野生成年樹鼩主要臟器重量及臟器系數(shù)的測定分析

葉尤松，罕園園，黃璋瓊，陸彩霞，江勤芳，孫曉梅，代解杰

(中國醫(yī)學(xué)科學(xué)院/北京協(xié)和醫(yī)學(xué)院 醫(yī)學(xué)生物學(xué)研究所，昆明 650118)

野生成年樹鼩主要臟器重量及臟器系數(shù)的測定分析

葉尤松，罕園園，黃璋瓊，陸彩霞，江勤芳，孫曉梅，代解杰

(中國醫(yī)學(xué)科學(xué)院/北京協(xié)和醫(yī)學(xué)院 醫(yī)學(xué)生物學(xué)研究所，昆明 650118)

目的 對野生成年樹鼩的體重和主要臟器重量進行測定，計算其臟器系數(shù)。方法 測定60只野生成年樹鼩體重及11個主要臟器重量，并計算其臟器系數(shù)。進行臟器重量、臟器系數(shù)的性別間比較分析及Kendall和諧系數(shù)分析。結(jié)果 性別間比較心、肺重量差異極顯著(P＜0.01)，腦、腎上腺、胰腺重量之間差異顯著 (P＜0.05);腎上腺、胰腺系數(shù)差異有極顯著性(P＜0.01)，心、肺、腎系數(shù)之間差異均達到了顯著水平(P＜0.05)。Kendall和諧系數(shù)(W)分析表明，動物與其個體各主要器官整體發(fā)育協(xié)調(diào)性較好。結(jié)論 野生成年樹鼩心重量、肺重量、腦重量、腎上腺重量、胰腺重量、腎上腺系數(shù)、胰腺系數(shù)、心系數(shù)、肺系數(shù)、腎系數(shù)性別間存在差異。

野生成年樹鼩;臟器重量;臟器系數(shù)

樹鼩(Tupaia belangeri，Tree shew)的主要臟器重量和臟器系數(shù)是其主要的生物學(xué)特性指標之一，在動物實驗中是了解其健康狀況的主要依據(jù);同時對樹鼩種屬標準化鑒定有一定意義。樹鼩屬哺乳綱，有胎盤類，攀鼩目［1］，我國的樹鼩現(xiàn)存僅 1屬，1種(中緬樹鼩Tupaia belangeri)，6個亞種(滇西亞種T.b.chinensis、滇南亞種 T.b.yunnalis、高黎貢山亞種 T.b.gaoligongensis、瑤山亞種 T.b.yaoshanensis、海南亞種 T.b.modesta、越北亞種 T.b.tonquinia)，分別產(chǎn)于云南、海南島、廣西和貴州，其中以云南分布最為豐富。樹鼩由于體形小、容易飼養(yǎng)、成本低，以及新陳代謝和大體解剖比嚙齒類動物更接近人類等優(yōu)點，目前已廣泛應(yīng)用于生物醫(yī)學(xué)研究中而受到重視。但是樹鼩的實驗動物標準化仍處在研究階段，而且大多實驗用樹鼩均從野外抓捕，有關(guān)樹鼩生物學(xué)特性方面的研究鮮有報道。因此，建立野生成年樹鼩臟器重量、臟器系數(shù)正常參考值，為人工飼養(yǎng)繁殖和實現(xiàn)樹鼩實驗動物標準化研究，及其在生物醫(yī)學(xué)研究中的應(yīng)用提供基礎(chǔ)數(shù)據(jù)有一定的現(xiàn)實意義。

1 材料和方法

1.1 動物來源

2009年10月野外捕捉于昆明市近郊青龍峽鎮(zhèn)，野生成年樹鼩(滇西亞種)60只，雄性25只，雌性35只。

1.2 儀器及測定方法

電子天平：(Mettler Toledo PL2002-IC，d=0.01 g和 Acculab ALC-210，d=0.1 mg)和常規(guī)手術(shù)器械。

