條斑紫菜藻紅蛋白提取工藝的研究

何思佳，王洪新，2，*，王遠(yuǎn)輝

(1.江南大學(xué)食品學(xué)院，江蘇無錫 214122; 2.食品科學(xué)與技術(shù)國(guó)家重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，江蘇無錫 214122)

條斑紫菜藻紅蛋白提取工藝的研究

何思佳1，王洪新1，2，*，王遠(yuǎn)輝1

(1.江南大學(xué)食品學(xué)院，江蘇無錫 214122; 2.食品科學(xué)與技術(shù)國(guó)家重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，江蘇無錫 214122)

比較了不同提取方法:水溶法、凍融法、組織研磨法、機(jī)械攪拌法、超聲波輔助法對(duì)條斑紫菜藻紅蛋白提取效果的影響。首次將超微粉碎與超聲波輔助提取法結(jié)合提取藻紅蛋白，以條斑紫菜中藻紅蛋白的得率和純度為指標(biāo)，并優(yōu)化得到最佳的工藝條件:超聲波功率為500W，時(shí)間為5min，料液比為1∶50，提取3次，操作參數(shù)超聲時(shí)間為3s，間隙為3s。在此條件下藻紅蛋白得率為45.73mg/g，純度為0.368，提取率為90.2%，該方法大大提高了得率并縮短操作時(shí)間，同時(shí)熒光特性分析驗(yàn)證此方法獲得的藻紅蛋白具有較高的活性。

條斑紫菜，藻紅蛋白，超微粉碎，超聲波，熒光特性

藻紅蛋白(phycoerythrin，PE)在條斑紫菜中含量較高，可達(dá)干重的2.43%。藻紅蛋白目前主要運(yùn)用于免疫熒光檢測(cè)，藻紅蛋白及其探針售價(jià)高達(dá)50～120美元/mg。研究表明藻紅蛋白還具有降血糖、抗腫瘤、抗氧化、抗衰老、抗炎、抗病毒及增強(qiáng)免疫力等作用，但研究有待進(jìn)一步深入［1－5］。條斑紫菜中藻紅蛋白的提取方法很多，由于其具有生物活性，故大多采用溫和的水溶液浸提法保證性質(zhì)和純度。藻紅蛋白屬于胞內(nèi)蛋白，并且具有韌性細(xì)胞壁結(jié)構(gòu)，許多現(xiàn)采用的提取方法提取率較低(如水溶脹法)、處理時(shí)間長(zhǎng)、提取不完全，造成了資源的浪費(fèi);實(shí)驗(yàn)操作重復(fù)性差(如研磨法)，不能獲得穩(wěn)定均一的提取效率。脈沖超聲波得率較高，但已有報(bào)道中處理時(shí)間較長(zhǎng)，肖海芳［6］等使用脈沖超聲波輔助水提取85min，得到藻紅蛋白的得率為3.249%，純度為0. 365;朱曉君［7］等使用上述方法提取時(shí)間為60min，藻膽蛋白得率為1.2%，藻紅蛋白純度為0.356。超微粉碎是20世紀(jì)80年代迅速發(fā)展起來的一項(xiàng)高新技術(shù)，能夠在較短的時(shí)間內(nèi)將大塊物料直接粉碎成為粒度均勻的超微粉體，形成超微粉體后比表面積增大，具有良好的溶解性、分散性、吸附性、化學(xué)反應(yīng)活性等［8］。目前使用超微粉碎處理?xiàng)l斑紫菜干粉進(jìn)行藻紅蛋白提取還未見報(bào)道。研究選用超微粉碎與超聲輔助提取相結(jié)合的方法提取條斑紫菜藻紅蛋白，以期獲得更高的得率及更穩(wěn)定的實(shí)驗(yàn)結(jié)果。藻紅蛋白的熒光性是衡量藻紅蛋白活性的重要指標(biāo)，本文通過熒光性考察超聲波對(duì)藻紅蛋白提取的效果。

1 材料與方法

1.1 材料與儀器

干條斑紫菜 南通，由南通新浪有限公司提供。

HT－500多功能超微粉碎機(jī) 鄭州華通機(jī)械廠; JYD－900L超聲波細(xì)胞破碎儀 上海安亭科學(xué)儀器廠;UV2000紫外可見分光光度計(jì) 上海尤尼柯儀器有限公司;F－7000熒光分光光度計(jì) 日本日立公司;JA103電子天平 上海精科天平廠;5804R臺(tái)式高速冷凍離心機(jī) 德國(guó)eppendorf;DL－5低速大容量離心機(jī) 上海之信儀器有限公司

