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      正交試驗優(yōu)選舒欣膠囊中丹參酮ⅡA提取工藝

      2011-12-27 07:41:34張紅巖韓大慶張楠楠
      長春中醫(yī)藥大學學報 2011年3期
      關鍵詞:丹參酮丹參乙醇

      趙 珉,郭 靖,張紅巖,韓大慶,周 丹,張楠楠

      (1.吉林大學第一醫(yī)院,吉林長春 130021;2.吉林省中醫(yī)藥科學院,吉林長春 130021)

      正交試驗優(yōu)選舒欣膠囊中丹參酮ⅡA提取工藝

      趙 珉1,郭 靖1,張紅巖2,韓大慶2,周 丹2,張楠楠1

      (1.吉林大學第一醫(yī)院,吉林長春 130021;2.吉林省中醫(yī)藥科學院,吉林長春 130021)

      目的:優(yōu)選舒欣膠囊中丹參酮ⅡA的提取工藝。方法:以丹參酮ⅡA的含量為指標,以醇濃度、加醇量、提取時間、提取次數為考察因素,采用正交試驗法,篩選處方中丹參的醇提取最佳工藝。結果:丹參用90%乙醇回流提取2次,每次加醇7倍量,提取1.5 h。結論:該工藝合理、可行,可為舒欣膠囊進一步的工業(yè)化生產提供依據。

      舒欣膠囊;正交試驗;提取工藝;丹參酮ⅡA

      舒心膠囊由黃芪、丹參、沒藥、血竭等藥物組成,將益氣、養(yǎng)陰與活血、化瘀相結合,是標本兼治,虛實兼理的有效方劑。本實驗以舒欣膠囊的提取工藝為研究對象,重點在于確定膠囊的提取工藝路線,利用正交試驗方法,以最少的試驗次數,找到最佳的提取工藝條件,確定工藝參數,并建立相應的含量測定方法,為該藥的開發(fā)應用提供了科學依據。

      1 儀器與材料

      島津LC-10AT高效液相色譜儀(島津);島津SPD-10Avp檢測器;N2000色譜工作站;電子分析天平(德國賽多利斯,1/100000);恒溫水浴鍋(HH-2型,國華);超聲波清洗器(DS-7510DTH)。

      丹參酮ⅡA對照品(中國藥品生物制品檢定所,批號110766-200518,供含量測定用);甲醇、乙腈為色譜純;其余試劑均為分析純。丹參、黃芪、沒藥、血竭等藥材購自(吉林長春宏檢藥材經銷公司)。

      2 方法與結果

      2.1 因素水平表設計 采用L9(34)正交表進行正交試驗,選擇影響丹參醇提取工藝中的4個主要因素:A(醇濃度)、B(加醇量)、C(提取時間)、D(提取次數) ,每個因素3個水平進行試驗,見表1。

      表1 因素水平表

      2.2 試驗方法 按L9(34)正交實驗表設計方案,取丹參藥材9分,每分50 g,按正交表所設計方案提取,提取液合并,濾過,減壓回收乙醇并轉移至500 mL量瓶中,加乙醇至刻度,搖勻,供含量測定用。

      2.3 含量測定 對照品溶液制備:精密稱取丹參酮ⅡA對照品10 mg,置于50 mL棕色容量瓶中,加甲醇至刻度,搖勻;精密量取2 mL,置于25 mL棕色容量瓶中,加甲醇至刻度,搖勻,即得(每1 mL中含丹參酮ⅡA 16μg)。

      供試品溶液制備:精密吸取樣品溶液2 mL,置于25 mL棕色容量瓶中,加95%的乙醇稀釋至刻度,搖勻,供含量測定用。

      測定法:分別精密吸取對照品溶液與供試品溶液各10μL,注入液相色譜儀,測定,即得。計算正交表每組實驗中所提取的丹參酮ⅡA的含量。

      色譜條件:色譜柱:Agilent Z orbax SB-C18(4.6×150 mm);流動相 :甲醇 - 水(75∶25);波長 :270 nm;流速:1 mL/min;柱溫:250℃;進樣量:對照品溶液5μL,樣品溶液5μL。

      2.4 正交試驗結果 見表2。

      2.5 正交試驗結果分析

      2.5.1 直觀分析 結果表明,各因素極差值的高低影響丹參乙醇提取工藝因素大小順序為A>D>C>B,即乙醇濃度(因素A)為主要影響因素,而提取次數(因素D)、加醇量(因素B)和提取時間(因素C)不是重要因素。從 K值看,醇濃度(因素A)各水平順序為 I1>I2>I3,說明3個水平中,以90%乙醇為最佳;加醇量(因素B)各水平間大小順序為I2>I3>I1,說明3個水平中,以7倍量乙醇提取即可,其極差是4個因素最小的,即影響最小;提取時間(因素C)各水平之間大小順序為 I2>I3>I1,以 I2(1.5 h)為最高;提取次數(因素D)各水平之間大小順序為I2>I3>I1,說明提取次數增加,丹參酮ⅡA含量不變,以提取2次為最佳。

      表2 丹參藥材乙醇提取工藝正交試驗結果

      2.5.2 方差分析 見表3。

      表3 方差分析

      2.5.3 正交試驗結論 試驗結果得出,丹參乙醇提取工藝最佳條件為A1B2C2D2,即藥材用90%乙醇回流提取2次,每次加醇7倍量,提取1.5 h。

      2.6 驗證性實驗 按照篩選出的最佳組合A1B2C2D2做驗證性實驗,進一步考察優(yōu)選工藝的可靠性及穩(wěn)定性。稱取丹參藥材3分,50 g/分。按已確定的最佳提取工藝,即90%乙醇7倍量,提取2次,每次1.5 h,操作方法同前,測得丹參酮ⅡA含量分別為:0.110 1、0.112 4、0.114 6 g ,平均為 0.112 4 g。

      3 討論

      3.1 丹參[1]性微寒,味苦,具有活血祛瘀、養(yǎng)血安神、調經止痛、涼血消癰的功效,對冠心病、心血管病常服療效較好,對慢性肝炎、早期肝硬化等疾病具有良好效果。就其提取方法有超聲提取、滲漉法和乙醇回流法。實驗研究[2]證明乙醇回流提取法能提高丹參有效成分的含量,減少溶媒使用量,縮短時間,節(jié)約成本,保護資源。故本實驗采用乙醇回流提取法。

      3.2 本實驗充分考慮了丹參酮ⅡA對熱、光敏感易分解變質,由于其不穩(wěn)定性可能引起的差異,做了相應的防范措施,如避光陰涼處保存,盡快測定,烘干溫度一定控制在80℃以下,常溫測量等。

      3.3 其他處方中藥材與丹參藥渣采用水煎煮提取方法,以丹酚酸B為含量測定指標,采用正交試驗法,優(yōu)選加水量、提取時間及提取次數等工藝參數,從而得出舒欣膠囊最佳的水煎煮提取工藝。

      [1]趙明霞.丹參藥用成分及提取工藝研究[J].中國民族民間醫(yī)藥 ,2010 ,19(3):39-40.

      [2]陳紅霞,陳芳芳,顏新宇.丹參中丹參酮ⅡA 3種提取方法的比較研究[J].中國現代藥物應用,2010,4(4):167-168.

      R285.1

      A

      1007-4813(2011)03-0355-02

      吉林省科技發(fā)展計劃項目(編號:20080925)。

      趙 珉(1962-),女,副主任藥師,碩士研究生導師。研究方向:臨床藥理學研究。

      2011-03-07)

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