李先承，李秀男，宋希雙

(大連醫(yī)科大學(xué) 附屬第一醫(yī)院 泌尿外科，遼寧 大連 116011)

1 MicroRNA-21概述

MicroRNA(miRNA)是一類長度為17～25 nt的單鏈非編碼RNA，平均長度22 nt，在植物和動(dòng)物中廣泛存在，具有很廣泛的調(diào)控作用，是高等植物、動(dòng)物生長發(fā)育的重要調(diào)節(jié)因子，進(jìn)化上高度保守。miRNA能夠通過與靶mRNA特異性的堿基配對(duì)引起靶mRNA的降解或者翻譯抑制，在細(xì)胞增殖、分化、凋亡、基因調(diào)控及疾病的發(fā)生，尤其是腫瘤的發(fā)生發(fā)展中起著重要的作用。miR-21在人類多種腫瘤組織中高表達(dá)，通過作用于多種靶基因，參與細(xì)胞增殖、分化、凋亡，與腫瘤生長、侵襲、轉(zhuǎn)移、耐藥等密切相關(guān)。人們對(duì)miR-21的興趣已在近年來急劇增加，本文對(duì)miR-21與實(shí)體腫瘤關(guān)系的研究進(jìn)展進(jìn)行綜述。

2 MiRNA-21在多種實(shí)體瘤中的表達(dá)

MiR-21是第一個(gè)在不同的細(xì)胞株中作為細(xì)胞調(diào)節(jié)抑制基因被記錄下來的。在隨后的來自540個(gè)人類樣本的大規(guī)模研究中發(fā)現(xiàn)，miR-21是在包括肺癌、乳腺癌、胃癌、前列腺癌、結(jié)腸癌和胰腺癌的6個(gè)實(shí)體性腫瘤中唯一過表達(dá)的miRNA。有研究顯示miR-21為一種致癌的miRNA，到目前為止在大多數(shù)癌癥類型分析中均發(fā)現(xiàn)存在過度表達(dá)[1]。

2.1 MiR-21與前列腺癌

前列腺癌是男性最常見的惡性腫瘤之一。有學(xué)者采集56例患者血清樣本，其中包括20例原位前列腺癌患者，20例雄激素依賴性前列腺癌(ADPC)患者，10例接受多西他賽治療的非雄激素依賴性前列腺癌(HRPC)患者以及6例良性前列腺增生患者。采用RT-PCR技術(shù)測(cè)定其血清中miR-21含量。結(jié)果顯示ADPC和HRPC患者血清中miR-21呈高水平表達(dá)，且與血清中前列腺特異抗原PSA呈正相關(guān)。而血清中miR-21含量在良性前列腺增生，原位前列腺癌及ADPC患者中無明顯差異。其中6名HRPC患者在接受多西他賽治療后，血清內(nèi)PSA水平下降50%以上并可得到部分緩解；而血清中miR-21增高的患者對(duì)多西他賽表現(xiàn)出明顯的抗藥性[2]。因此可以推測(cè)miR-21有可能成為前列腺癌向藥物抵抗轉(zhuǎn)化及化療藥物是否有效的一種標(biāo)志物。相關(guān)的研究發(fā)現(xiàn)雄激素非依賴性前列腺癌細(xì)胞株DU145和PC-3的反義寡核苷酸miR-21的失活，更容易導(dǎo)致細(xì)胞凋亡和抑制細(xì)胞轉(zhuǎn)移及侵襲，而細(xì)胞增殖卻沒有受到影響。確定富含十四酰丙氨酸蛋白激酶C(MARCKS)的底物可能作為前列腺癌細(xì)胞的一個(gè)新靶點(diǎn)，在細(xì)胞的轉(zhuǎn)移中起至關(guān)重要的作用。有數(shù)據(jù)表明，miR-21能促進(jìn)前列腺癌細(xì)胞的凋亡抵抗、轉(zhuǎn)移和侵襲，這些影響可能部分歸因于其對(duì)PDCD4、TPM1、和MARCKS的調(diào)節(jié)[3]。因此，抑制miR-21的基因療法或許對(duì)前列腺癌的治療非常重要。有研究發(fā)現(xiàn)基因轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物剪接位置的改變能激活雄激素受體[4]，此改變保留了腫瘤細(xì)胞對(duì)雄激素的依賴性，為進(jìn)一步治療前列腺癌增加了新的途徑。有研究者通過miRNA矩陣選擇，找出了包括miR-21在內(nèi)的16個(gè)雄激素誘導(dǎo)的miRNA。同時(shí)另有研究發(fā)現(xiàn)用Northern blot方法對(duì)雄激素受體陽性的前列腺癌細(xì)胞系進(jìn)行檢測(cè)可以分析miRNA對(duì)雄激素的敏感性。用染色體免疫共沉淀的方法發(fā)現(xiàn)了miR-21的啟動(dòng)子與激素依賴的雄激素受體相關(guān)聯(lián)[5]。Ribas等[6]發(fā)現(xiàn)了miR-21可增強(qiáng)前列腺癌細(xì)胞的增殖能力，在小鼠模型中，miRNA-21水平的提高加速了腫瘤細(xì)胞的形成和生長，誘導(dǎo)了去勢(shì)后非雄激素依賴型前列腺癌出現(xiàn)，表明活化的雄激素受體可直接誘導(dǎo)miR-21的表達(dá)，最終導(dǎo)致前列腺癌細(xì)胞增殖和去勢(shì)后的拮抗。這些研究結(jié)果為前列腺癌的治療開辟了新的方向。

