任 橋 李 麗 鄒本革 劉煥奇 張啟迪 徐 麗 畢可東*
(1.青島農(nóng)業(yè)大學(xué)動(dòng)物科技學(xué)院,青島 266109;2.青島農(nóng)業(yè)大學(xué)海都學(xué)院,萊陽(yáng) 265200;3.山東省萊陽(yáng)沐浴店畜牧獸醫(yī)工作站,萊陽(yáng) 265200)
假單胞菌病又稱貂銅綠假單胞菌病或貂出血性肺炎,是由假單胞菌屬中的銅綠假單胞菌引起的一種急性傳染病[1]。2011年10月11日江蘇某貂場(chǎng)出現(xiàn)發(fā)病癥狀。該廠共飼喂水貂900只,至請(qǐng)獸醫(yī)診斷時(shí)已經(jīng)死亡60多只,其中母貂死亡占死亡總數(shù)70%~80%,飼喂自家配制飼料,發(fā)病期間,未就診。畜主憑經(jīng)驗(yàn)曾飼喂多種藥物,均未見效。經(jīng)臨床癥狀、病理解剖及實(shí)驗(yàn)室檢查,該病癥被確診為由銅綠假單胞桿菌引起的出血性肺炎。
病程約1~2 d;發(fā)病期間出現(xiàn)咳喘現(xiàn)象,尿液稍黃;多數(shù)死前口鼻流血,倒地,呼吸急促,呈腹式呼吸;散發(fā),其他癥狀均不明顯。
整個(gè)肺區(qū)淤血、出血,切面流出大量血樣液體,肺門淋巴結(jié)腫大;肝臟稍發(fā)黃,邊緣稍?。黄⑴K腫脹,整個(gè)呈暗紅色,內(nèi)部均勻散在大量灰白色壞死點(diǎn);腎臟被膜易剝落,皮質(zhì)髓質(zhì)均呈暗紅色,稍腫;腸系膜淋巴結(jié)腫脹,出血。
取新鮮病死貂的心血、肝臟、肺臟、脾臟直接進(jìn)行涂片,進(jìn)行革蘭氏染色,顯微鏡下觀察,見有革蘭氏陰性桿菌,單在、成雙或成短鏈。
取眼屎和氣管分泌物稍許加入測(cè)試液中,混勻后滴入CDV檢測(cè)卡,數(shù)分鐘后觀察結(jié)果為陰性,排除犬瘟熱病的可能性。
3.3.1 細(xì)菌分離培養(yǎng) 無菌采取病死貂肺臟、肝臟、脾臟和腎臟接種于普通瓊脂平板,37℃培養(yǎng)24 h,可見表面光滑、濕潤(rùn)、微隆起、圓形中等大小的綠色菌落,挑取菌落接種于普通培養(yǎng)基進(jìn)行純培養(yǎng),得到綠膿桿菌的純培養(yǎng)物。將其純培養(yǎng)物分別接種于血瓊脂培養(yǎng)基和假單胞菌瓊脂B培養(yǎng)基上,37℃培養(yǎng)24 h,可見在血瓊脂上呈灰褐色菌落,菌落周圍出現(xiàn)溶血環(huán);假單胞菌瓊脂B培養(yǎng)基上呈綠色,可見該菌能產(chǎn)生溶于水的綠色色素。將菌落涂片鏡檢,發(fā)現(xiàn)革蘭氏陰性中等大小桿菌。
3.3.2 生化試驗(yàn) 該細(xì)菌能發(fā)酵葡萄糖、甘露醇、果糖、核糖,不能利用半乳糖、蔗糖、麥芽糖、肌醇、山梨醇,分解尿素,能形成硫化氫,氧化酶陽(yáng)性,靛基質(zhì)試驗(yàn)、M.R.及V-P試驗(yàn)均為陰性。根據(jù)以上試驗(yàn),鑒定細(xì)菌為銅綠假單胞桿菌。
