盧新生　茍如虎　劉伯渠　張海玲　王亞玲

摘要：對(duì)藏藥雪蓮（Saussurea involucrata）試樣進(jìn)行灰化處理，并采用紙色譜對(duì)試樣中礦質(zhì)元素Co、Ni、Cu和Fe進(jìn)行分離，采用紫外-可見分光光度法測(cè)定其含量，此方法具有操作簡(jiǎn)便，準(zhǔn)確及可靠等優(yōu)點(diǎn)，符合分析的技術(shù)要求。

關(guān)鍵詞：雪蓮（Saussurea involucrata）；紙色譜；紫外-可見光譜；礦質(zhì)元素

中圖分類號(hào)：O657.31文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼：A文章編號(hào)：0439-8114（2012）20-4619-02

清代《本草綱目拾遺》中稱雪蓮（Saussurea involucrata）“性大熱，能補(bǔ)精益陽”，《新疆中草藥》稱“雪蓮性溫、微苦，功能祛風(fēng)除濕”。雪蓮是珍貴的藥用植物，含有揮發(fā)油、生物堿、甾醇、多酚、糖、鞣質(zhì)、氨基酸、雪蓮內(nèi)酯以及Fe、Co、Ni和Cu等礦質(zhì)元素，具有除寒痰、壯陽補(bǔ)血、暖宮散瘀的功效，可治月經(jīng)不調(diào)，腎虛腰痛，祛風(fēng)濕，通經(jīng)活血等癥[1，2]。目前，測(cè)定雪蓮中Fe、Co、Ni和Cu等礦質(zhì)元素主要有原子吸收法[3-5]和絡(luò)合滴定法，前者所用儀器昂貴，后者測(cè)定結(jié)果重現(xiàn)性差。本研究采用紙色譜分離及紫外-可見分光光度法測(cè)定雪蓮中Fe、Co、Ni和Cu的含量，為快速分析藏藥雪蓮中的礦質(zhì)元素提供參考。

1材料與方法

1.1儀器和試劑

752型紫外-可見光柵分光光度計(jì)（上海第三分析儀器廠）；馬弗爐（上海必爾得儀器有限公司）；微量毛細(xì)滴管，噴霧器。

層析紙：將層析紙與盛有展開劑的燒杯置于干燥器中，蓋嚴(yán)，讓層析紙?jiān)谡归_劑飽和的空氣中放置24 h，備用。

展開劑為丙酮∶濃鹽酸∶水（90∶5∶5，V/V），各組分比嚴(yán)格控制，相關(guān)容器干燥，鹽酸和水量用移液管取。

顯色劑為二硫代乙二酰胺，分別配制濃度為5 μg/mL的CoCl2、NiCl2、CuCl2、FeCl3溶液和它們的混合液。試驗(yàn)用水均為去離子水，試劑均為AR級(jí)。

1.2方法

1.2.1試樣處理稱取1 g 雪蓮，于坩堝中烘干，先置于低溫電爐上炭化后，再轉(zhuǎn)入550 ℃馬弗爐中灰化2.5 h，取出冷卻，加入3.0 mL 濃HNO3溶解樣品，用去離子水定容至50 mL，備用。

1.2.2紙層析取13 cm × 16 cm濾紙為色譜紙，以16 cm邊為底邊，距離底邊2 cm處用鉛筆畫一條與其平行的基線，將紙折疊成8片，除左右最外兩片以外，在每片鉛筆線的中心位置依次寫上Fe3+、Co2+、Ni2+和Cu2+、混合物和未知樣品。用干凈的專用毛細(xì)管分別在色譜紙上點(diǎn)樣，每試樣的斑點(diǎn)直徑小于0.5 cm，自然干燥后，于層析筒內(nèi)層析，其中展開劑液面應(yīng)略低于色譜紙上鉛筆線，仔細(xì)記錄在層析過程中產(chǎn)生的現(xiàn)象。

