水產(chǎn)品在消毒水作用下產(chǎn)生呋喃西林代謝物的研究

楊 曦，李紅光

(1.廣東恒興集團有限公司質(zhì)量檢測中心，廣東湛江524094;2.湖北省漢川市人民醫(yī)院藥劑科，湖北漢川430016)

水產(chǎn)品在消毒水作用下產(chǎn)生呋喃西林代謝物的研究

楊 曦1，李紅光2

(1.廣東恒興集團有限公司質(zhì)量檢測中心，廣東湛江524094;2.湖北省漢川市人民醫(yī)院藥劑科，湖北漢川430016)

水產(chǎn)品在加工過程中，殘留的消毒水(主要成分為次氯酸鈉)與水產(chǎn)品作用能產(chǎn)生呋喃西林代謝物，其含量與消毒水濃度(含量≤3%)、作用時間和接觸面積成正比。利用液相色譜串聯(lián)質(zhì)譜儀，研究了消毒水濃度、浸泡時間和接觸面積與SEM殘留量的關(guān)系。

水產(chǎn)品，消毒水，次氯酸鈉，呋喃西林代謝物，液相色譜串聯(lián)質(zhì)譜儀(LC－MS/MS)

呋喃西林作為一種抗菌藥物而被廣泛應(yīng)用于水產(chǎn)品中。1995年歐盟禁止在動物飼料中添加呋喃西林等違禁藥物。在動物體內(nèi)，呋喃西林的代謝速度快，因而只能通過檢測其代謝產(chǎn)物SEM(見圖1)來推斷呋喃西林的殘留量。近些年來，在水產(chǎn)品加工生產(chǎn)過程中，往往出現(xiàn)原料合格，但經(jīng)加工生產(chǎn)后，部分產(chǎn)品含SEM的現(xiàn)象。K.Hoenicke［1］研究發(fā)現(xiàn)，水產(chǎn)品生產(chǎn)加工過程中所用的消毒水與水產(chǎn)品作用后可能會產(chǎn)生SEM。本文研究了消毒水濃度、浸泡時間與SEM殘留量的關(guān)系。

圖1 呋喃西林及其相應(yīng)代謝物的化學(xué)結(jié)構(gòu)

1 材料與方法

1.1 材料與儀器

呋喃西林代謝物標(biāo)準(zhǔn)品 Sigma公司，純度≥99%;鄰硝基苯甲醛 Alfa Aesar公司，純度≥98%;甲酸 天津市科密歐化學(xué)試劑有限公司，優(yōu)級純;正己烷 Merck公司，色譜級;乙酸乙酯Honeywell公司，色譜級;二甲基亞砜 Sigma公司，純度≥99.5%;乙腈 Fisher Scientific公司，色譜級;消毒水 湛江綺夢日化有限公司，純度12%。

API 3200液相色譜－質(zhì)譜聯(lián)用儀 配有電噴霧離子源(ESI)及Analyst software1.4數(shù)據(jù)處理系統(tǒng)，美國Applied Biosystems公司。

1.2 實驗方法

試樣中殘留的呋喃西林在酸性條件下用鄰硝基苯甲醛衍生化，用乙酸乙酯提取。電噴霧離子化，液相色譜－串聯(lián)質(zhì)譜檢測，用外標(biāo)法定量。

1.2.1 實驗條件

1.2.1.1 色譜條件 色譜柱:Luna C18，150×2.00mm，5μm，美國phenomenex公司;流動相A(水+0.1%甲酸)－流動相 B(乙腈);梯度 洗脫 0～6min，80%A～10%A;6～10min，10%A;10～11min，10%A～80%A;11～18min，80%A;流速:0.2mL·min－1。

1.2.1.2 質(zhì)譜條件 離子化模式為+ESI，質(zhì)譜分辨率為單位分辨率，檢測方式為MRM，定性離子對為209.1/192.2、209.1/166.1，定 量 離 子 對 為 209.1/192.2，定量方式:外標(biāo)法定量。

表1 消毒水濃度與SEM殘留量的關(guān)系

表2 消毒時間與SEM殘留量的關(guān)系

表3 消毒水接觸面積的影響

2 結(jié)果與討論

2.1 消毒水濃度與SEM殘留量的關(guān)系

分別采用濃度為0、0.05%、0.1%、0.2%、0.5%、1%、3%(含量超過3%后水產(chǎn)品表面顏色變黃，實際生產(chǎn)過程中所使用濃度小于3%)的消毒水浸泡羅非魚片和蝦仁，時間為2h。取出后在自來水中漂洗，30s內(nèi)取出，放入PE袋，－18℃保存，第2d進行測定，結(jié)果見表1。