標準：參照賀爭鳴等［2］編著的《嚙齒類實驗動物生物學(xué)特性數(shù)據(jù)測定技術(shù)規(guī)程》。野外捕捉后，禁食12 h將樹鼩采用斷髓法處死，解剖依次取出脾臟、肝臟、胃、腸、腎上腺、腎臟、子宮/睪丸、肺臟、心臟、腦，將周圍脂肪、結(jié)締組織除盡，并用濾紙吸干臟器表面的血液和體液，腔性器官除去腔內(nèi)液體和內(nèi)容物后迅速稱重［2］，計算臟器系數(shù)(臟器系數(shù) =100×臟器重量/體重)。

1.3 統(tǒng)計學(xué)方法

所得數(shù)據(jù)用SPSS17.0軟件進行統(tǒng)計分析，數(shù)據(jù)用(ˉx±s)表示，進行t檢驗及Kendall和諧系數(shù)分析。

2 結(jié)果

2.1 體重與臟器重量

野生成年樹鼩體重雄性大于雌性，但差異不明顯(P ＞0.05);臟器重量雄性樹鼩心、肺(P ＜0.01)和腦重量(P ＜0.05)大于雌性，肝、脾雄性略大于雌性，但差異不明顯(P ＞0.05)：腎上腺、胰腺雄性小于雌性(P ＜0.05)，胃、腎、腸雄性略小于雌性，但差異不明顯(P ＞0.05)，見表1。

2.2 臟器系數(shù)

臟器系數(shù)雄性心、肺系數(shù)大于雌性 (P ＜0.05)，脾系數(shù)雄性略大于雌性，但無統(tǒng)計學(xué)意義(P＞0.05);腎上腺、胰腺系數(shù) (P ＜0.01)和腎系數(shù)(P ＜0.05)雄性小于雌性，肝、腦、胃、腸系數(shù)雄性略小于雌性，但無統(tǒng)計學(xué)意義(P ＞0.05)，見表2。

2.3 Kendall和諧系數(shù)

Kendall和諧系數(shù)(W)，是分析動物及動物群體主要器官發(fā)育一致性的統(tǒng)計學(xué)指標。和諧系數(shù)(W)一般以0～1來表示。W值接近1時，其主要器官整體發(fā)育協(xié)調(diào)性好，反之就差。本實驗結(jié)果為：W=0.960P=0.000。

表1 野生成年樹鼩體重與臟器重量的測定結(jié)果Tab.1 Measurement of body and organ weights of the wild adult tree shrews

表2 野生成年樹鼩臟器系數(shù)的測定結(jié)果Tab.2 Determination of organ coefficients in the wild adult tree shrews

3 討論

實驗動物的臟器重量和臟器系數(shù)是其主要的生物學(xué)特性之一，是動物健康與否的重要指標和鑒定動物遺傳品質(zhì)的重要依據(jù)。在生物醫(yī)學(xué)研究中還可用來衡量和反映動物的功能狀態(tài)，同時也是動物實驗中常用的重要基礎(chǔ)數(shù)據(jù)［3，4］。由于樹鼩實驗動物化仍處于研究階段，對其臟器重量、臟器系數(shù)相關(guān)報道亦相對少［5］;另外，我國雖有不少單位開展了樹鼩的人工馴養(yǎng)繁殖工作，但因馴繁規(guī)模小，其數(shù)量遠不能滿足實驗研究的需要。各實驗室用的樹鼩幾乎全都來自野外捕捉，其中主要來自云南的滇西亞種［6，7］。本研究結(jié)果補充了樹鼩生物學(xué)特性之一解剖數(shù)據(jù)的相關(guān)資料，在一定程度上為樹鼩實驗動物化研究提供基礎(chǔ)數(shù)據(jù)。國內(nèi)外對大小鼠和豚鼠等臟器重量及臟器系數(shù)測定報道中，均表明性別對臟器系數(shù)影響較?。?-10］;本研究結(jié)果則顯示野生成年樹鼩部分臟器重量及臟器系數(shù)因性別不同而有所不同，比如雄性樹鼩心、肺臟器重量和臟器系數(shù)均明顯高于雌性的同種臟器重量和臟器系數(shù)(P＜0.01和P ＜0.05)。而雌性樹鼩腎上腺、胰腺重量和臟器系數(shù)均明顯高于雄性的同種臟器重量和臟器系數(shù)(P ＜0.05和P ＜0.01)。大多結(jié)果顯示臟器重量與臟器系數(shù)有一致性，有的則顯示臟器重量和臟器系數(shù)的結(jié)果相反，比如腦絕對重量雄性大于雌性(P＜0.05)，而其系數(shù)雄性略小于雌性(P＞0.05)。肝重量雄性大于雌性(P ＞0.05)，而其系數(shù)雄性略小于雌性(P ＞0.05)，但是差異均不達到顯著。這種內(nèi)臟重占的比例較大，且變異系數(shù)較小，可能與淤血程度、結(jié)締組織等的分離情況有關(guān)。樹鼩體重及其它臟器的重量和系數(shù)差別都不明顯，就不再贅述。