2.2 MiR-21與乳腺癌

Lorio等[7]最先在乳腺癌組織活檢中發(fā)現(xiàn)mRNA的表達(dá)下降，同時(shí)有報(bào)道稱miR-21作為腫瘤組織中始終上調(diào)的mRNA中的一員，進(jìn)行性的增加腫瘤的分期，使用微陣列技術(shù)對(duì)正常組織和乳腺癌樣本中mRNA表達(dá)的研究發(fā)現(xiàn)，與正常組相比，miR-21在所有乳腺癌樣本中表達(dá)均上調(diào)；組織定位研究發(fā)現(xiàn)miR-21主要定位于管腔上皮細(xì)胞的胞液及正常乳腺組織的成纖維細(xì)胞中[8]。體外研究表明，乳腺癌細(xì)胞株MCF-7中使用序列特異性技術(shù)及被稱為化學(xué)修飾的寡核苷酸的抗miR-21來敲掉miR-21的基因，可導(dǎo)致細(xì)胞的生長與miR-21的含量呈劑量依賴性關(guān)系。為了研究miR-21在體內(nèi)腫瘤形成過程中的作用，將抗miR-21轉(zhuǎn)染成功的MCF-7細(xì)胞注入雌性小鼠的乳腺中，結(jié)果顯示被注射的細(xì)胞中miR-21表達(dá)的程度遠(yuǎn)遠(yuǎn)慢于對(duì)照組。這種腫瘤細(xì)胞增殖的減慢很有可能是由于選擇性的下調(diào)miR-21的表達(dá)而導(dǎo)致的低效率增殖或者加速其凋亡造成的。有研究發(fā)現(xiàn)E2(雌二醇)對(duì)miR-21的下調(diào)作用可被雌激素拮抗劑阻斷，從而可推斷E2對(duì)miR-21的下調(diào)作用是由ERα介導(dǎo)的。在ERα依賴性反應(yīng)過程中E2可使miR-21表達(dá)下調(diào)，而ERβ參與miR-21基礎(chǔ)表達(dá)水平的調(diào)節(jié)，進(jìn)一步研究發(fā)現(xiàn)，E2對(duì)miR-21的抑制作用與miR-21的靶點(diǎn)如PDCD4，PTEN和Bcl-2的上調(diào)密切相關(guān)。同時(shí)發(fā)現(xiàn)miR-21在男性和女性乳腺癌中的表達(dá)均高于正常乳腺組織，而且和乳腺癌進(jìn)展、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移以及生存時(shí)間相關(guān)。類似的，Smeets等[9]對(duì)96 例乳腺癌患者做了檢測(cè)，發(fā)現(xiàn)是否有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的兩組患者間的miRNAs表達(dá)存在差異。另外，Lehmann等[10]對(duì)9 例男性原發(fā)性乳腺癌患者腫瘤組織中的319 種 miRNAs 表達(dá)水平進(jìn)行檢查，結(jié)果發(fā)現(xiàn)miR-21、miR-519d、miR-183等5種miRNAs表達(dá)上調(diào)，其中miR-21上調(diào)最顯著。后來有體外實(shí)驗(yàn)證實(shí)，抑制MCF-7細(xì)胞中miR-21的表達(dá)可通過下調(diào)抗凋亡蛋白Bcl-2這一機(jī)制來減少細(xì)胞的體內(nèi)、外生長。此外，在乳腺癌細(xì)胞株MDA-MB-231中，骨形態(tài)發(fā)生蛋白-6(BMP-6)可有效的抑制miR-21的表達(dá)；而且BMP-6作為治療手段可有效逆轉(zhuǎn)PDCD4的抑制作用。同時(shí)離體實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)BMP-6可抑制miR-21介導(dǎo)的MDA-MB-231細(xì)胞的侵襲性[11]。Huang 等[12]研究發(fā)現(xiàn)MDA-MB-435 細(xì)胞可通過過表達(dá)HER2來上調(diào)miR-21水平進(jìn)而增強(qiáng)其侵襲性，這可能與最近報(bào)道的miR-21靶基因PDCD4和maspin有關(guān)。有研究者對(duì)59例原發(fā)性乳腺癌、30例轉(zhuǎn)移性乳腺癌以及29例健康女性血清中miR-10b、miR-34a、miR-141和miR-155的相對(duì)濃度進(jìn)行檢測(cè)，結(jié)果顯示以上4種miRNAs在乳腺癌患者血清中增高，并與腫瘤分級(jí)相關(guān)。與淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移陰性患者比較，淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移陽性的患者循環(huán)let-7a水平低，而與ER陽性患者比較，ER陰性患者的循環(huán)miR-10b和miR-21水平高。進(jìn)展期乳腺癌患者循環(huán)miR-21水平高于早期乳腺癌患者[13]。因此可以推測(cè)監(jiān)測(cè)血清中miR-21的水平可能成為乳腺癌診斷、治療及評(píng)估預(yù)后的一種新指標(biāo)。

