何若英 李 晶 廣東省廣州市番禺療養(yǎng)院 5490; 廣東省廣州市番禺區(qū)中心醫(yī)院病理科

卵巢惡性腫瘤的發(fā)病率在女性生殖道腫瘤中居第3位,但由于缺乏典型的臨床癥狀,早期診斷較困難,其死亡率在婦科惡性腫瘤中居第1位。sruvivin是凋亡抑制蛋白基因家庭新成員,大量研究表明,survivin在正常組織中不表達(dá),在許多腫瘤組織中高表達(dá),這一特點(diǎn)為腫瘤的早期診斷和基因治療提供了靶點(diǎn)。環(huán)氧合酶-2(cyclooxyengase-2,COX-2)具有影響細(xì)胞的增殖及分化、抑制細(xì)胞凋亡作用,并可促進(jìn)腫瘤血管形成,與多種腫瘤的發(fā)生、發(fā)展密切相關(guān)。本文探討survivin和COX-2在卵巢上皮性腫瘤中表達(dá)情況和其與卵巢癌病理特征之間的關(guān)系,以及二者之間的相互關(guān)系。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選用我院與番禺區(qū)中心醫(yī)院2006年1月-2009年6月病理科存檔的卵巢癌34例、卵巢交界性囊腺瘤27例、卵巢良性囊腺瘤58例、正常卵巢組織46例的手術(shù)標(biāo)本蠟塊。標(biāo)本均經(jīng)過10%中性福爾馬林固定,常規(guī)石蠟包埋,連續(xù)4μm切片。所有病例均經(jīng)H E切片診斷證實(shí)。所有患者術(shù)前均未接受化療或者放療。

1.2 方法 免疫組化采用EnV ision法。兔抗人survivin多克隆抗體及鼠抗人COX-2單克隆抗體購自北京中衫金橋生物技術(shù)有限公司。用已知survivin陽性表達(dá)的胃癌切片及COX-2陽性的結(jié)腸癌切片作為陽性對照,用PBS代替一抗作陰性對照。

1.3 免疫組化陽性結(jié)果判斷 由兩位病理學(xué)專家雙盲予每張切片評分,結(jié)合陽性細(xì)胞百分比及陽性細(xì)胞染色強(qiáng)弱兩個方面進(jìn)行分析評分。(1)陽性細(xì)胞百分比:無陽性細(xì)胞為0分,陽性細(xì)胞占1%～10%為1分,11%～50%為2分,51%～80%為3分,81%～100%為4分。(2)陽性細(xì)胞染色強(qiáng)弱:基本不著色為0分,著色淡者為1分,著色適中者為2分,著色深者為3分。(1)、(2)兩項(xiàng)乘積為其最后得分:0分為陰性(-),1～4分為弱陽性(+),5～8分為中等陽性(++),9～12分為強(qiáng)陽性(+++)。

1.4 統(tǒng)計學(xué)方法 應(yīng)用SPSS11.5統(tǒng)計軟件包,蛋白陽性率用χ2檢驗(yàn)和Fisher確切概率法,蛋白陽性之間的相關(guān)性和等級相關(guān)資料用Spearman相關(guān)分析處理,P＜0.05為有統(tǒng)計學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 sunrivin與COX-2蛋白在卵巢上皮性癌組織和對照組織中的表達(dá) sunrivin蛋白陽性表達(dá)的染色部位主要位于腫瘤細(xì)胞的細(xì)胞漿中,為粗細(xì)不一的棕黃色顆粒。在46例正常卵巢組織中均未發(fā)現(xiàn)survivin的陽性表達(dá),在良性漿液性腫瘤58例中,sunrivin蛋白陽性表達(dá)率為19.0%(11/58),在交界性腫瘤和卵巢癌中sunrivin蛋白的陽性表達(dá)率分別為51.9%(14/27)和73.5%(25/34)。COX-2陽性染色為棕黃色顆粒。定位于細(xì)胞核周及細(xì)胞漿內(nèi),呈片狀或顆粒狀分布。46例正常卵巢組織中COX-2蛋白表達(dá)為陰性。在58例良性卵巢漿液性腫瘤中,COX-2蛋白表達(dá)陽性率為29.3%(17/58)。交界性卵巢上皮腫瘤及卵巢癌組織中COX-2蛋白表達(dá)陽性率分別為 74.1%(20/27)和88.2%(30/34)。

