李安華，周志宏，沈 妍，2，楊耀文*

1云南中醫(yī)學(xué)院，昆明650500;2云南瑞升煙草技術(shù)有限公司，昆明650106

大苞鞘石斛化學(xué)成分研究

李安華1，周志宏1，沈 妍1，2，楊耀文1*

1云南中醫(yī)學(xué)院，昆明650500;2云南瑞升煙草技術(shù)有限公司，昆明650106

通過(guò)硅膠柱層析、純化，從大苞鞘石斛中分離得到5個(gè)化合物，利用理化性質(zhì)和波譜分析分別鑒定為鉤狀石斛素(1)、愉悅石斛素(2)、4'，5，7-三羥基-3'，5'-二甲氧基黃烷酮(3)、β-胡蘿卜苷(4)和β-谷甾醇(5)。所有化合物均為首次從大苞鞘石斛中分離得到。

大苞鞘石斛;化學(xué)成分

石斛為蘭科石斛屬Dendrobium植物，是我國(guó)名貴中藥。據(jù)文獻(xiàn)報(bào)道石斛屬植物中含有多糖、黃酮類(lèi)、生物堿、倍半萜類(lèi)等成分［1，2］。大苞鞘石斛Dendrobium wardianum Warner又名騰沖石斛，主要分布于中國(guó)云南東南部至西部以及緬甸、泰國(guó)和印度東北部等地的熱帶雨林中，屬附生蘭。

大苞鞘石斛花期3～5月，花色艷麗，是石斛蘭中花大、色艷，觀賞價(jià)值很高的種類(lèi)。其莖可作藥用，俗稱(chēng)扁黃草，性甘，微寒，具有益胃生津，滋陰清熱等功效。關(guān)于其化學(xué)成分的研究報(bào)道較少［3］，為闡明大苞鞘石斛藥材的藥用物質(zhì)基礎(chǔ)，本文對(duì)大苞鞘石斛莖的化學(xué)成分進(jìn)行了研究，從中分離得到5個(gè)化合物，通過(guò)理化及波譜數(shù)據(jù)，分別鑒定為鉤狀石斛素(1)、愉悅石斛素(2)、4'，5，7-三羥基-3'，5'-二甲氧基黃烷酮(3)、β-胡蘿卜苷(4)和β-谷甾醇(5)。以上化合物均首次從該植物中分離得到。

1 儀器和材料

NMR在氘代溶劑(pyridine-d5)中用Bruker AV-400或DRX-500核磁共振儀測(cè)定，化學(xué)位移δ用ppm表示，耦合常數(shù)JHz表示;電子天平(SHIMADZU;AVW12OD);用柱層析硅膠(青島海洋化工廠);硅膠G薄層板(青島美高);所用試劑為分析純。

實(shí)驗(yàn)材料采自云南保山龍陵縣河頭鄉(xiāng)，經(jīng)鑒定為蘭科植物大苞鞘石斛 Dendrobium wardianum Warner(鑒定人：楊耀文)，憑證標(biāo)本存放于云南中醫(yī)學(xué)院中藥學(xué)院標(biāo)本室。

2 提取與分離

大苞鞘石斛新鮮莖48 kg，切斷，干燥，用90%乙醇加熱回流提取3次，每次2 h，提取液減壓濃縮至無(wú)醇味，得5公斤粗浸膏。粗浸膏加水10 kg，攪拌混懸，依次用氯仿和乙酸乙酯各萃取3次，回收溶劑后得氯仿部分浸膏(150 g)，乙酸乙酯部分(110 g)。氯仿部分經(jīng)硅膠柱層析，以石油醚-丙酮(25∶1～5∶3)梯度洗脫，各流份再經(jīng)硅膠柱層析，用氯仿-甲醇(12∶1～4∶1)梯度洗脫，反復(fù)純化，得化合物1(31 mg)，2(21 mg)，3(28 mg)，4(37 mg)及5(34 mg)。