2.3 MiR-21與結(jié)腸癌

使用原位雜交技術(shù)(IHC)和miR-21特定的鎖定核酸(LNA)probe的細(xì)胞和組織的定位方式表明miR-21在結(jié)直腸上皮細(xì)胞和結(jié)直腸腺癌成纖維細(xì)胞中高表達(dá)。在癌組織和細(xì)胞株中miR-21的表達(dá)水平與PDCD4蛋白表達(dá)水平呈負(fù)相關(guān)，這說明miR-21無論在體內(nèi)還是體外都是PDCD4的負(fù)調(diào)節(jié)因子[14]。

5種miRNAs(miR-20、miR-21、miR-106a、miR-181b和miR-203)在結(jié)腸癌樣本中過表達(dá)[15]。進(jìn)一步分析表明，在癌癥晚期階段更高的miR-21表達(dá)水平或其本身的高水平表達(dá)都與糟糕的預(yù)后、較差的治療反應(yīng)以及更快的疾病復(fù)發(fā)相關(guān)。增加的miR-21表達(dá)與癌癥分期、淋巴結(jié)和遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移的發(fā)展呈正相關(guān)[16]。終末期結(jié)腸癌患者的腫瘤特異性miR-21的高表達(dá)與抗癌藥物5-氟尿嘧啶(5-FU)治療反應(yīng)不佳和更快速地疾病復(fù)發(fā)相關(guān)[15]。令人驚訝的是，在結(jié)腸癌細(xì)胞株中使用5-FU治療后發(fā)現(xiàn)miR-21在腫瘤組織中的表達(dá)顯著上調(diào)[17]。這個(gè)意想不到的效果可能是由于腫瘤細(xì)胞對(duì)5-FU的治療產(chǎn)生了特異性防御機(jī)制。探索這種細(xì)胞防御機(jī)制可能為治療結(jié)腸癌提供一種新途徑。