導(dǎo)致性別間存在這些差異的可能原因有：①由于樹鼩遺傳特征和進化不同于其它動物而具有獨特的生物學(xué)特性有緊密關(guān)系。②本研究中動物數(shù)量有限，可能存在的偏差尚不能完全消除。③由于野生樹鼩尚無法準確判定其年齡，本研究中的樹鼩均為成年所涵蓋年齡范圍較大，年齡間的差異不能完全消除。④野生樹鼩可能存在一些潛在感染和自發(fā)性疾病，在一定程度上影響了測定的數(shù)據(jù)。⑤所有樹鼩不一定同時捕獲，導(dǎo)致禁食時間不一致從而影響測定數(shù)據(jù)。其中值得一提的是第一點有待我們做進一步研究探討。

上述問題的存在，干擾了通過臟器重量及系數(shù)對藥物毒性的科學(xué)評價，也是補充實驗資料的常見原因。這些提示我們在樹鼩實驗動物化的相關(guān)研究過程中，要進一步深入探討其生物學(xué)參數(shù)，在制定實驗動物臟器重量及臟器系數(shù)正常值參考范圍時，必須全面和綜合考慮各種可能的影響因素并加以標準化，才能得到較為可靠的結(jié)果。同時提示在實驗應(yīng)用中雌雄樹鼩應(yīng)分別統(tǒng)計、比較。

Kendall和諧系數(shù)(W)分析表明，該批野生成年樹鼩生長良好，各器官生長發(fā)育協(xié)調(diào)一致性很好，野外生存環(huán)境相對穩(wěn)定。本研究結(jié)果與何保麗等［5］的研究結(jié)果有相同之處，都同時表明雌、雄樹鼩心、腦的重量差異極顯著(P ＜0.01)，且雄性明顯大于雌性，而肺重量、心系數(shù)、肺系數(shù)(P ＜0.05，雄性明顯大于雌性)、腎系數(shù)(P ＜0.05，雄性明顯小于雌性)與他們的報道有差異，他們的研究結(jié)果與之相反。造成這些差異可能的原因有：①樹鼩的營養(yǎng)狀況。抓捕季節(jié)和地點的不同，以及是否經(jīng)過人工馴養(yǎng)，所得數(shù)據(jù)會產(chǎn)生差異;我們選擇的研究對象是秋末從野外捕捉的成年樹鼩，沒有人工馴化的過程，此時樹鼩能獲得豐富的食物，營養(yǎng)狀況和生長良好與和諧系數(shù)分析結(jié)果一致;而且，捕捉后禁食12 h一次性處死獲得數(shù)據(jù)。②測定方法參考標準不同。我們參照的是《嚙齒類實驗動物生物學(xué)特性數(shù)據(jù)測定技術(shù)規(guī)程》，所取出臟器未用蒸餾水清洗。③動物數(shù)量差異。動物數(shù)量太少可能存在的偏差不能完全消除，何保麗等［5］共檢測了27只樹鼩，與本次的檢測數(shù)量(60只)有明顯的區(qū)別。④臟器的淤血程度、結(jié)締組織等的分離情況不同，也會導(dǎo)致結(jié)果出現(xiàn)差異。以上原因提示我們，隨著樹鼩實驗動物相關(guān)研究的不斷拓展，有關(guān)樹鼩基礎(chǔ)實驗數(shù)據(jù)的研究也將不斷深入，因此研究統(tǒng)一的參考標準有重要意義。有關(guān)人工飼養(yǎng)繁殖成年樹鼩的主要臟器重量和臟器系數(shù)的測定有待進一步研究。