3 結(jié)構(gòu)鑒定

化合物1 無(wú)色針晶(甲醇)，mp.298～300℃; EI-MS(m/z)：294［M］+，161，149，147，139，137，135，121;1H NMR(pyridine-d5，500 MHz)δ：5.21 (1H，d，J=3.1 Hz，H-3)，4.99(1H，d，J=3.3 Hz，H-2)，4.27(1H，d，J=3.1 Hz，H-8)，2.92(1H，d，J =5.7 Hz，H-5)，2.52(1H，dd，J=3.3，15.2 Hz，H-7β)，2.51～2.53(1H，m，H-6)，2.21(1H，dd，J= 7.3，15.2 Hz，H-7α)，1.79(1H，m，H-12)，1.38(3H，s，H-10)，1.20(3H，d，J=6.6 Hz，H-14)，1.14(3H，d，J=6.6 Hz，H-13);13C NMR(pyridine-d5，125 MHz)δ：177.7(s，C-15)，170.3(s，C-11)，83.6(d，C-3)，82.4(d，C-2)，81.5(s，C-4)，74.2(s，C-9)，67.9(d，C-8)，52.5(d，C-5)，52.2(d，C-6)，43.4 (s，C-1)，34.5(t，C-7)，29.0(d，C-12)，21.2(q，C-10)，16.7(t，C-13)，16.0(t，C-14)。以上數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)報(bào)道一致［4-6］，故化合物1被鑒定為鉤狀石斛素(aduncin)。

化合物2 白色針晶(甲醇)，mp.296～300℃; EI-MS(m/z)：296［M］+，219，209，206，191，179，163，147;1H NMR(pyridine-d5，500 MHz)δ：5.13 (1H，d，J=3.4 Hz，H-3)，5.06(1H，s，9-OH)，4.78 (1H，d，J=3.5 Hz，H-2)，2.93(1H，d，J=6.2 Hz，H-5)，1.64(3H，s，H-10)，1.20(3H，d，J=6.4 Hz，H-13)，1.19(3H，d，J=5.2 Hz，H-14);13C NMR(pyridine-d5，125 MHz)δ：178.6(s，C-15)，178.3(s，C-11)，85.7(s，C-9)，84.1(d，C-3)，83.5(d，C-2)，81.6(s，C-4)，52.2(d，C-5)，50.8(s，C-1)，47.3 (d，C-6)，38.1(t，C-8)，30.3(t，C-7)，29.0(d，C-12)，25.8(q，C-10)，16.9(t，C-13)，16.1(t，C-14)。以上數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)報(bào)道一致［6］，故化合物2被鑒定為愉悅石斛素(amotin)。

化合物3 黃色粉末(氯仿-甲醇);EI-MS(m/ z)：332［M］+，180，167，153，124;1H NMR(pyridined5，400 MHz)δ：7.03(2H，s，H-2'，H-6')，6.44(1H，d，J=1.8 Hz，H-6)，6.50(1H，d，J=1.8 Hz，H-8)，5.50(1H，dd，J=2.5，13.1 Hz，H-2)，3.82(6H，s，3'，5'-OCH3)，3.35(1H，dd，J=13.3，17.0 Hz，H-3)，2.93(1H，dd，J=2.5，13.2 Hz，H-3);13C NMR (pyridine-d5，100 MHz)δ：196.6(s，C-4)，168.7(s，C-7)，165.3(s，C-5)，164.1(s，C-9)，149.3(s，C-3'，5')，135.2(s，C-4')，129.2(s，C-1')，105.3(d，C-2'，6')，102.9(s，C-10)，97.3(d，C-6)，96.2(d，C-8)，80.3(d，C-2)，56.4(q，2×OCH3)，43.7(t，C-3)。以上數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)報(bào)道一致［7］，故化合物3被鑒定為4'，5，7-三羥基-3'，5'-二甲氧基黃烷酮(4'，5，7-trihydroxy-3'，5'-dimethoxyflavanone)。