2.4 MiR-21與肺癌

使用miRNA微陣列分析鑒定表達(dá)譜技術(shù)，測(cè)定成48對(duì)非小細(xì)胞肺癌與周圍非癌組織成熟miR-21的含量，結(jié)果顯示，miR-21的基因表達(dá)在肺癌組織中顯著上調(diào)，同時(shí)抑制凋亡基因產(chǎn)物表達(dá)，miR-21可能是通過下調(diào)腫瘤抑制因子原肌球蛋白1(TPM1)，發(fā)揮癌基因功能[18]，這與肺癌發(fā)生、預(yù)后和總存活數(shù)密切相關(guān)有關(guān)。Yanaihara等[19]研究了非小細(xì)胞肺癌患者血清中相關(guān)的一些miRNA,發(fā)現(xiàn)有12種特異性miRNA的表達(dá)上調(diào)，其中包括miR-21。此外，分別使用功能喪失的miR-21等位基因和功能獲得的miR-21等位基因的非小細(xì)胞肺癌小鼠進(jìn)行實(shí)驗(yàn)，結(jié)果顯示miR-21的過度表達(dá)增加了腫瘤的發(fā)生率，敲掉miR-21基因后可出現(xiàn)不完全的對(duì)抗腫瘤形成的效應(yīng)。miR-21的這種作用可能是通過抑制Ras/MEK/EMK信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)通路的負(fù)性調(diào)節(jié)元件如Spy1，Spy2，Btag2，PDCD4來實(shí)現(xiàn)的，且miR-21的靶基因?yàn)槎喾N抑癌基因如Pten，RhoB，APaf1，F(xiàn)as1g，并且抑制促凋亡基因的啟動(dòng)從而抑制細(xì)胞的正常凋亡[20]。

2.5 MiR-21與胃癌

有學(xué)者用探針實(shí)時(shí)定量PCR技術(shù)研究發(fā)現(xiàn)miR-21在人類胃癌組織和細(xì)胞株中顯著地過表達(dá)。然而，miR-21在被幽門螺旋桿菌感染的胃黏膜內(nèi)也明顯地過表達(dá)，這提示胃癌中miR-21的過表達(dá)也許部分歸因于幽門螺旋桿菌感染。更重要的是，miR-21的過表達(dá)增強(qiáng)了人胃癌細(xì)胞株AGS細(xì)胞的增殖能力和侵襲性；敲除miR-21基因后可導(dǎo)致細(xì)胞增殖的顯著降低和細(xì)胞凋亡的顯著上升，顯著降低AGS細(xì)胞的侵襲和轉(zhuǎn)移能力。幽門螺旋桿菌感染這個(gè)潛在的調(diào)節(jié)途徑通過上調(diào)miR-21的表達(dá)，導(dǎo)致RECK基因表達(dá)的抑制，最終導(dǎo)致胃癌的發(fā)生[21]。因此推測(cè)RECK作為一種眾所周知的胃癌腫瘤抑制因子，亦是miR-21的一種重要靶基因。使用芯片檢測(cè)胃癌組織和正常胃組織中的miR-21表達(dá)的研究發(fā)現(xiàn)，miR-21在胃癌組織中的表達(dá)顯著增加[22]。

2.6 MiR-21與胰腺癌

有學(xué)者為了評(píng)估m(xù)iR-21在胰腺癌發(fā)生發(fā)展及治療中的作用，分別在胰腺導(dǎo)管細(xì)胞癌的細(xì)胞株及人類癌組織中檢測(cè)mRNA-21的表達(dá)，結(jié)果發(fā)現(xiàn)高表達(dá)miR-21的患者生存率明顯低于低表達(dá)的患者。同時(shí)發(fā)現(xiàn)各種原代細(xì)胞株中miR-21表達(dá)的高低及對(duì)藥物治療的抵抗程度取決于該細(xì)胞株來源的組織。miR-21前體轉(zhuǎn)染可顯著降低抗腫瘤藥物的藥效并且顯著減低胞苷所誘導(dǎo)的細(xì)胞凋亡，而基質(zhì)金蛋白酶MMP-2/MMP-9及血管內(nèi)皮生長因子的表達(dá)明顯上調(diào)。添加肌醇磷脂3激酶和抗真菌類抗生素后可減低磷酸化AKt的水平，顯著改善miR-21前體所誘導(dǎo)的對(duì)抗癌藥物的抗藥性[23]。另有研究發(fā)現(xiàn)使用反義核苷酸來抑制miR-21的表達(dá)可改變腫瘤細(xì)胞周期，促進(jìn)腫瘤細(xì)胞的凋亡，并且可增強(qiáng)胞苷的抗癌藥效[24]。影響腫瘤細(xì)胞侵襲及轉(zhuǎn)移的因素如細(xì)胞凋亡程序的調(diào)整，蛋白激酶的磷酸化，基因表達(dá)的改變共同參與了miR-21在胞苷抗藥性中的作用，這些發(fā)現(xiàn)為胰腺癌靶向聯(lián)合治療提供了新的方法。