1.2 實(shí)驗(yàn)方法

1.2.1 原料預(yù)處理 紫菜干粉為干條斑紫菜磨碎過60目(100目)篩，超微粉為干紫菜經(jīng)超微粉碎后過200目篩，密封避光，儲(chǔ)存于4℃干燥環(huán)境內(nèi)。

1.2.2 測(cè)定方法 藻紅蛋白純度的計(jì)算根據(jù)參考文獻(xiàn)［7］。提取紫菜藻紅蛋白上清液，記錄藻紅蛋白在可見光區(qū)的最大吸收值 OD565nm與總蛋白質(zhì)的吸收值OD280nm，用其比值即OD565nm/OD280nm來表示純度。

藻紅蛋白得率計(jì)算方法按參考文獻(xiàn)［8］。已知1%的R－藻紅蛋白(經(jīng)熒光特性分析，所得提取物為R－藻紅蛋白，見2.4)在565nm處的吸光值為8.150，光程長(zhǎng)度為 1cm。因此根據(jù)郎伯－比耳定律，由565nm處的吸光度可以計(jì)算出藻紅蛋白的濃度，再乘以稀釋倍數(shù)及體積，除以紫菜的干重，即可計(jì)算出得率。

朗伯－比爾定律數(shù)學(xué)表達(dá)式∶

式中∶A為吸光度;T為透射比，是透射光強(qiáng)度比上入射光強(qiáng)度;c為藻紅蛋白的濃度(mg/mL);b為吸收層厚度(cm);K為藻紅蛋白在λ=565nm處的吸光系數(shù)8.15mL/mg·cm。

式中∶v為初提液體積(mL);n為稀釋倍數(shù); M為紫菜質(zhì)量(g)。

1.2.3 提取方法

1.2.3.1 條斑紫菜中藻紅蛋白總含量的測(cè)定方法采用減量法分別準(zhǔn)確稱取條斑紫菜干粉0.200g，轉(zhuǎn)移到5支干凈的預(yù)冷的10mL勻漿器中，分別加入4mL預(yù)冷蒸餾水進(jìn)行勻漿0.5、1、1.5、2、2.5h，并把提取液及渣全部轉(zhuǎn)入至10mL離心管中，用6mL蒸餾水分兩次清洗勻漿器，也轉(zhuǎn)入離心管中，在4℃以10000r/min冷凍離心10min。分離出上清液分別轉(zhuǎn)入對(duì)應(yīng)比色管中。取4mL蒸餾水對(duì)沉淀再次進(jìn)行勻漿，時(shí)間為0.5h，重復(fù)上述步驟反復(fù)勻漿兩次，合并各提取液到對(duì)應(yīng)比色管，混勻后分別在565、280nm測(cè)定吸光度值，計(jì)算藻紅蛋白得率與純度。比較不同勻漿時(shí)間長(zhǎng)短對(duì)藻紅蛋白提取量的影響，勻漿過程全部在冰浴中進(jìn)行。重復(fù)操作5次以上，誤差小于5mg/g，實(shí)驗(yàn)結(jié)果取平均值。

1.2.3.2 水溶法 4g條斑紫菜干粉加入200mL預(yù)冷蒸餾水(料液比1∶50)或同體積pH6.8的0.05mol/L磷酸鹽(磷酸二氫鉀－氫氧化鈉)緩沖液，攪拌均勻后放置于4℃避光冷藏條件下溶脹1～6d，4000r/min離心20min，棄去沉淀，得藻紅蛋白初提液，測(cè)定565、280nm吸光度值，計(jì)算藻紅蛋白得率與純度。

1.2.3.3 反復(fù)凍融法 4g條斑紫菜干粉加入200mL預(yù)冷蒸餾水，攪拌均勻在－20℃冰凍2h，再在4℃溶解，反復(fù)凍溶5次，后續(xù)處理方法同1.2.3.2。

1.2.3.4 組織研磨法 4g條斑紫菜干粉放入研缽中，加入100mL預(yù)冷蒸餾水研磨5min，小心傾出上清液，4000r/min×20min離心，沉淀再加100mL蒸餾水研磨(5min)，后續(xù)處理方法同1.2.3.2。

1.2.3.5 液氮預(yù)處理研磨法 4g條斑紫菜干粉放入研缽中，加入少量液氮凍住藻體，再加入100mL蒸餾水對(duì)凍后藻體進(jìn)行研磨處理10min，小心傾出上清液，后續(xù)處理方法同1.2.3.2。

