朱洪葉 (山東省煙臺開發(fā)區(qū)獸醫(yī)衛(wèi)生監(jiān)督檢驗所 264006)
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豬圓環(huán)病毒病的防治試驗
朱洪葉 (山東省煙臺開發(fā)區(qū)獸醫(yī)衛(wèi)生監(jiān)督檢驗所 264006)
本文對豬圓環(huán)病毒病的流行病學、致病機理進行調(diào)查研究,設計3組試驗,通過藥物、自家疫苗及兩者混合進行豬圓環(huán)病毒病的對比治療,發(fā)現(xiàn)單純一種治療效果不顯著,綜合的療法效果最好,并且對其綜合防治措施提出初步觀點。
豬 圓環(huán)病毒 防治
豬圓環(huán)病毒病對現(xiàn)代養(yǎng)豬業(yè)影響嚴重,己證實,豬圓環(huán)病毒與仔豬斷奶后多系統(tǒng)衰竭綜合征(PMWS)、豬皮炎與腎病綜合征(PDNS)、豬間質(zhì)性肺炎(IP)、母豬繁殖障礙和傳染性先天性震顫有關(guān),給養(yǎng)豬業(yè)造成了嚴重損失,被世界各國的獸醫(yī)與養(yǎng)豬業(yè)者認為是繼豬繁殖和呼吸綜合征之后危害養(yǎng)豬業(yè)的又一重大傳染病[1]。
試驗動物杜大長、杜長大三元豬由山東益生種豬繁育有限公司提供。增效替米考星(其成分替米考星-黃芪多糖-TMP可溶性粉~長沙施必龍動物藥業(yè)有限公司生產(chǎn))。利巴韋林、壯觀霉素、新霉素、復合維生素制劑(電解多維)、黃茂多糖、板藍根、甘草、穿心蓮、石膏拌料、過氧乙酸、鋼篩、甲醛、鋁膠生理鹽水、離心機。
ELISA試劑盒。試劑盒主要成分有:包被抗原的微孔板12×8條×2塊),抗N蛋自陰、陽性對照血潔各1管(0.5ml/管),抗豬IG-HRP結(jié)合物瓶(22m1/瓶),洗滌液濃縮液50ml/1瓶(使用時用蒸餾水稀釋10倍),底物A液、B液各1瓶(12m1/瓶),終止液1瓶(12m1/瓶),樣品稀釋液1瓶,50ml/瓶)。北京世紀元亨動物防疫技術(shù)有限公司生產(chǎn)。
1.2.1 采樣 (1)耳靜脈采血,肝素抗凝,離心后去血細胞,取上層血漿備用。(2)以包被液(碳酸鈉~碳酸氫鈉緩沖液0.05mol/L>pH9.6)稀釋抗原(常用5~10mg/ml),每孔0.1或0.2m1包被反應板,37℃濕盒溫育2~3h或4℃過夜。(3)棄去包被液,反應板用去離子水或PBS-Tween液(0.005mol/L PBS含0.05% Tween-20)沖洗3次,甩干。(4)用樣本稀釋液(0.05mol/L PBS含0.05% Tween-20)稀釋樣本(起始濃≥100-1)用樣本稀釋液每孔0.1ml,溫育1h。(5)棄去樣液,沖洗,甩干加稀釋結(jié)合物(常稀釋100-1>用樣本稀釋液),每孔0.1ml,溫育1~2h。(6)如上沖洗甩干后即刻加入新鮮配制的底物系統(tǒng),每孔0.1ml,室溫15min。(7)終止反應:HRP~OPD系統(tǒng)每孔加lmol/LH2S0450ul。(8)目測,記錄結(jié)果見表1。
1.2.2 治療方法 對感染豬圓環(huán)病毒及其他患呼吸道疾病的豬的豬進行對比治療,試驗組使用長沙施必龍動物藥業(yè)有限公司生產(chǎn)的“增效替米考星”(其成分替米考星一黃芪多糖-TMP可溶性粉);對照組不添加“增效替米考星”見表2。
1.2.3 細菌培養(yǎng) 細菌的分離與培養(yǎng)分別在肝臟、腦、脾臟和膽汁中無菌釣取少量病料分別接種到含有2%小牛血清的普通肉湯和鮮血瓊脂平板中,37℃培養(yǎng)48h,結(jié)果均未見有細菌生長。
1.2.4 疫苗制備 采取病豬的肺臟、淋巴結(jié)和腎臟按照1:5的比例加入生理鹽水勻漿。以200目的鋼篩過濾,將濾過的上清液加入0.4%甲醛37℃作用48h后,加入適量鋁膠生理鹽水。制備本場疫苗,全群肌肉注射。
1.2.5 綜合治療 第2組同時使用利巴韋林、壯觀霉素、新霉素、復合維生素制劑(電解多維)、黃茂多糖、板藍根、甘草、穿心蓮、石膏拌料。并且對豬舍以過氧乙酸進行全面消毒見表3。
表2 豬圓環(huán)病毒病等呼吸道病的治療結(jié)果 (%)
表3 采用自家苗治療結(jié)果 (%)
見表1。通過調(diào)查煙臺市7縣市31個規(guī)模化豬場,包括8個種豬場,23個商品代豬場,養(yǎng)殖規(guī)模在200頭以上,圓環(huán)病毒病平均感染率31.2%,高于我國平均水平27.7%。
替米考星對圓環(huán)病毒的影響產(chǎn)生間接的抗病毒作用,同時,該藥對霉形體、放線桿菌、巴氏桿菌等引起的呼吸道疾病療效非常明顯。