3 MiR-21在腫瘤中的調(diào)控機(jī)制

MiR-21是從Hela細(xì)胞株中克隆獲得的，在人類、大鼠、小鼠、魚及蛙類中具有高度保守性。miR-21位于第17號(hào)染色體蛋白編碼基因的第10個(gè)內(nèi)含子(TMEM49)上。而TMEM49的功能至今尚不清楚。藤田等對(duì)miR-21的基因表達(dá)進(jìn)行了大量的分析研究，結(jié)果顯示miR-21的基因表達(dá)受其自身啟動(dòng)子而非與TMEM49相互重疊的基因啟動(dòng)子調(diào)控。另有研究發(fā)現(xiàn)在人類早幼粒細(xì)胞株及HL-10中，miR-21的轉(zhuǎn)錄是被AP-1與SWI/SNF復(fù)合物共軛激活的，而TMEM49的基因表達(dá)未發(fā)生改變。公認(rèn)的miR-21的啟動(dòng)區(qū)域包含了3個(gè)AP-1結(jié)合位點(diǎn)和1個(gè)PU1的結(jié)合位點(diǎn)。使用計(jì)算機(jī)分析預(yù)測(cè)程序發(fā)現(xiàn)作為miR-21的一個(gè)靶基因的轉(zhuǎn)錄阻遏蛋白NFIB mRNA和miR-21啟動(dòng)子自身都包含了一個(gè)NFIB蛋白的保守集合位點(diǎn)。實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)顯示NFIB的降低與外源性miR-21的過表達(dá)相關(guān)，而miR-21抑制劑可使NFIB蛋白水平提高[25]。這些數(shù)據(jù)顯示了miR-21的啟動(dòng)子，miR-21分子本身及miR-21靶基因都參與了miR-21基因表達(dá)調(diào)控的反饋。

目前己發(fā)現(xiàn)和證實(shí)的miR-21相關(guān)靶基因有幾十種，其中絕大多數(shù)已被證實(shí)是直接調(diào)控的靶基因，如TPM1參與細(xì)胞骨架結(jié)構(gòu)形成，Maspin參與細(xì)胞膜相互作用，PDCD4抑制細(xì)胞生長，PTEN抑制細(xì)胞遷移和增殖[26]，Nanog及Octamer4維持胚胎干細(xì)胞的自我更新和多向分化潛能，SPRY2影響細(xì)胞向外生長、分支和遷移[27]，RECK抑制腫瘤的侵襲和轉(zhuǎn)移，STAT3調(diào)控轉(zhuǎn)錄和細(xì)胞運(yùn)動(dòng)性，APAF1調(diào)控細(xì)胞凋亡，HNRPK結(jié)合核酸，Tap63誘導(dǎo)細(xì)胞周期的停滯和凋亡[28]，SPRY1參與發(fā)育、調(diào)控信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)，WNT1參與細(xì)胞遷移、細(xì)胞分化等，BTG2抑制細(xì)胞增殖，LRRFIP1參與負(fù)調(diào)控轉(zhuǎn)錄[29]；少數(shù)為間接調(diào)控的靶基因，他們雖然不能直接被miRNA調(diào)控，但可通過其他的介導(dǎo)因子間接的被調(diào)控，如Bcl-2抑制細(xì)胞凋亡[26]，TIMP3參與胞外信號(hào)引導(dǎo)細(xì)胞凋亡等。miR-21對(duì)靶基因的調(diào)控方式隨著靶基因種類的不同而有所差異。miIR-21對(duì)部分靶基因可分別在mRNA和蛋白層兩個(gè)層面發(fā)揮調(diào)控作用，同時(shí)各種miRNA與其靶基因絕非簡(jiǎn)單的一對(duì)一調(diào)控模式，而是一種錯(cuò)綜復(fù)雜的網(wǎng)絡(luò)調(diào)控模式。各種miRNA可協(xié)同作用，或相互拮抗，從整體上調(diào)節(jié)機(jī)體細(xì)胞的各種生命活動(dòng)。

最新的研究數(shù)據(jù)表明miR-21表達(dá)具有高度復(fù)雜的調(diào)控機(jī)制，其中涉及獨(dú)立的miR-21啟動(dòng)子及多種轉(zhuǎn)錄因子，類固醇激素及信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)元件。對(duì)于miR-21基因表達(dá)調(diào)控的進(jìn)一步分析需要基因鑒定調(diào)控網(wǎng)絡(luò)及對(duì)miR-21基因表達(dá)調(diào)控的新的分子生物學(xué)機(jī)制的深入探討。

