甘肅白銀市人,講師,主要從事獸醫(yī)藥理學(xué)教學(xué)研究。