李康 李柯 陳丹 李若存

刺藍(lán)抗疲勞口服液提取工藝的研究

李康 李柯 陳丹 李若存

目的研究影響刺藍(lán)抗疲勞口服液提取工藝因素，確定最佳條件。方法采用L9(34)進(jìn)行正交設(shè)計(jì)試驗(yàn)，對(duì)刺藍(lán)抗疲勞口服液提取工藝進(jìn)行優(yōu)選，以紫丁香苷、人參皂苷Rb1提取量及浸膏提取率為考察指標(biāo)，考察加水量、提取時(shí)間、藥材粒徑對(duì)提取工藝的影響。結(jié)果最佳工藝條件為飲片加水煎煮二次，第一次加10倍水，煎煮2 h，第二次加8倍水，煎煮1.5 h。結(jié)論該工藝穩(wěn)定可靠，簡(jiǎn)便易行，可用于刺藍(lán)抗疲勞口服液的工業(yè)化生產(chǎn)。

刺藍(lán)抗疲勞口服液;正交設(shè)計(jì);提取工藝

刺藍(lán)抗疲勞口服液是由刺五加、絞股藍(lán)枸杞子等制成的中藥六類新藥，功能調(diào)補(bǔ)氣血，強(qiáng)精神，益氣力，用于術(shù)后疲勞綜合征。證屬氣血虧虛者。為了提高藥材中有效物質(zhì)的利用率，我們根據(jù)處方有效成分的性質(zhì)，采用正交試驗(yàn)對(duì)刺藍(lán)抗疲勞口服液的提取工藝進(jìn)行了研究。

1 儀器與試液

LC-10A高效液相色譜儀(日本島津)，N2000色譜工作站(浙江大學(xué)智能信息工程研究所)，PBQ-Ⅱ型薄層自動(dòng)鋪板器(重慶南岸新力實(shí)驗(yàn)電器廠)，硅膠G(青島海洋化工廠)，AE-240型電子分析天平(中國(guó)梅特勒-托利多儀器廠);刺五加、絞股藍(lán)等藥材購(gòu)自長(zhǎng)沙九旺醫(yī)藥有限公司，紫丁香苷、人參皂苷Rb1均由中國(guó)藥品生物制品檢定所提供，所用試劑均為分析純。

2 方法與結(jié)果

2.1 因素水平表

表1 試驗(yàn)因素水平表

2.2試驗(yàn)方法與結(jié)果

表2 L9(34)正交實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)表

2.2.1 浸膏得率的測(cè)定 用L9(34)正交表安排試驗(yàn)，見表2，稱取1/10處方量藥材，按設(shè)定方案進(jìn)行提取，濾過，濾液合并，濃縮，定容至100 ml。精密吸取10 ml，置已干燥至恒重的蒸發(fā)皿中，水浴蒸干，于105℃干燥3 h，置干燥器中冷卻0.5 h，迅速稱重，按下式計(jì)算浸膏得率，計(jì)算結(jié)果見表3。

2.2.2 紫丁香苷含量測(cè)定［1］

2.2.2.1 色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗(yàn) 用十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑;甲醇-水(13∶87)為流動(dòng)相;檢測(cè)波長(zhǎng)為265nm;理論板數(shù)按紫丁香苷峰計(jì)算不得低于2000。

對(duì)照品溶液的制備精密稱取紫丁香苷對(duì)照品適量，加甲醇制成每1 ml含0.1 mg的溶液，即得。

表3 浸膏得率的測(cè)定結(jié)果(%)

2.2.2.2 供試品溶液的制備 取(2.1)項(xiàng)下已定容的9份余液，分別精密量取2 ml，置10 ml量瓶中，加甲醇至刻度，搖勻，用0.45 μm的微孔濾膜濾過，取續(xù)濾液，即得。共制得9個(gè)樣品。

2.2.2.3 測(cè)定法 分別精密吸取對(duì)照品溶液與供試品溶液10 μl，注入液相色譜儀，測(cè)定，計(jì)算，即得。結(jié)果見表4。

2.2.3 人參皂苷Rb1含量的測(cè)定

2.2.3.1 色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗(yàn) 以十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑;乙腈-0.5%磷酸(20∶80)為流動(dòng)相;檢測(cè)波長(zhǎng)為203nm;理論板數(shù)按人參皂苷Rb1峰計(jì)算不得低于2000。

2.2.3.2 對(duì)照品溶液的制備 精密稱取人參皂苷Rb1對(duì)照品適量，加甲醇制成每1 ml含0.1 mg的溶液，即得。

2.2.3.3 供試品溶液的制備 取紫丁香苷含量測(cè)定項(xiàng)下的供試品作為供試品。

2.2.3.4 測(cè)定法 分別精密吸取對(duì)照品溶液與供試品溶液10 μl，注入液相色譜儀，測(cè)定，計(jì)算，即得。結(jié)果見表5。

表4 紫丁香苷提取量(mg)

表5 人參皂苷Rb1提取量(mg)

