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      液基細(xì)胞學(xué)和高危人乳頭瘤狀病毒DNA檢測對宮頸病變篩查的價(jià)值

      2011-12-09 04:53:42張春莉李冬琴王延明
      醫(yī)學(xué)綜述 2011年20期
      關(guān)鍵詞:危型細(xì)胞學(xué)鱗狀

      張春莉,李冬琴,王延明

      (1.延安大學(xué)附屬醫(yī)院病理科,陜西延安 716000;2.延安大學(xué)附屬醫(yī)院婦科,陜西延安 716000)

      子宮頸癌是婦科常見惡性腫瘤之一,現(xiàn)已明確人乳頭瘤狀病毒(human papilloma virus,HPV)感染是宮頸癌發(fā)生的主要病因[1-3]。巴氏涂片細(xì)胞學(xué)檢查是較早作為篩查宮頸癌的方法,但存在許多不足之處。近年液基制片技術(shù)的出現(xiàn)提高了宮頸癌及癌前病變的檢出率[4],細(xì)胞學(xué)標(biāo)本制片質(zhì)量控制是準(zhǔn)確發(fā)現(xiàn)病變的前提,它包括標(biāo)本收集、涂片制備、固定染色等。此外,迄今發(fā)現(xiàn)的100多型HPV病毒中HPV16、18、31、33、35、39、45 等型持續(xù)感染可引起宮頸上皮內(nèi)瘤變與宮頸癌。因此,高危人乳頭瘤狀病毒(high risk human papilloma virus,HR-HPV)檢測在宮頸癌篩查與防治中也具有重要作用。在此主要探討液基細(xì)胞學(xué)(thin prep liquid based cytology testing,TCT)和高危人乳頭瘤狀病毒DNA(HR-HPV DNA)檢測對宮頸病變篩查的價(jià)值。

      1 資料與方法

      1.1 臨床資料 選擇2009年10月至2010年10月期間在我院婦科門診就診的2876例患者為研究對象,年齡 19~62歲,平均(33.7 ±5.8)歲。排除急性生殖道炎癥、子宮頸錐切和子宮切除史。

      1.2 方法

      1.2.1 TCT 檢測 采用南京東大迪艾基因技術(shù)有限公司提供的試劑。用特制宮頸刷旋轉(zhuǎn)刷取宮頸管及外口的脫落細(xì)胞,并洗入細(xì)胞保存液中送檢,進(jìn)行液基細(xì)胞學(xué)檢查。其診斷標(biāo)準(zhǔn):采用2001 年TBS分類標(biāo)準(zhǔn)[5]宮頸病變分為良性反應(yīng)性細(xì)胞改變、鱗狀上皮細(xì)胞異常和腺上皮細(xì)胞改變(AGUS,AIS),其中以鱗狀上皮細(xì)胞異常為主,包括:①正常范圍(within normal limits,WNL);②意義不明的非典型鱗狀細(xì)胞(atypical squamous cells of undetermined significance,ASC-US);③低度鱗狀上皮內(nèi)病變(low grade squamous intraepithelial leison,LSIL);④高度鱗狀上皮內(nèi)病變(high grade squamous intraepithelial leison,HSIL);⑤鱗狀細(xì)胞癌(squamous cell carcinoma,SCC)。以TCT≥ASCUS/AGUS為異常。

      1.2.2 HR-HPV DNA檢測 TCT檢測異常的部分患者在外院進(jìn)行HPV DNA檢測。HPV DNA檢測采用凱普公司提供的試劑,利用建立在導(dǎo)流雜交法上的低密度基因芯片技術(shù)。標(biāo)本采集均使用一次性取樣器插入宮頸管順時(shí)針方向旋轉(zhuǎn)3~5圈,取宮頸管分泌物裝入特制保存液中,提取樣本中的DNA,通過聚合酶鏈反應(yīng)擴(kuò)增,放大病毒DNA的量。利用雙鏈堿基互補(bǔ)的原理,將DNA產(chǎn)物加入固定有不同HPV亞型探針的低密度基因芯片上,進(jìn)行導(dǎo)流雜交,最終獲得特異性的雜交結(jié)果。檢測HPV亞型21種,其中包括高危型人乳頭瘤病毒 16、18、31、33、35、39、45、51、52、56、58、59、68型。檢測結(jié)果的診斷標(biāo)準(zhǔn)是:只有Biotin點(diǎn)和IC點(diǎn)同時(shí)顯色才能保證結(jié)果的真實(shí)性和有效性。

      2 結(jié)果

      2876例患者TCT檢查結(jié)果異常者183例,占6.36%,其中 ASC-US 104 例(56.83%),LSIL 48 例(26.23%),HSIL 21 例(11.48%),SCC 10 例(5.46%)。183例TCT異?;颊咧杏?23例進(jìn)行了HR-HPV DNA檢測并回報(bào)了結(jié)果,其中陽性87例,陽性率53.05%;其中ASC-US 29 例(27.88%)、LSIL 32 例(66.67%)、HSIL 17 例(80.95%)、SCC 9 例(90.00%)。

