劉偉，李慧敏，王亞娣(通化師范學(xué)院生物系，吉林通化134002)

不同十字花科植物對(duì)十字花科黑腐病病原菌抗病性的研究

劉偉，李慧敏，王亞娣
(通化師范學(xué)院生物系，吉林通化134002)

利用苗期抗病性鑒定方法對(duì)5種十字花科植物的12個(gè)品種進(jìn)行了抗病性鑒定，結(jié)果顯示蘿卜A211、A212、A382和擬南芥對(duì)甘藍(lán)黑腐病抗性較強(qiáng)，其余品種抗性較弱，為植物抗病育種提供一些基礎(chǔ)性材料.還選取了實(shí)驗(yàn)室保存菌株和田間分離菌株進(jìn)行致病力檢測(cè)，發(fā)現(xiàn)兩菌株在不同品種的十字花科植物上致病力差異較大，特別是在大白菜上，致病力差異為極顯著.

十字花科植物;甘藍(lán)黑腐病;致病力檢測(cè);抗病性

十字花科黑腐病(又稱甘藍(lán)黑腐病)是由野油菜黃單胞桿菌野油菜黑腐病致病變種(Xanthomonas campestris pv.campestris)引起的，是一種能使全球范圍內(nèi)所有十字花科植物形成黑腐病的重要病害［1］.1973年，在美國(guó)各地大規(guī)模發(fā)生該病，造成了嚴(yán)重的經(jīng)濟(jì)損失［2］.在我國(guó)，上個(gè)世紀(jì)70年代已有發(fā)生，到80年代普遍流行，北起黑龍江，南至海南均有分布［3］.近年來(lái)，黑腐病的危害日益嚴(yán)重，在全國(guó)范圍內(nèi)均有不同程度的發(fā)生.對(duì)該病的防治措施中，選用抗病育種無(wú)疑是最理想的，所以對(duì)育種所用的材料進(jìn)行抗病性鑒定是很必要的.苗期鑒定主要在室內(nèi)進(jìn)行，需要的空間面積小，培養(yǎng)條件較易控制，且周期短、速度快，并可節(jié)省大量人力物力［4］.本研究選用5種十字花科植物為研究材料，這些材料中有的是育種用材料，有的是主要栽培品種，具有一定的代表性，所以對(duì)其抗病性進(jìn)行鑒定是有必要的.

1 材料與方法

1.1 材料

供試十字花科植物有:蘿卜，A211、A212、A848、A813、A382、A833均由中國(guó)農(nóng)科院蔬菜研究所提供，滿身紅蘿卜;擬南芥，模式植物;油菜，超早油一號(hào);甘藍(lán)，紫甘藍(lán)和甘藍(lán);大白菜，中白83.

供試菌株:十字花科黑腐病病原菌由通化師范學(xué)院生物系保存，定名為菌株A;另外一株田間分離菌株，來(lái)自自然發(fā)病的蘿卜上，經(jīng)鑒定為十字花科黑腐病病原菌，定名為菌株B.

1.2 方法

1.2.1 接種方法

在幼苗4～5片葉時(shí)，利用剪苗法接種，方法為用滅菌的醫(yī)用剪刀沾取接種液，在完全展開的葉片尖端，垂直于主脈的方向剪掉0.5～1cm，每剪一次，沾取1次菌液.接種后避光保濕24h，之后在人工光照的溫室內(nèi)進(jìn)行培養(yǎng).幼苗在生長(zhǎng)期間不能使用任何殺菌劑.

1.2.2 抗性鑒定

接種10天后，以葉片為單位，調(diào)查病害的發(fā)病程度.首先量取葉片病斑長(zhǎng)度，用來(lái)檢測(cè)病原菌的致病力.之后按李永鎬［5］的0～9級(jí)分級(jí)標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行發(fā)病程度調(diào)查，再根據(jù)盧燕等［6］對(duì)病情指數(shù)的計(jì)算方法及抗病性歸類對(duì)病情指數(shù)進(jìn)行計(jì)算.

2 結(jié)果與分析

2.1 不同十字花科植物對(duì)十字花科黑腐病的抗性鑒定

以菌株A為接種菌株，對(duì)5種十字花科植物進(jìn)行苗期人工接種抗病性鑒定.結(jié)果由表1可知，蘿卜A211、A212和A382對(duì)菌株A的病情指數(shù)分別為18.8%、30.4%和23.9%，都表現(xiàn)為抗病;擬南芥對(duì)菌株A的病情指數(shù)為30.0%，也表現(xiàn)了很好的抗性;蘿卜滿身紅、A848、A813、A833、大白菜和紫甘藍(lán)都對(duì)菌株A表現(xiàn)為耐病;而油菜和甘藍(lán)對(duì)菌株A的抗性較差，對(duì)其是感病的.

