反相高效液相色譜法分析輔酶Q10

黨 偉，李 丹，李曉磊

(1.吉林農(nóng)業(yè)大學(xué) 食品科學(xué)與工程學(xué)院，長(zhǎng)春 130118;2.長(zhǎng)春大學(xué) 生物科學(xué)技術(shù)學(xué)院，長(zhǎng)春 130022)

反相高效液相色譜法分析輔酶Q10

黨 偉1，李 丹2，李曉磊2

(1.吉林農(nóng)業(yè)大學(xué) 食品科學(xué)與工程學(xué)院，長(zhǎng)春 130118;2.長(zhǎng)春大學(xué) 生物科學(xué)技術(shù)學(xué)院，長(zhǎng)春 130022)

本實(shí)驗(yàn)應(yīng)用色譜技術(shù)，建立了輔酶Q10的檢測(cè)方法。采用反相高效液相色譜法，以十八烷基硅烷鍵合硅膠為固定相，以無水乙醇－甲醇(1:1)為流動(dòng)相;柱溫35℃，檢測(cè)波長(zhǎng)275nm。結(jié)果表明:輔酶Q10的含量為6mg/g。

輔酶Q10;反相高效液相色譜法;檢測(cè)

0 引言

輔酶Q10是一種脂溶性抗氧化劑，是人類生命不可缺少的重要元素之一，它既能激活人體細(xì)胞和細(xì)胞能量的營(yíng)養(yǎng)，還能保持膜質(zhì)流動(dòng)性，增強(qiáng)人體非特異性免疫功能［1，2］。醫(yī)學(xué)上廣泛用于心血管系統(tǒng)疾病、病毒性肝炎、抗衰老等［3］。近年來，國(guó)內(nèi)外廣泛將其用于營(yíng)養(yǎng)保健品及食品添加劑。本文參照中華人民共和國(guó)藥典(2005年版)［4］“輔酶Q10膠囊”規(guī)定的方法檢測(cè)，用高效液相色譜法(HPLC)法檢測(cè)輔酶Q10。

1 儀器與藥品

島津LA-20AD高效液相色譜儀;

CoQ10對(duì)照品，Sigma公司;輔酶Q10膠囊，購于長(zhǎng)春歐亞集團(tuán)有限公司;無水乙醇為色譜純。

2 實(shí)驗(yàn)方法

2.1 色譜條件

紫外檢測(cè)器，檢測(cè)波長(zhǎng)275nm;C18色譜柱，Waters Nova－Pak C18(粒徑μm，150mm*3.9mm，沃特世公司，美國(guó)馬薩諸塞州米爾福德);流動(dòng)相，甲醇－無水乙醇(1:1);流速0.8mL/min;柱溫35℃;進(jìn)樣體積20μL。

2.2 標(biāo)準(zhǔn)溶液的配制

精密稱取100mg輔酶Q10標(biāo)準(zhǔn)品，加無水乙醇適量溶解，冷卻后，定容至100mL棕色容量瓶中，在避光條件下于冰箱中冷凍保存。

2.3 藥品的預(yù)處理

避光操作。精密稱取1.5g(約相當(dāng)于輔酶Q1020mg)，加無水乙醇適量，置50℃水浴中振搖溶解，放冷后，移至100mL棕色容量瓶中，加無水乙醇至刻度，搖勻，在3000r/min下離心5min，去上清液，經(jīng)0.45μm孔徑的微孔濾膜(聚四氟乙烯，豐源過濾設(shè)備有限公司，浙江省海寧市)過濾后，所得濾液用于反相高效液相色譜分析。

2.4 藥品含量的測(cè)定

采用外標(biāo)法定量。

3 結(jié)果與討論

3.1 標(biāo)準(zhǔn)品輔酶Q10

標(biāo)準(zhǔn)品輔酶Q10經(jīng)C18色譜柱分離得到色譜圖見圖1。圖1的結(jié)果表明:標(biāo)準(zhǔn)品輔酶Q10的保留時(shí)間為 23.75min，峰面積為 5676042.5。

圖1 標(biāo)準(zhǔn)品輔酶Q10高效液相色譜圖標(biāo)準(zhǔn)品輔酶Q10:23.75min

3.2 輔酶Q10膠囊

輔酶Q10膠囊經(jīng)C18色譜柱分離得到色譜圖見圖2。圖2的結(jié)果表明:輔酶Q10膠囊的保留時(shí)間為23.761 min，峰面積為514662.4。按峰面積外標(biāo)法計(jì)算其含量。

圖2 輔酶Q10膠囊高效液相色譜圖輔酶Q10膠囊:23.761min

3.3 結(jié)論

采用國(guó)標(biāo)法處理輔酶Q10膠囊樣品，再利用反相高效液相色譜法可以準(zhǔn)確分析計(jì)算輔酶Q10膠囊的輔酶Q10含量為6mg/g。

此種方法操作簡(jiǎn)單，定量精確，檢出限高，適用于輔酶Q10膠囊中微量輔酶Q10的檢測(cè)。

［1］ KOMMURU T R，KHAN M A，ASHRAF MA，et al.A simplified chromatographic method for quantitative determination of coenzyme Q10 in dog plasma［J］.Journal of Pharmaceutical and Biomedical Analysis，1998，16:1037 －1040.

［2］ GROSSI G，BARGOSSI A M，F(xiàn)IORELLA P L，et al.Improved high-performance liquid chromatographic method for the determination of coenzyme Q10 in plasma［J］.JChromatogr，1992，593:217 －226.

［3］ 張繼忠，遲莉麗，沈亞領(lǐng).輔酶Q10的生產(chǎn)及在醫(yī)學(xué)領(lǐng)域中的應(yīng)用［J］.上海應(yīng)用技術(shù)學(xué)院學(xué)報(bào)，2004，4(4):10－12.

［4］ 中華人民共和國(guó)衛(wèi)生部藥典委員會(huì).衛(wèi)生部藥品標(biāo)準(zhǔn)、抗生素生化藥品注釋［S］.1989.94－98.

Analysis of Coenzyme Q10 byReversed-Phase High-Performance Liquid Chromatography

DANG Wei1，LI Dan2，LI Xiao-lei2

(1.College of Food Science and Engineering，Jilin Agricultural University，Changchun 130118，China;2.Bio-Scientific and Technical College，Changchun University，Changchun 130022，China)

This experiment establishes a method for detecting coenzyme Q10 by using chromatographic technique.The best chromatographic conditions are stationary phase C18 column，mobile phase alcohol-methanol(1:1)with column temperature 35℃ and detection wavelength 275 nm.The results show that the content of coenzyme Q10 is 6mg/g.

coenzyme Q10;RP-HPLC;detection

TS218

A

1009－3907(2011)12－0086－02

2011-09-28

黨偉(1985-)，女，吉林雙遼人，碩士研究生，主要從事食品生物技術(shù)的研究。李丹(1972-)，男，內(nèi)蒙古赤峰人，教授，博士，主要從事食品科學(xué)方面研究。

責(zé)任編輯:鐘 聲