化合物4 白色粉末(氯仿-甲醇)，mp.290～293℃，化合物4與β-胡蘿卜苷樣品的混合熔點(diǎn)不下降。且經(jīng)TLC多種體系檢查，與樣品β-胡蘿卜苷的Rf值及斑點(diǎn)顏色相同，故化合物4確定為β-胡蘿卜苷(β-daucosterol)。

化合物5 無(wú)色針晶(石油醚-丙酮)，mp.142～143℃，化合物5與β-谷甾醇樣品的混合熔點(diǎn)不下降。且經(jīng)TLC多種體系檢查，與樣品β-谷甾醇的Rf值及斑點(diǎn)顏色相同，故化合物5確定為β-谷甾醇(βsitosterol)。

4 小結(jié)

本研究對(duì)大苞鞘石斛化學(xué)成分進(jìn)行了研究，首次從其莖中分離得到鉤狀石斛素、愉悅石斛素、4'，5，7-三羥基-3'，5'-二甲氧基黃烷酮、β-胡蘿卜苷、β-谷甾醇5個(gè)化學(xué)成分。這一研究結(jié)果為大苞鞘石斛的開(kāi)發(fā)和利用奠定了基礎(chǔ)。

1 Zhang GN(張光濃)，Bi ZM(畢志明)，Wang ZT(王崢濤)，et al.Advances in studies on chemical constitutents from plants of Dendrobium Sw..Chin Tradit Herb Drugs(中草藥)，2003，34(6)：附5-附8

2 Xia HX(夏鴻西)，Zhang M(張明).Progress on the chemical constitutent studies on plants of Dendrobium Sw.. Chongqing J Res Chin Drugs and Herbs(重慶中草藥研究)，1999，39：54-56.

3 Glomqvist L，Brand?nge S，Gawell L，et al.Studies on orchidaceae alkaloids.XXXVII.Dendrowardine，a quaternary alkaloid from Dendrobium wardianum Wr.Acta Chem Scand，1973，27：1439-1441.

4 Bi ZM(畢志明)，Mai JF(麥建峰)，Zhu L(朱琳)，et al. Study on chemical constituents of Dendrobium aduncum.Chin Pharm J(中國(guó)藥學(xué)雜志)，2006，41：9160-9162.

5 Gawell L，Leander K.The constitution of aduncin，a sesquiterpene related to picrotoxinin，found in Dendrobium aduncum.Phytochemistry，1976，15：1991-1992.

6 Dahmen J，Leander K.Amotin and Amoenin，two sesquiterpenes of the picrotoxane group from Dendrobium amoenum.Phytochemistry，1978，17：1949-1952.

7 Chang CL，Wang GJ，Zhang LJ，et al.Cardiovascular protective flavonolignans and flavonoids from Calamus quiquesetinervius.Phytochemistry，2010，71：271-279.

Chemical Constituents from Stem of Dendrobium wardianum

LI An-hua1，ZHOU Zhi-hong1，SHEN Yan1，2，YANG Yao-wen1*1Yunnan College of Traditional Chinese Medicine，Kunming 650500，China;2Yunnan Reascend Tobacco Technology Co.，Ltd.，Kunming 650050，China

Five compounds were isolated from the stem of Dendrobium wardianum by silica gel column chromatography methods，and identified by physicochemical properties and spectral data as aduncin(1)，amotin(2)，4'，5，7-trihydroxy-3'，5'-dimethoxyflavanone(3)，β-daucosterol(4)，and β-sitosterol(5).All of the five compounds were first reported in this plant.This study built the foundation for the development and utilization of this plant.

Dendrobium wardianum;chemical constituents

1001-6880(2012)04-0479-02

2010-09-21 接受日期：2011-03-10

云南省科技項(xiàng)目(高黎貢山藥用植物資源保護(hù)和珍稀瀕危藥用植物引種馴化研究)

*通訊作者 Tel：86-871-5918127;E-mail：yangyaowen@mail.kib.ac.cn

R284.2

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