2.2 不同十字花科黑腐病病原菌致病力的測(cè)定

用兩株十字花科黑腐病菌株侵染不同十字花科植物，進(jìn)行致病力檢測(cè).檢測(cè)結(jié)果如圖1，兩菌株在不同十字花科植物上的致病力有很大差別，對(duì)于多數(shù)品種，菌株B的致病力要比菌株A強(qiáng)，如在滿身紅、油菜、A211、甘藍(lán)、大白菜、擬南芥較為明顯，統(tǒng)計(jì)學(xué)分析顯示差異顯著，特別是在大白菜上，差異極顯著;而在其它幾個(gè)個(gè)品種上，兩菌株的致病力在統(tǒng)計(jì)學(xué)分析上差異不顯著.

表1 不同十字花科植物對(duì)十字花科黑腐病的病情指數(shù)

圖1 不同十字花科黑腐病病原菌對(duì)十字花科植物致病力檢測(cè)結(jié)果

3 結(jié)論與討論

十字花科黑腐病主要通過(guò)傷口和水孔等侵染寄主植物［7］，侵染后在植物質(zhì)外體空間增殖，并沿維管束蔓延，進(jìn)而導(dǎo)致系統(tǒng)侵染，直到植物產(chǎn)生水浸狀的病癥.所以不同的抗病性鑒定方法會(huì)導(dǎo)致寄主的不同反應(yīng)，李永鎬等人研究表明，噴霧法接種與田間成株抗病性表現(xiàn)更為一致［4］，但對(duì)十字花科黑腐病病原菌致病力的檢測(cè)一般采用剪葉法來(lái)進(jìn)行［8］.

對(duì)5種共12個(gè)品種的十字花科植物進(jìn)行了苗期抗性鑒定，發(fā)現(xiàn)蘿卜A211品種對(duì)甘藍(lán)黑腐病的抗性較強(qiáng)，可以做為較好的抗十字花科黑腐病育種材料，其他5個(gè)育種用材料對(duì)黑腐病也有一定抗病力，但效果遠(yuǎn)不如A211，幾個(gè)常見的栽培品種對(duì)十字花科黑腐病的抗性均較弱.還對(duì)兩種十字花科黑腐病病原菌菌株進(jìn)行了致病力檢測(cè)，發(fā)現(xiàn)兩菌株對(duì)同一十字花科植物在苗期致病性強(qiáng)弱存在較大差別.其中在大白菜中白83、油菜、A211及甘藍(lán)上，兩菌株致病力差異極顯著，菌株B的致病力遠(yuǎn)強(qiáng)于菌株A.造成這種致病力差異的原因可能是多方面的，或由于實(shí)驗(yàn)室菌株的長(zhǎng)期傳代培養(yǎng)而使其退化，或由于兩菌株本身基因組差異而造成，值得進(jìn)一步研究和探討.由于條件限制，只選取了5種十字花科植物中的12個(gè)品種進(jìn)行了初步的苗期抗性鑒定工作，而對(duì)更多品種的十字花科植物的抗病性鑒定還有待進(jìn)一步研究.另外，本文也只選用了一株田間分離的十字花科黑腐病菌株，還需對(duì)更多不同地區(qū)來(lái)源的十字花科黑腐病菌株的致病性進(jìn)行分析，才能更好的掌握十字花科黑腐病致病力的分化，更好的為抗病育種服務(wù).

［1］Williams P.H.Inheritance of Resistance in Cabbage to Black Rot［J］.Phytopathology，1972，62:247－252.

［2］Williams P.H.Black rot:a continuing threat to world crucifers［J］.Plant Disease，1980，64:736－742.

［3］李明遠(yuǎn).十字花科蔬菜黑腐病的發(fā)生與防治［J］.當(dāng)代蔬菜，2004(11):36.

［4］翟文慧，等.大白菜黑腐病鑒定的濕度試驗(yàn)及其苗期與成株期抗病性的相關(guān)分析［J］.中國(guó)蔬菜，2010(10):59－63.

［5］李永鎬，徐麗波.甘藍(lán)黑腐病苗期抗病性鑒定方法的研究［J］.東北農(nóng)學(xué)院學(xué)報(bào)，1990，21(2):125－129.

［6］蘆燕，張魯剛，惠麥俠，等.陜西省大白菜主產(chǎn)區(qū)黑腐病菌致病型的研究［J］.西北農(nóng)林科技大學(xué)學(xué)報(bào):自然科學(xué)版，2008(10):132－138.

［7］Büttner D，Bonas U.Getting across－bacterial type IIIeffector proteins on their way to the plant cell［J］.EMBO J.2002，21(20):5313－5322.

［8］Dow JM，Crossman L，F(xiàn)indlay K，He YQ，F(xiàn)eng JX，Tang JL.2003.Bio?lm dispersal in Xanthomonas campestris is controlled by cell－cell signaling and is required for full virulence to plants.Proc.Natl.Acad.Sci.USA 100(19):10995－11000.

(責(zé)任編輯:王宏志)

S432

A

1008－7974(2011)04－0044－02

2011－01－11

劉偉(1980－)，吉林大安人，廣西大學(xué)在讀博士，通化師范學(xué)院生物系教師.