致謝：本文撰寫過程中得到了賀爭鳴研究員的大力幫助，謹此致謝!

［1］ 彭燕章，葉智彰，鄒如金，等.樹鼩生物學(xué)［M］.昆明：云南科技出版社，1991：1-4.

［2］ 賀爭鳴.嚙齒類實驗動物生物學(xué)特性數(shù)據(jù)測定技術(shù)規(guī)程［M］.北京：中國標準出版社.2006：53-54.

［3］ 惲?xí)r鋒，胡玉紅，田小蕓，等.不同品種實驗兔主要臟器重量及臟器系數(shù)的研究［J］.中國比較醫(yī)學(xué)雜志，2004，14(6);350-354.

［4］ 施新猷，主編.現(xiàn)代醫(yī)學(xué)實驗動物學(xué)［M］.北京：人民軍醫(yī)出版社，2000：30-34.

［5］ 何保麗，劉汝文，陳麗玲，等.樹鼩臟器系數(shù)的測定及臟器重量與體重相關(guān)性的探討［J］.實驗動物科學(xué)，2008，25(5)：17-18.

［6］ 于永梅，吳一遷，羅海濤，等.中緬樹鼩的實驗室馴化［J］.上海交通大學(xué)學(xué)報(農(nóng)業(yè)科學(xué)報)，2002，(增刊)：24-27.

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Measurement and Analysis of the Weight and Coefficients of Major Organs in Wild Adult Tree Shrews

YE You-song，HAN Yuan-yuan，HUANG Zhang-qiong，LU Cai-xia，JIANG Qin-fang，SUN Xiao-mei，DAI Jie-jie
(Institute of Medical Biology，Chinese Academy of Medical Science and Peking Union Medical College，Kunming 650118，China)

Objective To measure the body weight and weight of major organs in wild adult tree shrews，and calculate the organ coefficient.Methods Sixty wild adult tree shrews(35 male and 25 female)were chosen，and the body weight and the weight of 11 organs were determined，then the organ coefficients were calculated.Finally the data were statistically analyzed.Results Between female and male tree shrews，the heart and lung weights showed a very significant difference(P＜0.01)and the difference of weight of brain，adrenal gland and pancreas was significant(P＜0.05)，the coefficient of the adrenal and pancreas had very significant difference(P ＜ 0.01)and the difference of heart，lung and kidney was significant(P＜0.05).The growth of major organs of animal community was in a good harmony determined through the analysis of Kendall coefficients.Conclusions Significant sex differences exist in the weights of heart，lung，brain，adrenal gland，pancreas，and coefficients of adrenal gland，pancreas，heart，lung，kidney between female and male wild adult tree shrews.

Wild adult tree shrews;Weight of organs;Organ coefficient;Sex difference

R33

A

1671-7856(2011)04-0062-04

2010-09-29

10.3969/j.issn.1671-7856.2011.04.014

國家科技支撐計劃項目 (No.2009BAI83B02);863計劃(2006AA02A228);云南省科技基礎(chǔ)條件平臺建設(shè)計劃項目(2006PT07-2)。

葉尤松(1974-)，男，主管技師，研究方向：實驗動物獸醫(yī)學(xué)。E-mail：yys@imbcams.com.cn。

代解杰，男，研究員，E-mail：lzldjj@gmail.com。