表6 浸膏提取率方差分析表

以浸膏得率為考察指標(biāo)，表中極差R值大小顯示，各因素作用主次為B＞A＞C;B1＞B2＞B3，A2＞A3＞A1，C2＞C1＞ C3;方差分析結(jié)果表明:B因素有非常顯著性意義(P＜0.01)，A因素有顯著性意義(P＜0.05)，以B1A2C2組合為佳。

以紫丁香苷提取量為考察指標(biāo)，表中極差R值大小顯示，各因素作用主次為A＞B＞C，且A1＞A2＞A3，B1＞B2＞B3，C2＞C1＞C3;方差分析結(jié)果表明:A因素有非常顯著性意義(P＜0.01)，B因素有顯著性意義(P＜0.05)，以A1B1C2組合為佳。

表7 紫丁香苷提取量方差分析表

表8 人參皂苷Rb1提取量方差分析表

以人參皂苷Rb1提取量為考察指標(biāo)，表中極差R值大小顯示，各因素作用主次為A＞B＞C，且A1＞A2＞A3，B1＞B2＞B3，C3＞C1＞C2;方差分析結(jié)果表明:A、B因素有顯著性意義(P＜0.05)，以A1B1C1組合為佳。

綜合以上實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，加水量、提取時(shí)間對(duì)提取效果具有顯著性影響，藥材粒徑對(duì)提取效果無顯著性影響，本產(chǎn)品中紫丁香苷提取量及人參皂苷提取量作為重要因素考慮，因此以A1B1C1為最佳組合。

2.3 驗(yàn)證試驗(yàn) 平行稱取同一批1/10處方量藥材3份，按A1B1C1進(jìn)行試驗(yàn)，結(jié)果見表9。

表9 驗(yàn)證試驗(yàn)結(jié)果

根據(jù)上述驗(yàn)證實(shí)驗(yàn)結(jié)果，故確定最佳工藝條件為A1B1C1，即取飲片加水煎煮2次，第一次加10倍量水，煎煮2 h，第二次加8倍量水，煎煮1.5 h。

3 討論

3.1 刺五加具有益氣健脾，補(bǔ)氣安神的功能，為方中君藥，藥理和臨床研究結(jié)果表明:刺五加中所含的總苷是抗疲勞、扶正固本的有效成分［2］;絞股藍(lán)所含的絞股藍(lán)總苷是抗疲勞、防治多臟器損傷的有效成分［3］;上述成分水溶性好，因此選擇水作為本制劑的提取溶劑。

3.2 本試驗(yàn)以刺五加中含的紫丁香苷，絞股藍(lán)中含的人參皂苷Rb1及浸膏提取率作為評(píng)價(jià)指標(biāo)，通過正交試驗(yàn)法對(duì)刺藍(lán)抗疲勞口服液的提取工藝條件進(jìn)行了優(yōu)化，并按最佳工藝進(jìn)行了驗(yàn)證，結(jié)果表明該工藝重復(fù)性好，有效組分提取效率高，且經(jīng)濟(jì)可行。本研究為刺藍(lán)抗疲勞口服液的生產(chǎn)工藝提供了合理依據(jù)。

［1］ 中國(guó)藥典委員咐．中華人民共和國(guó)藥典．一部.北京．中國(guó)醫(yī)藥科技出版社，2010:192．

［2］ 郭愛民.刺五加的現(xiàn)代研究進(jìn)展.中國(guó)現(xiàn)代藥物應(yīng)用，2009，3 (10):194．

［3］ 孫萬森，齊典．絞股藍(lán)總苷防治多臟器損傷的藥理研究進(jìn)展.中藥材，2007，30(2):241．

Study on the extraction process in Cilan Kanpilao oral liquid

LI Kang，LI Ke，CHEN Dan，et al．
The First Affiliated Hospital in Hunan University of Traditional Medicine Changsha 410007，China

Objective To study the factor which has effect on the extraction of Cilan Kanpilao oral liquid，select the best process.MethodsThe extracting conditions were optimized by using L9(34)orthogonal test.Employing the content of Syringin，Ginsenoside Rb1and the extraction ratio of extractum as indexes，the effects of the grain size of crude drugs，time andcycles of extracting，the amount of water on the extracting process were investigated.ResultsThe optimal conditions were process herbs，10 times and 8 times amount of water for 2 cycles，and the extracting time was 2 hours and 1.5 hours in each time.ConclusionThe process is stable and repiable，easy and available，suitable for manufacturing of Cilan Kanpilao oral liquid．

Cilan Kanpilao oral liquid;Orthogonal design;Extracting process

湖南省科技廳科研基金資助項(xiàng)目(項(xiàng)目編號(hào): 2010FJ3105)

410007 湖南中醫(yī)藥大學(xué)附屬第一醫(yī)院(李康);湖南省中醫(yī)藥研究院(李柯 陳丹 李若存)

李若存 E-mail:liruocun2003@yahoo.com.cn