采用自家苗治療效果要好于單純的藥物治療,但效果并不明顯,認為與圓環(huán)病毒的免疫抑制有關(guān)。
表3的數(shù)據(jù)顯示,綜合的治療措施明顯優(yōu)于單純的藥物治療和單純單純自家苗療法。
抗病毒藥物和抗菌素藥物聯(lián)合使用效果好。如黃茂多糖注射液,能誘導畜禽機體產(chǎn)生干擾素,促進抗體形成,改善微循環(huán),提高機體免疫力,達到抗病毒的目的。雖然抗生素對病毒無直接效果,但對防止并發(fā)細菌感染,抗生素治療和對應性治療常常是必要的[2]。
由于感染這兩種疾病后極易誘發(fā)其他病毒性疾病的繼發(fā)感染,故對種豬群,除做好豬瘟、豬丹毒和豬肺疫的免疫之外,還需要作豬細小病毒病和偽狂犬病的免疫[3]。
被動免疫是指用特異的高免血清或卵黃抗體對發(fā)病豬群進行特異的治療,日前未見市場上有此類產(chǎn)品出售。由于病毒只能在細胞內(nèi)復制繁殖,一般藥物很難突破細胞屏障對其發(fā)揮像抗生素對細菌那樣的特異性的殺滅作用[4]。因此只能將其當作一種輔助治療藥物來使用。所以對病毒性疾病的根除目前還必須依賴于主動免疫。
對于留種用的后備種豬,在斷奶后用滅活疫苗進行免疫??擅扛?~3個月加強免疫1次,尤其是在產(chǎn)仔前30~45d的加強免疫是非常必要的,這樣就可以保證在整個哺乳期間,乳汁中含有足夠量的母源抗體,可以保護小豬在哺乳期間不會發(fā)病。斷奶前后,大約20~30日齡時,在母源抗體即將消失時,對小豬進行初次免疫,如是育肥豬,在初次免疫30~40d后再加強免疫1次,這樣就可以保護肥豬在出欄前不再發(fā)生感染[5]。
(1)妊娠母豬產(chǎn)前7d與產(chǎn)后7d,飼糧中加入80%支原凈125g/t,15%金毒素2.5kg,阿莫西林200g;或80%支原凈125g,強力霉素150g,阿莫西林200g,拌料混勻,連喂2周。(2)哺乳仔豬1日齡、7日齡和斷奶時各肌注1次速解靈(頭孢噻呋500mg/ml),每次0.2ml/頭[6]。(3)斷奶仔豬每噸飼糧中加80%支原凈100g、15%金毒素300g(或強力霉素120g)、阿莫西林150,拌料混勻,于斷奶前后各飼喂7d。體重較小者也可在飼糧中添加支原凈50mg/kg,強力霉素50mg/kg,阿莫西林50mg/kg,拌勻后飼喂,連用7d。同時在飼糧中適當添加電解質(zhì)、維生素B和維生素C等。(4)水中加入阿莫西林150g/t,個群飲水7d。
(1)在斷奶的當天(注意疾病的早期征兆),挑出并隔離有以下癥狀的病豬:空腹、皮膚蒼白、消瘦、衰竭、頭耷耳低、行動遲緩、被毛逆立、不吃奶、不合群。(2)在轉(zhuǎn)移到保育舍10~12d后,按正常的免疫程序給全群注射豬瘟疫苗,此時應該再次觀察并隔離每個圈舍中出現(xiàn)上述癥狀的病豬。(3)在轉(zhuǎn)群14~21d后第3次觀察并把出現(xiàn)以下癥狀的病豬隔離到治療圈舍:生長緩慢、皮膚蒼白、冷水淋浴后被毛逆立、精神沉郁、行動退緩、同時有像非典型豬瘟或沙門氏菌樣的黃痢。(4)開口料中添加愛樂新、阿莫西林、磺胺類藥物有助于減少副豬嗜血桿菌的病豬數(shù)量。如果在斷奶后有嚴重的下痢發(fā)生,料中添加硫酸粘桿菌素[7]。
以上措施可以阻止多種病原混合感染造成的綜合征,而且可以把發(fā)病率從12%~20%減少到3%~7%。而且PCV-2不會在育肥豬階段發(fā)生。
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[2] Khampee, 劉建民. 圓環(huán)病毒2型亞洲流行現(xiàn)狀及其綜合防制方法[J], 中國動物保健, 2005, 5: 44-46.
[3] 張玲, 鄭國清. 豬圓環(huán)病毒的流行現(xiàn)狀及診治[J]. 畜牧獸醫(yī)科技信息, 2006, 3.
[4] 曹勝波, 陳煥春等. 豬環(huán)狀病毒2型的PCR檢測方怯的建立和應用[J]. 華中農(nóng)業(yè)學報, 2001,1: 53-56.
[5] 劉正飛, 陳煥春等. 豬圓環(huán)病毒研究進展[J], 動物醫(yī)學進展, 2002, 23(2): 14-16.
[6] 馬云省, 吳茂生等. 規(guī)模化豬場圓環(huán)病毒病和豬繁殖與呼吸障礙綜合征的調(diào)查及防治[J], 山東畜牧獸醫(yī), 2005, 4: 24-25.
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(2011–06–18)
S858.28
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1007-1733(2011)09-0004-02