1.2.3.6 機(jī)械攪拌法 4g條斑紫菜干粉加入200mL預(yù)冷蒸餾水，經(jīng)攪拌機(jī)處理10min，后續(xù)處理方法同1.2.3.2。

1.2.3.7 超聲波輔助提取法 4g條斑紫菜干粉加入200mL預(yù)冷蒸餾水，在冰浴條件經(jīng)超聲波細(xì)胞破碎儀處理 10min，功率為 200W，后續(xù)處理方法同1.2.3.2。

1.2.3.8 超微粉碎與超聲波輔助結(jié)合提取法 4g條斑紫菜超微粉在不同的提取次數(shù)、超聲功率、超聲時(shí)間、料液比因素下進(jìn)行單因素實(shí)驗(yàn)，獲得最佳的因素水平。

1.2.4 藻紅蛋白熒光特性的分析

1.2.4.1 藻紅蛋白發(fā)射峰判定 對(duì)藻紅蛋白初提液進(jìn)行200～700nm的熒光激發(fā)光譜的全掃描，選定515nm為激發(fā)波長(zhǎng)，在此激發(fā)波長(zhǎng)下，研究藻紅蛋白的發(fā)射峰情況。

1.2.4.2 超聲波功率與處理時(shí)間對(duì)藻紅蛋白熒光特性的影響 取不同超聲波功率以及超聲時(shí)間處理得到的藻紅蛋白初提液在相同條件下進(jìn)行熒光分析，探究超聲波功率和超聲時(shí)間對(duì)藻紅蛋白熒光性的影響。

2 結(jié)果與討論

2.1 不同的勻漿時(shí)間對(duì)藻紅蛋白釋放量的影響以及條斑紫菜藻紅蛋白含量測(cè)定

勻漿法可以用于處理少量條斑紫菜破壁提取藻紅蛋白，由圖1可以看出，勻漿1h以后，藻紅蛋白的釋放量已幾乎無增長(zhǎng)，1.5h藻紅蛋白得率為50.21mg/g，2h處理?xiàng)l斑紫菜藻紅蛋白釋放量達(dá)到了50.70mg/g，增加處理時(shí)間到2.5h也無法再提高條斑紫菜藻紅蛋白的釋放量，相對(duì)隨著處理時(shí)間延長(zhǎng)，藻紅蛋白的純度還有所下降。2h勻漿處理后在顯微鏡下觀察條斑紫菜細(xì)胞，其原有的細(xì)胞結(jié)構(gòu)難以看到，則可認(rèn)為條斑紫菜細(xì)胞破碎已經(jīng)較完全，藻紅蛋白也已提取完全，測(cè)得此時(shí)的藻紅蛋白得率和純度分別為50.70mg/g和0.389，則可認(rèn)為在上述測(cè)定方法下此種條斑紫菜中藻紅蛋白的含量為50.70mg/g。

圖1 不同勻漿時(shí)間對(duì)條斑紫菜藻紅蛋白釋放量的影響

表1 不同提取方法對(duì)藻紅蛋白得率的影響

2.2 不同的提取方法對(duì)條斑紫菜藻紅蛋白得率與純度的影響

由表1可知，水溶脹法與緩沖液溶脹法在144h提取率與純度最高，分別達(dá)到25.54mg/g和27.80mg/g，溶脹可以使細(xì)胞吸水脹破細(xì)胞壁，胞內(nèi)物質(zhì)如藻紅蛋白溶出，但是因?yàn)樵诘蜏厮膫髻|(zhì)效率低，提取效率也低，提取時(shí)間長(zhǎng)，同時(shí)溶出的雜質(zhì)少，溫和有效地保持了藻紅蛋白的活性與純度;反復(fù)凍融法，處理時(shí)間為2h，處理次數(shù)為5次，最終提取率只達(dá)到14.35mg/g，純度也最低，是由于條斑紫菜細(xì)胞壁具有韌性結(jié)構(gòu)，冰晶融化時(shí)對(duì)細(xì)胞壁的破壞不完全，且在低溫條件下溶質(zhì)的溶出效率較低;組織研磨法與液氮預(yù)處理后進(jìn)行研磨，處理10min藻紅蛋白的得率為14.70mg/g和14.20mg/g，液氮預(yù)處理后藻紅蛋白的純度略高于直接研磨，這是由于超低溫有助于保持藻紅蛋白的活性與純度，與文獻(xiàn)報(bào)道一致［9］。實(shí)驗(yàn)中超聲波200W處理10min后得率為16.20mg/g，純度為0.261，使用超聲波提取，效率高并且實(shí)驗(yàn)重復(fù)性較好，但是純度較低，可通過探討不同的超聲波提取的影響因素如功率、時(shí)間和料液比，以及與超微粉碎技術(shù)進(jìn)行復(fù)合提取來獲得較高的藻紅蛋白得率，保證較高純度。

