趙和泰 李江濤 張效北 李 偉 楊淑青 覃雪燕 李 丁 何 龍

解放軍第三○三醫(yī)院干細(xì)胞中心，廣西南寧 530021

神經(jīng)損傷是一種臨床多發(fā)病，尤其多見于神經(jīng)內(nèi)科。若臨床治療方法不當(dāng)常會(huì)引起神經(jīng)功能受損，引發(fā)不可逆的損害。對(duì)于神經(jīng)損傷的臨床治療方法眾多，本研究選擇間充質(zhì)干細(xì)胞治療進(jìn)行研究，現(xiàn)報(bào)道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

本研究選擇2010年12月～2011年6月在筆者所在醫(yī)院進(jìn)行治療的神經(jīng)損傷的患者31例進(jìn)行研究，其中男19例，女12例，男略多于女，平均年齡（34.7±8.9）歲，最大50歲，最小19歲，神經(jīng)損傷原因分布情況分布顯示，車禍患者11例，高空墜落7例，精神壓力過大5例，砸傷和跳水患者各2例，摔傷2例，脊髓炎和脊髓栓綜合征1例。采用對(duì)癥治療的方法進(jìn)行治療，所有患者均簽署知情同意書，愿意參加本研究。

1.2 臨床治療

對(duì)研究患者在治療前均進(jìn)行凝血功能、心肺、肝腎功能障礙情況分析，要求體格檢查、血常規(guī)、尿常規(guī)和便常規(guī)檢查均正常，無嚴(yán)重病變。參考文獻(xiàn)提供的方法[1]，進(jìn)行間充質(zhì)干細(xì)胞制備，簡單的描述方法為收集臍帶并去除外膜和動(dòng)靜脈血，將臍帶剪成0.5 cm2的組織細(xì)胞進(jìn)行提取，加入等體積的膠原酶中，在37 ℃進(jìn)行消化過夜。次日加入兩倍體積的胰蛋白酶37 ℃消化1 h[1]，離心收集活細(xì)胞并進(jìn)行計(jì)數(shù)。在培養(yǎng)瓶中進(jìn)行傳代培養(yǎng)，采用流式細(xì)胞術(shù)進(jìn)行細(xì)胞表型測定，常規(guī)感染源進(jìn)行鑒定并收集細(xì)胞放于-80 ℃的冰箱中備用。在患者住院4 d開始腰穿，進(jìn)行脊髓鞘中注射間充質(zhì)干細(xì)胞，1次/周，1個(gè)療程為4周，治療過程中應(yīng)輔助地塞米松進(jìn)行蛛網(wǎng)膜下腔注射治療。治療中應(yīng)注重康復(fù)功能鍛煉。治療后進(jìn)行隨訪，觀察患者的治療效果及不良反應(yīng)的發(fā)生情況，主要的不良反應(yīng)為發(fā)熱、頭疼、腰痛等。

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理

采用SPSS13.0統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)描述與分析，采用t檢驗(yàn)，檢驗(yàn)水準(zhǔn)為0.05。

2 結(jié)果

2.1 臨床療效分析

對(duì)31例臨床神經(jīng)損傷的患者進(jìn)行有針對(duì)性的間充質(zhì)干細(xì)胞治療后，有效例數(shù)為24例，占77.42%，其他患者經(jīng)2 ～ 3療程的對(duì)癥治療均有不同程度的好轉(zhuǎn)，患者多表現(xiàn)為感覺或者運(yùn)動(dòng)功能明顯改善，對(duì)大小便的控制能力明顯增強(qiáng)。對(duì)研究人群進(jìn)行手術(shù)前后ASIA評(píng)分顯示，治療后1個(gè)月與治療前比較在痛覺、觸覺、日常生活能力和運(yùn)動(dòng)均有明顯的改善（P＜0.05），其中輕微性神經(jīng)損傷患者中有23例患者有效，占85.19%，嚴(yán)重性神經(jīng)損傷中治療顯示有1例患者治療有效，占25.00%。

2.2 治療有效時(shí)間與不良反應(yīng)

對(duì)研究人群神經(jīng)損傷時(shí)間分布情況分析顯示為（56.7±11.6）個(gè)月，最長時(shí)間197個(gè)月，最短時(shí)間17個(gè)月。研究人群中采用對(duì)癥治療過程中出現(xiàn)不良反應(yīng)主要為發(fā)熱、頭痛、后腰疼痛，采用對(duì)癥治療后3 d內(nèi)臨床癥狀基本消失，未出現(xiàn)其他不良反應(yīng)。

3 討論

間充質(zhì)干細(xì)胞是細(xì)胞生物學(xué)中干細(xì)胞家族中的重要組成成員，其來源于發(fā)育早期的胚胎的中胚層和外胚層[2]。其最初在人群的骨髓中發(fā)現(xiàn)，主要臨床特征為具有自我更新、多向分化、造血支持、免疫調(diào)控等特點(diǎn)，其臨床使用越來越引起人群的重視。在體內(nèi)或體外一定的誘導(dǎo)環(huán)境下可分化為脂肪、肌肉、心肌、肌腱、韌帶、肝、骨、軟骨、內(nèi)皮等多種人體組織細(xì)胞，采用連續(xù)傳代培養(yǎng)以及冷凍保存的方法可依然具有多向分化的潛能，臨床常作為理想組織器官損傷修復(fù)，尤其是神經(jīng)損傷[3]。臨床研究證實(shí)，采用間充質(zhì)干細(xì)胞還可以治療多種血液系統(tǒng)疾病、心血管疾病。神經(jīng)損傷包括腦外傷、腦血管硬化、腦溢血、腦血栓、后遺癥、腦炎與腦膜炎后遺癥、脫髓鞘疾病等腦血管病后遺癥。采用間充質(zhì)干細(xì)胞治療神經(jīng)損傷取得了良好的臨床效果，應(yīng)加強(qiáng)臨床推廣。

本研究中31例患者中有效的例數(shù)為24例，占77.42%，其他患者經(jīng)2 ～ 3個(gè)療程的對(duì)癥治療均有不同程度的好轉(zhuǎn)，患者多表現(xiàn)為感覺或者運(yùn)動(dòng)功能明顯改善，對(duì)大小便的控制能力明顯增強(qiáng)。對(duì)研究人群神經(jīng)損傷時(shí)間分布情況分析結(jié)果為（56.7±11.6）個(gè)月。臨床治療出現(xiàn)不良反應(yīng)主要為發(fā)熱、頭痛、后腰疼痛，采用對(duì)癥治療后基本消失，未出現(xiàn)其它其他不良反應(yīng)。提示本治療是安全的，可以改善大部分不完全性SCI患者的神經(jīng)功能，提高這些患者的生活質(zhì)量。

[1]Avanzini MA， Bernardo ME， Cometa AM， et al. Generation of mesenchymal stromal cells in the presence of platelet lysate： a phenotypic and functional comparison of umbilical cord blood- and bone marrow-derived progenitors [J].Haematologica， 2009， 94（12）：1649-1660.

[2]黃紅云.中樞神經(jīng)修復(fù)學(xué)[M].北京：科學(xué)出版社，2009：221-225，234-235.

[3]Okano H，Ogawa Y，Nakamura M， et al.Transplantation of neural stem cells into the spinal cord after injury[J].Semin Cells Dev Bio，2003，14（3）：191-198.