2.2 survivin與COX-2在卵巢癌組織中表達(dá)的相關(guān)性survivin與COX-2之間具有顯著正相關(guān)性(r=0.387,P＜0.01)。

3 討論

卵巢癌的發(fā)生、發(fā)展是多步驟的過程,必然涉及變異的積累和細(xì)胞正常周期的紊亂。研究表明細(xì)胞異常增殖和凋亡抑制是卵巢癌發(fā)生的重要機(jī)制[1]。survivin又名生存素或生存蛋白,是1997年由耶魯大學(xué)的A ltieri實(shí)驗(yàn)室應(yīng)用效應(yīng)細(xì)胞蛋白酶受體-1(effec tor cellp roteasa recep tor-1)的cDNA通過雜交方法在人類基因組文庫中篩選并獲得的凋亡抑制蛋白。survivin在正常胚胎發(fā)育過程中有所表達(dá)。在成人終末分化中很少見到(除了睪丸、胸腺和胎盤),但在大量的腫瘤組織如肺癌、胃癌、結(jié)腸癌、胰腺癌、乳腺癌、淋巴瘤、子宮內(nèi)膜癌、子宮頸癌和卵巢癌等組織中可見其表達(dá)[2]。Sui等[3]發(fā)現(xiàn),survivin基因在卵巢良性囊腺瘤中無表達(dá)或低表達(dá)(0%～12.1%),在惡性卵巢上皮性癌細(xì)胞漿或細(xì)胞核中表達(dá)豐富。認(rèn)為其表達(dá)與卵巢癌手術(shù)病理分期、病理類型、預(yù)后、生存率等指標(biāo)顯著相關(guān)。本文結(jié)果顯示,sunrivin在正常卵巢組織中無表達(dá):在良性卵巢上皮腫瘤、交界性卵巢上皮腫瘤、卵巢癌中的陽性表達(dá)率逐漸增強(qiáng)。sunrivin的高表達(dá)預(yù)示腫瘤有較高的侵襲性和不良預(yù)后,是評價卵巢癌預(yù)后的潛在指標(biāo)。因此,檢測sunrivin的表達(dá),對臨床上作出早期診斷、估計預(yù)后具有一定的指導(dǎo)意義。survivin在腫瘤組織中高表達(dá)而在正常組織中不表達(dá)的特性。為卵巢癌的基因治療提供了理論依據(jù)。COX-2是參與花生四烯酸的環(huán)氧酶代謝途徑中的限速酶?？纱呋ㄉ南┧徂D(zhuǎn)化為前列腺素(p rostaglandins)。多項(xiàng)研究表明COX-2在許多腫瘤中的表達(dá)上調(diào)。并與增強(qiáng)的抗凋亡能力相關(guān),提示COX-2可能與腫瘤發(fā)生、發(fā)展密切相關(guān)。臨床研究表明,COX-2表達(dá)與卵巢上皮性癌患者的治療反應(yīng)相關(guān)。是影響其預(yù)后的獨(dú)立危險因素。本研究結(jié)果顯示,COX-2在正常卵巢組織中無表達(dá),在良性卵巢上皮腫瘤組織、交界性卵巢上皮腫瘤、卵巢癌中的表達(dá)呈增強(qiáng)趨勢,差異有高度顯著性,該結(jié)果與Matsumoto等研究結(jié)果相同。提示COX-2在卵巢癌發(fā)生的早期即開始起作用,進(jìn)展期持續(xù)存在,并不是晚期事件[4]。新近研究指出[5],特異性的COX-2抑制劑能明顯減少survivin蛋白在細(xì)胞中的表達(dá),同時在動物模型中還發(fā)現(xiàn),survivin蛋白表達(dá)水平的高低依賴于細(xì)胞中COX-2蛋白是否存在。在本研究中,檢測了卵巢癌中survivin與COX-2的表達(dá)情況并且分析兩者的相關(guān)性,結(jié)果顯示COX-2在卵巢癌組織中的表達(dá)與survivin的表達(dá)密切相關(guān)。該結(jié)果初步提示兩者具有協(xié)同作用,抑制細(xì)胞凋亡,共同參與了卵巢癌的發(fā)生、發(fā)展。

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