2.3 超微粉碎+超聲波輔助復(fù)合提取法

2.3.1 超微粉碎對(duì)條斑紫菜藻紅蛋白得率與純度的影響 實(shí)驗(yàn)分別選擇60、100、200目(200目條斑紫菜干粉為超微粉碎處理后過篩，前兩種為初粉碎處理后過篩)三種條斑紫菜干粉進(jìn)行處理，處理?xiàng)l件為功率500W，時(shí)間5min，料液比1∶50，提取次數(shù)為3次，操作參數(shù)超聲波發(fā)出時(shí)間3s，間隙時(shí)間3s。

由圖2可以看出，進(jìn)行超微粉碎后的條斑紫菜干粉藻紅蛋白提取率大大高于100目以及60目粒徑的普通破碎程度后的藻紅蛋白提取率，此時(shí)藻紅蛋白得率為45.72mg/g，分別為100、60目粒徑的2.29和3.44倍，這有可能是由于超微粉碎一部分程度地破壞了條斑紫菜細(xì)胞的細(xì)胞壁，提取時(shí)超聲波的協(xié)同作用能夠迅速使胞內(nèi)的藻紅蛋白溶出;條斑紫菜干粉進(jìn)行超微粉碎后藻紅蛋白的提取純度也有所增加，這可能是由于提取系統(tǒng)中藻紅蛋白的含量大大增加，而其他溶于水的雜質(zhì)溶出率較藻紅蛋白溶出率低，故藻紅蛋白的純度有了較明顯增加。

圖2 超微粉碎對(duì)條斑紫菜藻紅蛋白得率與純度的影響

2.3.2 提取次數(shù)對(duì)條斑紫菜藻紅蛋白得率與純度的影響 取超微粉碎后條斑紫菜干粉4g，料液比1∶50，功率500W，超聲5min，提取次數(shù)為1～5次，操作參數(shù)超聲波發(fā)出時(shí)間3s，間隙時(shí)間3s，考察不同提取次數(shù)對(duì)條斑紫菜藻紅蛋白得率以及提取率的影響，結(jié)果見圖3。條斑紫菜藻紅蛋白隨提取次數(shù)的增加得率呈上升趨勢(shì)，第一次提取后，提取率為49.85%，得率為27.69mg/g;第二次提取后得率為13.89mg/g，總提取率為73.12%;第三次得率為9.22mg/g，三次總提取率達(dá)到90%以上。隨著提取次數(shù)的增加，藻紅蛋白溶出速度緩慢，效率低，因此采用3次提取較為經(jīng)濟(jì)。

圖3 提取次數(shù)對(duì)條斑紫菜藻紅蛋白得率與提取率的影響

2.3.3 功率對(duì)條斑紫菜藻紅蛋白得率與純度的影響取超微粉碎后條斑紫菜干粉4g，料液比1∶50，超聲5min，提取次數(shù)為3次，操作參數(shù)超聲波發(fā)出時(shí)間3s，間隙時(shí)間3s，探討不同的超聲波功率對(duì)條斑紫菜藻紅蛋白得率以及純度的影響，根據(jù)參考文獻(xiàn)及預(yù)實(shí)驗(yàn)結(jié)果選擇功率參數(shù)為200、300、500、700、900W，結(jié)果見圖4。在500W時(shí)得率與純度較高，是由于功率較低不利于條斑紫菜細(xì)胞的破壁以及藻紅蛋白的溶出;選擇超聲功率為700、900W不利于藻紅蛋白的提取，是由于高強(qiáng)度的超聲波對(duì)藻紅蛋白等活性蛋白有降解和猝滅的作用，功率選擇過高，溶出的雜質(zhì)也就越多，會(huì)使藻紅蛋白得率與純度都不同程度的下降，所以選擇500W進(jìn)行處理最優(yōu)，此時(shí)的藻紅蛋白得率為45.73mg/g，純度為0.368。