2.2 浸泡時間與SEM殘留量的關(guān)系

采用濃度為0.2%消毒水浸泡羅非魚片和蝦仁，時間逐漸增加，取出后在自來水中漂洗，30s內(nèi)取出，放入PE袋，－18℃保存，第2d進行測定，結(jié)果見表2

由表1和表2可知，經(jīng)過消毒水處理后，陰性樣品(南美白蝦、羅非魚片)產(chǎn)生了SEM，在消毒水含量從0增加到3%時，隨著消毒水濃度和浸泡時間的增大，SEM的殘留量也增大［1］。其原因為:

a.水產(chǎn)品(南美白蝦、羅非魚片)經(jīng)消毒水處理后會分解出游離的氨基酸，一部分氨基酸(精氨酸、組氨酸、瓜氨酸等)自身能分解產(chǎn)生SEM;

b.氨基酸進一步代謝產(chǎn)生尿素和氨，氨與次氯酸鈉作用產(chǎn)生氯胺，氯胺與尿素在一定條件下能產(chǎn)生SEM;

c.氯胺與氨還能作用生成聯(lián)氨，同時帶酰胺基團物質(zhì)與次氯酸鈉作用能生成異氰酸鹽，聯(lián)胺與異氰酸鹽反應(yīng)也能產(chǎn)生SEM。

但若繼續(xù)增大消毒水含量后，樣品表面顏色開始變黃，同時產(chǎn)生大量氣體，嚴(yán)重影響外觀，所以一般水產(chǎn)品加工企業(yè)所用于消毒處理的含量都不會超過3%。

2.3 水產(chǎn)品接觸消毒水面積與SEM殘留量的關(guān)系

將大小大致相同的羅非魚片分成兩部分，剪成塊狀后的羅非魚(面積大約3cm×2cm)與羅非魚片(面積大約15cm×8cm)用消毒水在相同條件下(濃度0.2%，時間2h)浸泡，取出后在自來水中漂洗，30s內(nèi)取出，放入PE袋，－18℃保存。第2d進行測定，結(jié)果見表3。

由表3可知，剪成塊狀后的羅非魚與羅非魚片用消毒水在相同條件下(濃度0.2%，時間2h)處理后產(chǎn)生的SEM含量高于自身，可能原因為大小大致相同的羅非魚片剪成塊狀后，增大了與次氯酸鈉接觸的表面積，化學(xué)反應(yīng)進行得更充分，產(chǎn)生SEM的濃度也就越大。

3 結(jié)論

在水產(chǎn)品加工過程中，往往會用到消毒水。當(dāng)殘留消毒水引入到水產(chǎn)品后就會產(chǎn)生SEM。其含量與消毒水濃度(含量≤3%)、作用時間和接觸面積成正比。因此，清洗過程一定要注意盡可能清除殘留的消毒水。

［1］K Hoenicke，R Gatermann，L Hartig，et al.Formation of semicarbazide(SEM)in food by hypochlorite treatment:is SEM a specific marker for nitrofurazone abuse［J］.Food Additives and Contaminants，2004，21(6):526－537.

Study on formation of semicarbazide(SEM)in aquatic products by hypochlorite treatment

YANG Xi1，LI Hong－guang2
(1.Guangdong Evergreen Group Co.，Ltd.，Quality Inspection Center，Zhanjiang 524094，China;2.Pharmacy of Hanchuan City People’s Hospital，Hanchuan 430016，China)

In the process of manufactured，residual disinfectant(hypochlorite)can react with the aquatics and produce SEM.The content of SEM was in direct proportion to the concentration of disinfectant(≤3%)or time of reaction and immersion area with disinfectant.The relation of concentration，time and immersion area and content was analyzed by liquid chromatography tandem mass spectrometry(HPLC－MS/MS).

aquatics;disinfectant;hypochlorite;SEM;liquid chromatography tandem mass spectrometry(LC－MS/MS)

TS254.1

A

1002－0306(2011)04－0158－02

2010－03－15

楊曦(1980－)，男，碩士研究生，研究方向:分析化學(xué)，食品安全。