3.3.3 動(dòng)物試驗(yàn) 選用6只健康小鼠作動(dòng)物試驗(yàn),每組3只,一組用分離的細(xì)菌24h肉湯培養(yǎng)物腹腔注射,另一組注射滅菌生理鹽水作為對(duì)照組,每只0.1ml。結(jié)果顯示,注射后對(duì)照組全部正常,接種細(xì)菌培養(yǎng)物的于24h內(nèi)全部死亡,剖檢后用肺臟和肝臟涂片、鏡檢,結(jié)果檢出大量革蘭氏陰性桿菌,經(jīng)鑒定為銅綠假單胞桿菌。
分別選擇阿米卡星、恩諾沙星、復(fù)方新諾明、丁胺卡那、先鋒霉素、氨芐青霉素G、氟苯尼考、氟哌酸、強(qiáng)力霉素、四環(huán)素、環(huán)丙沙星、新霉素、菌必治、多粘菌素B等15種藥物進(jìn)行藥敏實(shí)驗(yàn),其中環(huán)丙沙星、新霉素、多粘菌素B高敏,慶大霉素、恩諾沙星中敏,其他藥物均無明顯抑菌環(huán)。
綜合臨床癥狀,病理變化,實(shí)驗(yàn)室診斷,診斷該病為由綠膿桿菌引起的水貂出血性肺炎。
立即對(duì)病貂和有癥狀的貂進(jìn)行隔離;對(duì)籠舍、地面、糞便及時(shí)進(jìn)行消毒,飼槽和飲水槽徹底進(jìn)行清洗消毒,2次/d;對(duì)病死貂進(jìn)行深埋;使用新鮮飼料,加強(qiáng)飼養(yǎng)管理,提高貂的抗病力。
根據(jù)藥敏試驗(yàn)結(jié)果,在飼料中按臨床常規(guī)用量添加恩諾沙星、多粘菌素B或新霉素,2次/d,連用5~7 d。配合用葡萄糖、維生素C、維生素B進(jìn)行輔助治療。
貂銅綠假單胞菌病或貂出血性肺炎臨床上以呼吸困難、出血性肺炎和肺水腫、腦膜炎、敗血癥為特征。銅綠假單胞桿菌廣泛存在于土壤、水和空氣中,在正常人與動(dòng)物腸道和皮膚上亦有存在,也易從外傷、燒傷及尿道感染等發(fā)現(xiàn)。因具有多種致病因子而且有強(qiáng)侵襲力,因此,本菌并非潛在致病菌而是完全致病菌[2]。
水貂銅綠假單胞桿菌病傳染性強(qiáng),可通過多種途徑進(jìn)行傳播。為防止該病流行,應(yīng)對(duì)患病或帶菌水貂進(jìn)行嚴(yán)格隔離,并對(duì)被污染的籠子、地面和用具,進(jìn)行徹底反復(fù)消毒。此次水貂發(fā)病可能是因?yàn)樘鞖庾兓喽?,早晚溫差變化大,加之飼喂被綠膿桿菌污染的飼料導(dǎo)致水貂的抵抗力下降,為該病的發(fā)生創(chuàng)造了有利條件。發(fā)病后畜主擅自使用多種藥物治療,使之綠膿桿菌對(duì)多種藥物已產(chǎn)生耐藥性,加大了治療難度。因此,在這期間,加強(qiáng)飼養(yǎng)管理,注意環(huán)境的消毒,更換新鮮飼料,可以有效預(yù)防該病發(fā)生。為了減少藥物浪費(fèi)和經(jīng)濟(jì)損失,發(fā)病后應(yīng)立即到相關(guān)部門進(jìn)行診斷,通過藥敏試驗(yàn)確定敏感藥物進(jìn)行治療,才能收到顯著的防治效果。
[1]劉德福,趙燕,劉超.水貂爆發(fā)出血性肺炎的診治報(bào)道[J].2003,22(4):47-48
[2]曲海娜,鄒玲,劉文華,等.毛皮動(dòng)物細(xì)菌病流行病學(xué)調(diào)查及耐藥分析[J],中國(guó)動(dòng)物檢疫,2009(2):48-50