圖4 提取功率對(duì)條斑紫菜藻紅蛋白得率和純度的影響

2.3.4 處理時(shí)間對(duì)條斑紫菜藻紅蛋白得率與純度的影響 取超微粉碎后條斑紫菜干粉4g，料液比1∶50，超聲功率為500W，提取次數(shù)為3次，操作參數(shù)超聲波發(fā)出時(shí)間3s，間隙時(shí)間3s，探討不同的超聲波時(shí)間對(duì)條斑紫菜藻紅蛋白得率以及純度的影響，選擇超聲時(shí)間為1、3、5、7、9min，結(jié)果見圖5。在5min時(shí)得率與純度較高，隨超聲時(shí)間增加后會(huì)導(dǎo)致藻紅蛋白的活性部分喪失，是由于超聲波對(duì)大分子有降解作用，長(zhǎng)時(shí)間超聲作用會(huì)導(dǎo)致大分子內(nèi)部局部溫度過高，受熱不均使其變性，合理的提取時(shí)間有利于保證最大程度獲得藻紅蛋白及保證其活性。

圖5 提取時(shí)間對(duì)條斑紫菜藻紅蛋白得率和純度的影響

2.3.5 料液比對(duì)條斑紫菜藻紅蛋白得率與純度的影響 取超微粉碎后條斑紫菜干粉4g，超聲功率為500W，處理時(shí)間5min，提取次數(shù)為3次，操作參數(shù)超聲波發(fā)出時(shí)間3s，間隙時(shí)間3s，探討不同的料液比對(duì)條斑紫菜藻紅蛋白得率以及純度的影響，選擇料液比為1∶60、1∶50、1∶40、1∶30、1∶20，結(jié)果見圖6。料液比在1∶60、1∶50時(shí)得率為44.17mg/g和43.15mg/g，選擇合適的料液比有助于目標(biāo)產(chǎn)物的溶出，料液比較小時(shí)，每次溶出的量有限，必須通過增加提取次數(shù)來獲得高得率;料液比增大時(shí)，無疑增加了每次提取的經(jīng)濟(jì)成本;料液比過大時(shí)，也會(huì)抑制藻紅蛋白的提取，故選擇料液比為1∶50。

圖6 料液比對(duì)條斑紫菜藻紅蛋白得率和純度的影響

2.4 藻紅蛋白的熒光特性分析

對(duì)藻紅蛋白進(jìn)行200～700nm的熒光激發(fā)光譜的全掃描，選定515nm為激發(fā)波長(zhǎng)，在此激發(fā)波長(zhǎng)下，研究藻紅蛋白的發(fā)射峰情況，波峰位于578nm左右，與文獻(xiàn)報(bào)道的關(guān)于R－藻紅蛋白的研究結(jié)果一致［11－12］。

2.4.1 超聲波提取對(duì)藻紅蛋白熒光強(qiáng)度的影響 圖7表明隨著功率的升高，檢測(cè)出的相對(duì)熒光強(qiáng)度隨著功率的增加而呈上升趨勢(shì)，在500W達(dá)到了最佳值。這是由于藻紅蛋白的溶出量增加使提取液濃度上升，熒光強(qiáng)度加劇;而隨功率繼續(xù)上升，相對(duì)熒光強(qiáng)度未繼續(xù)增加反而呈現(xiàn)下降趨勢(shì)，表明高強(qiáng)度超聲波對(duì)藻紅蛋白的構(gòu)象有破壞作用，超聲波的空化效應(yīng)對(duì)大分子物質(zhì)有降解作用。而圖8表明隨時(shí)間的增加，相對(duì)熒光強(qiáng)度有降低－升高－再降低的趨勢(shì)，是由于超聲波對(duì)藻紅蛋白的猝滅作用導(dǎo)致熒光強(qiáng)度下降，但是藻紅蛋白的溶出率迅速上升使得之間達(dá)到一個(gè)平衡，在本實(shí)驗(yàn)操作條件下5min，達(dá)到最優(yōu)平衡點(diǎn)，隨著操作時(shí)間的增加，溶出效率已達(dá)到極值，而超聲波對(duì)大分子的猝滅作用使得熒光強(qiáng)度呈最終下降趨勢(shì)。在上述實(shí)驗(yàn)條件下，超聲時(shí)間對(duì)熒光強(qiáng)度的影響效果小于超聲波功率的影響。