      3 討論

      子宮頸癌篩查的主要目的是早期發(fā)現(xiàn)、診斷和治療宮頸癌前病變(cervical intraepithelial neoplasias,CIN)和宮頸癌[6]。子宮頸癌預(yù)防最成功的策略在于落實(shí)了人口普查和發(fā)明了細(xì)胞學(xué)篩查方法。

      細(xì)胞學(xué)檢查一直是篩查宮頸癌的主要手段,但因假陰性高易造成對宮頸癌及癌前病變的漏診。TCT由于技術(shù)上的改進(jìn),使宮頸異常細(xì)胞的檢出率明顯提高,本組資料中2876例患者TCT檢查結(jié)果異常者183例,占6.36%,其中ASC-US 104例,LSIL 48例,HSIL 21例,SCC10例。但有研究報(bào)道,TCT檢查對于ASCUS/AGU與病理診斷符合率低,意味著TCT檢查有可能導(dǎo)致對宮頸早期病變的漏診[7]。本組資料中164例TCT檢查異常者HR-HPV DNA檢測陽性87例,陽性率53.05%,盡管細(xì)胞學(xué)篩查大幅度降低了宮頸痛的發(fā)病率與病死率,但是細(xì)胞學(xué)檢查單次檢測敏感度低,需重復(fù)檢查,因此,許多組織,包括美國癌癥學(xué)會(huì)(ACS),美國婦產(chǎn)科醫(yī)師學(xué)會(huì)(ACOG)等權(quán)威機(jī)構(gòu)推薦將宮頸癌明確的生物學(xué)病因HR-HPV檢測納入宮頸癌篩查方案。HR-HPV DNA檢測法取樣簡單易行,檢測結(jié)果客觀準(zhǔn)確,特別適合大規(guī)模的人群篩查。婦女定期檢查HPV感染,能有效地判斷子宮頸癌的發(fā)病風(fēng)險(xiǎn)。HR-HPV DNA檢測陽性,預(yù)示發(fā)生宮頸癌的風(fēng)險(xiǎn)性增加,或預(yù)測在未來2~5年可能發(fā)生宮頸癌前病變[8],因此,HPV檢測已成為宮頸的另一種防癌篩查手段。但是,HR-HPV DNA檢測假陽性率也是普遍存在的一個(gè)問題。假陽性率發(fā)生的原因可能于以下幾點(diǎn)有關(guān):①操作技術(shù)上的錯(cuò)誤;②生物樣品的收集、儲(chǔ)藏、處理過程中污染;③反應(yīng)抑制劑的出現(xiàn),發(fā)生了非特異性雜交反應(yīng);④臨床質(zhì)控不到位等。

      綜上所述,無論是TCT技術(shù)或是高危型HPV檢測,均是臨床常用的宮頸病變檢查方法。通過細(xì)胞學(xué)檢查可以明確患者是否存在細(xì)胞學(xué)的改變,高危型HPV檢測采用標(biāo)準(zhǔn)化試劑盒,人為主觀因素影響小,可了解患者是否存在和宮頸癌關(guān)系密切的高危型HPV感染,故將TCT檢查與HR-HPV DNA檢查聯(lián)合用于宮頸病變的篩查,是防治宮頸癌的有效手段。

      [1] Walboomers JM,Jacobe MV,Manes MM,et al.Human papillomavirus is a neceasary cause of invuive cervical cancer worldwide[J].J Pathol,1999,189(1):12-19.

      [2] Schiffman MH,Bauer HM,Hoover RN,et al.Epidemilolglc evidence showing that human papillonmvirus infection causes most cervical intraepithelial neoplasia[J].J Natl Cancer Inst,1993,85(12):958-964.

      [3] 熊小泉,周強(qiáng),丁海明,等.TCT、HPV-DNA聯(lián)合檢測在宮頸病變診斷中的應(yīng)用[J].四川醫(yī)學(xué),2009,30(11):1083-1085.

      [4] 吳坤河,賴日權(quán),張佳立,等.宮頸癌液基細(xì)胞學(xué)篩查與組織學(xué)檢查的對比[J].實(shí)用癌癥雜志,2005,20(1):99.

      [5] 劉樹范.宮頸細(xì)胞病理學(xué)報(bào)告方式(2001年TBS術(shù)語學(xué))及診斷標(biāo)準(zhǔn)[J].癌癥進(jìn)展雜志,2004,2(1):64-69.

      [6] 姜敏,于民.高危型人乳頭瘤病毒在宮頸癌篩查中的應(yīng)用[J].中國實(shí)用醫(yī)刊,2011,38(4):93-94.

      [7] 錢德英.重視宮頸癌前病變篩查的質(zhì)量管理控制[J].中國實(shí)用婦科與產(chǎn)科雜志,2007,23(7):497.

      [8] Wright TC Jr,Massad LS,Dunton CJ,et al.2006 consensus guidelines for the management of women with cervical intraepithelial neoplasia or adenocarcinoma in situ[J].J Low Genit Tract Dis,2007,11(4):223-239.

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