4 MiR-21與腫瘤的診斷

腫瘤的早期診斷和早期治療是決定腫瘤患者治愈率及預(yù)后的一個(gè)關(guān)鍵因素，臨床中最常用的檢查方法是影像學(xué)及血清標(biāo)志物檢驗(yàn)，而且目前常用的血清標(biāo)志物幾乎都是蛋白質(zhì)，檢測(cè)它們的傳統(tǒng)方法需要繁重的實(shí)驗(yàn)室勞動(dòng)，尚沒有任何基于血清的檢測(cè)廣泛適用于疾病的診斷[30]。哺乳動(dòng)物的血清血漿中存在miRNA，且血清中miRNA水平穩(wěn)定性高、重復(fù)性好，并且在同種生物的個(gè)體中的表達(dá)幾乎一致。循環(huán)核酸已被證明具有作為癌癥的非侵入性診斷標(biāo)志物的潛力。有學(xué)者通過比較彌漫性大B細(xì)胞淋巴瘤(DLBCL)患者(n=60)和健康對(duì)照組(n=43)血清中miR-21等的水平來研究microRNAs是否也能作為診斷腫瘤的指標(biāo)。結(jié)果提示實(shí)驗(yàn)組血清中的miR-21水平顯著高于對(duì)照組。此外，miR-21的高表達(dá)與無復(fù)發(fā)生存率相關(guān)[31]。這是第1次對(duì)循環(huán)miRNAs的描述，并且說明了miR-21有作為彌漫性大B細(xì)胞瘤及可能更多癌癥的非侵入性診斷性標(biāo)志物。另外，通過miRNA表達(dá)譜甚至還可以鑒定腫瘤的組織學(xué)類型[32]。不同腫瘤具有不同的miRNA表達(dá)模式，通過miRNA表達(dá)譜的分析，將有助于臨床上對(duì)腫瘤進(jìn)行診斷、分期及預(yù)后的估計(jì)，因此，miRNA將成為腫瘤早期診斷及預(yù)后評(píng)估的新靶標(biāo)，可作為多種疾病尤其是腫瘤診斷的非創(chuàng)傷性生物標(biāo)志物。

有研究使用miRNA芯片技術(shù)對(duì)卵巢上皮癌患者血清中的miRNA進(jìn)行了測(cè)定，發(fā)現(xiàn)卵巢癌患者和健康人血清中miRNAs的表達(dá)存在明顯差異，其中miR-21、92、93、126、29a、155、127和99b等8個(gè)miRNA的表達(dá)差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。另外，CA-125陰性的卵巢癌患者血清中，miR-21、92、93表達(dá)量顯著增高，并且發(fā)現(xiàn)miR-21、miR-92、miR-93在患者CA-125升高以前出現(xiàn)[33]，提示外周血中miRNAs檢測(cè)可用于卵巢癌的篩查診斷，其臨床價(jià)值可能優(yōu)于CA-125。

5 MiR-21與腫瘤的治療和預(yù)后

隨著對(duì)miRNAs在腫瘤發(fā)生發(fā)展中所起作用的深入認(rèn)識(shí)，人們更多的關(guān)注從miRNA入手研究開發(fā)新型抗癌藥物的新途徑，改變腫瘤中miRNAs的表達(dá)量被視為一種新的治療策略，主要包括引入抑癌基因性miRNAs、敲除或削減癌基因性miRNAs。miR-21作為目前唯一的在幾乎所有腫瘤中表達(dá)上調(diào)的miRNA，其參與了腫瘤細(xì)胞的增殖、遷移、侵襲以及腫瘤的血管生成等多個(gè)環(huán)節(jié)，并且在體外已經(jīng)證實(shí)與多個(gè)抗腫瘤藥物的敏感性有關(guān)。Gumireddy等[34]發(fā)現(xiàn)偶氮苯可作為miR-21生物合成特定有效的抑制劑。這些特異性miRNA抑制劑不僅是研究miRNA功能的獨(dú)特工具，而且是增強(qiáng)患者對(duì)現(xiàn)有化療或癌癥治療藥物應(yīng)答的試劑。有研究發(fā)現(xiàn)通過抑制miR-21的表達(dá)能夠增加膽管癌細(xì)胞對(duì)吉西他濱的敏感性。進(jìn)一步的研究顯示miR-21可能通過調(diào)節(jié)PTEN依賴的PI3K信號(hào)通路從而影響吉西他濱相關(guān)的細(xì)胞凋亡情況。miR-21過表達(dá)還降低腫瘤細(xì)胞對(duì)VM226、拓?fù)涮婵档瓤鼓[瘤藥物的敏感性[29-30]。同時(shí)發(fā)現(xiàn)偶氮苯可作為miR-21生物合成特定有效的抑制劑。這些特異性miRNA抑制劑不僅是研究miRNA功能的獨(dú)特工具，而且是增強(qiáng)患者對(duì)現(xiàn)有化療或癌癥藥物應(yīng)答的試劑。目前認(rèn)為，miR-21調(diào)控腫瘤細(xì)胞的多種藥物敏感性的機(jī)制主要與miR-21參與調(diào)控細(xì)胞周期，抑制細(xì)胞凋亡有關(guān)。