圖7 超聲波功率對(duì)藻紅蛋白熒光強(qiáng)度的影響

圖8 超聲波時(shí)間對(duì)藻紅蛋白熒光強(qiáng)度的影響

熒光性是衡量藻紅蛋白活性的重要指標(biāo)，超聲波功率過大對(duì)熒光蛋白有猝滅的作用，而超聲時(shí)間的長(zhǎng)短對(duì)藻紅蛋白熒光性有一定的影響，任何引起藻紅蛋白原本構(gòu)象變化的加熱或者化學(xué)變化都會(huì)使原有的光學(xué)特性改變，如熒光性喪失。上述藻紅蛋白的熒光性在超聲波強(qiáng)功率及長(zhǎng)時(shí)間作用下產(chǎn)生了一定的猝滅現(xiàn)象，熒光強(qiáng)度減弱，即說明藻紅蛋白原有的發(fā)色團(tuán)構(gòu)象發(fā)生了改變，其結(jié)構(gòu)的變化情況有待進(jìn)一步鑒定。超聲波的空化作用產(chǎn)生的瞬時(shí)壓差有強(qiáng)大的破壞作用，因此應(yīng)采用短時(shí)間處理來保證藻紅蛋白不被破壞。首先采用超微粉碎均勻物料的粒度，同時(shí)超微粉碎的強(qiáng)大沖擊力破壞細(xì)胞的細(xì)胞壁，再通過短時(shí)間適度功率下超聲波的作用能促進(jìn)目標(biāo)物藻紅蛋白的溶出，達(dá)到高效提取的同時(shí)保證其活性。超微粉碎與超聲波輔助提取相結(jié)合的方法能有效地提高條斑紫菜藻紅蛋白得率和提取效率。

3 結(jié)論

本實(shí)驗(yàn)比較了多種不同的條斑紫菜藻紅蛋白的提取方法，如溶脹法、凍融法、研磨法、機(jī)械攪拌法以及超聲波輔助提取法，選擇了超聲波輔助提取法進(jìn)行條斑紫菜藻紅蛋白的提取，并運(yùn)用超微粉碎技術(shù)與超聲波輔助提取法相結(jié)合的方法大大縮短了提取時(shí)間，獲得了較高的得率，保證了藻紅蛋白的純度與活性。同時(shí)研究了超聲波對(duì)條斑紫菜藻紅蛋白得率影響的四個(gè)因素∶超聲功率，超聲時(shí)間，料液比以及提取次數(shù)，獲得最佳工藝條件為功率500W，超聲時(shí)間5min，料液比1∶50，提取3次，操作參數(shù)超聲時(shí)間3s，間隙3s，藻紅蛋白得率為45.73mg/g，純度為0.368，提取率為90.2%，在上述最佳工藝條件下對(duì)條斑紫菜藻紅蛋白的得率純度實(shí)驗(yàn)結(jié)果穩(wěn)定均一。對(duì)于難以破壁的活性物質(zhì)的提取，超微粉碎與超聲波輔助結(jié)合提取是一種行之有效并且值得推廣的提取方法。

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Extraction technology of phycoerythrin in Porphyra yezoensis

HE Si－jia1，WANG Hong－xin1，2，*，WANG Yuan－h(huán)ui1
(1.School of Food Science and Technology，Jiangnan University，Wuxi 214122，China; 2.State Key Laboratory of Food Science and Technology，Wuxi 214122，China)

The effects of different extraction methods including water soluble method，freeze－thaw method，organization grinding method，mechanical mixing method and ultrasonic method on the extraction of phycoerythrin from Porphyra yezoensis were evaluated.Firstly superfine pulverizing and ultrasonic method were used to extract phycoerythrin.In order to obtain high yield and purity of phycoerythrin，the best technological conditions were optimized to be:ultrasonic working power was 500W，working time was 5min，ratio of material to water was 1∶50，three times of extraction and ultrasonic operation parameter was 3s，interval 3s.In this condition，the yield of phycoerythrin was 45.73mg/g，the purity was 0.368，and the recovery was 90.2%.This method can greatly improve the phycoerythrin yield and shorten time of operation.Meanwhile，fluorescence characteristic analysis verified that the phycoerythrin obtained by this extraction method exhibited higher activity.

Porphyra yezoensis;phycoerythrin;superfine pulverizing;ultrasonic;fluorescence characteristic

TS255.1

B

1002－0306(2011)11－0334－05

2010－12－28 *通訊聯(lián)系人

何思佳(1987－)，女，研究生，主要從事食品營(yíng)養(yǎng)功能因子方向研究。