最近的研究結(jié)果顯示高水平的miR-21表達(dá)與預(yù)后差密切相關(guān)[36]，如Schetter等[15]在結(jié)腸癌的研究中發(fā)現(xiàn)miR-21可作為一個(gè)獨(dú)立有效的預(yù)后指標(biāo)，高表達(dá)者預(yù)后差；對(duì)接受輔助化療的Ⅲ期患者的觀察中發(fā)現(xiàn)miR-21高水平者預(yù)后要比低水平者差，提示miR-21可能是一個(gè)預(yù)測(cè)化療療效的指標(biāo)。但同時(shí)另有報(bào)道指出高水平的miR-21表達(dá)與預(yù)后無相關(guān)性或相反的結(jié)論[37]，如在胃癌的相關(guān)研究中發(fā)現(xiàn)miR-21雖呈現(xiàn)高表達(dá)，但并不影響預(yù)后。另有報(bào)道指出miR-21與胃癌的無復(fù)發(fā)時(shí)期和總生存率相關(guān)。同時(shí)有學(xué)者對(duì)49例胃癌患者的腫瘤組織檢測(cè)中發(fā)現(xiàn)miR-21的表達(dá)與腫塊大小和浸潤深度相關(guān)[38]。Dillhoff等[39]在胰腺癌研究中發(fā)現(xiàn)miR-21表達(dá)與腫瘤大小、分化、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移及T分期無關(guān)，但是在淋巴結(jié)陰性的亞組分析中，miR-21高表達(dá)則提示預(yù)后較差。為深入探討miR-21與腫瘤患者預(yù)后的相關(guān)性，有學(xué)者以“miR-21與腫瘤”和“miRNA與腫瘤預(yù)后”為關(guān)鍵詞收集了1996-2010年的17項(xiàng)研究數(shù)據(jù)進(jìn)行系統(tǒng)分析，結(jié)果顯示：在總體存活率的分析中發(fā)現(xiàn)各種腫瘤組織miR-21高水平表達(dá)的合并危險(xiǎn)比為1.69(P<0.001)，提示miR-21過表達(dá)降低患者存活率。

6 存在的問題與展望

MiR-21作為一類具有重要調(diào)控作用的內(nèi)源性小RNA分子廣泛參與了機(jī)體多種生物學(xué)過程的調(diào)控。由于miR-21幾乎參與了腫瘤發(fā)生發(fā)展的每一步過程，所以miR-21在腫瘤的診斷、預(yù)后、對(duì)化療藥物的療效預(yù)測(cè)以及治療的新靶點(diǎn)方面均有很好的應(yīng)用前景。然而人們對(duì)于miRNA的了解還十分有限，開發(fā)基于miRNA的診療手段還需要更多、更詳盡的研究。針對(duì)miRNA的作用機(jī)制，開發(fā)腫瘤特異性的診斷和治療藥物是研究的最終方向。此外，miRNA與臨床相關(guān)的研究領(lǐng)域起步時(shí)間尚短，且缺乏大量樣本及多中心的研究數(shù)據(jù)。相信不久的將來，隨著越來越多的可靠數(shù)據(jù)的產(chǎn)生，miRNA作為腫瘤診斷、治療、療效預(yù)測(cè)及預(yù)后判斷的重要分子標(biāo)志將可能會(huì)得到極大程度的認(rèn)可和推廣。

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