1.2.3顯色當(dāng)展開劑前沿上升離色譜紙頂部2 cm處停止色譜，取出色譜紙，用鉛筆標(biāo)記展開前沿位置。在通風(fēng)櫥內(nèi)自然干燥色譜紙，干燥后在濃氨水瓶口熏5 min，然后噴霧器噴灑二硫代乙二酰胺顯色，層析紙從上到下得到4個(gè)清晰的斑點(diǎn)：Fe（棕黃）、Cu（灰綠）、Co（黃）和Ni（深藍(lán)）。

1.2.4色譜紙?zhí)幚盹@色后，分別剪下標(biāo)準(zhǔn)和試樣斑點(diǎn)，放入800 ℃的馬弗爐灰化15 min，冷卻后加入5 mL濃硝酸，加熱溶解。

1.2.5吸收曲線繪制分別取5 μg/mL CoCl2、NiCl2、CuCl2和FeCl3標(biāo)準(zhǔn)溶液12 mL，定容至50 mL，分別加入1-亞硝基-2-萘酚-3，6磺酸、丁二酮肟、銅試劑和磺基水楊酸2.5 mL后，以去離子水定容。用1 cm的吸收池，以試劑空白為參比，從460～640 nm每隔10 nm測(cè)定吸光度（520～580 nm，每隔5 nm測(cè)量1次），以波長(zhǎng)為橫坐標(biāo)，吸光度為縱坐標(biāo)繪制各溶液的吸收曲線，確定最大檢測(cè)波長(zhǎng)。

2結(jié)果與分析

2.1Co2+、Ni2+、Cu2+和Fe3+的混合液配制

4種標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)標(biāo)準(zhǔn)溶液的配制不能采用硝酸鹽溶液，須用其氯化鹽溶液，否則各組分的斑點(diǎn)不集中，影響測(cè)定判定。

2.2檢測(cè)波長(zhǎng)的確定

標(biāo)準(zhǔn)溶液在不同波長(zhǎng)下測(cè)定吸光度見圖1。

從吸收光譜圖可以確定出CoCl2、NiCl2、CuCl2和FeCl3標(biāo)準(zhǔn)溶液測(cè)量的最大波長(zhǎng)分別為560、580、560和520 nm。

2.3顯色劑的用量選擇

預(yù)試驗(yàn)表明，2.0～3.0 mL的顯色劑可使配合物的吸光度基本恒定，后續(xù)試驗(yàn)確定顯色劑使用體積為2.5 mL。

2.4標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制

用移液管分別吸取不同體積（0～12 mL）的5 μg/mL CoCl2、NiCl2、CuCl2和FeCl3標(biāo)準(zhǔn)溶液于50 mL容量瓶中，分別加入2.5 mL的1-亞硝基-2-萘酚-3，6磺酸、丁二酮肟、銅試劑和磺基水楊酸顯色劑，分別在560、580、560和520 nm測(cè)其吸光度（圖2）。

以吸光度y為縱坐標(biāo)，以離子濃度x為橫坐標(biāo)，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線（圖1），其中Co的標(biāo)準(zhǔn)曲線方程為y =0.092 7x-0.095 9（R2=0.999 5）；Ni的標(biāo)準(zhǔn)曲線方程為y=0.107 3x-0.103 6（R2=0.999 8）；Cu的標(biāo)準(zhǔn)曲線方程為y= 0.141 0x-0.136 6（R2= 0.999 9）；Fe的標(biāo)準(zhǔn)曲線方程為y=0.092 9x-0.093 0（R2=1.000 0）；其R2>0.999 0，表明該方法在0～1.2 μg/mL范圍內(nèi)的線性關(guān)系良好。

2.5方法的準(zhǔn)確度和精密度

用標(biāo)準(zhǔn)加入法對(duì)樣品進(jìn)行回收試驗(yàn)，雪蓮試樣平行測(cè)定6次，測(cè)定其吸光度，計(jì)算濃度，平均濃度和相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差，結(jié)果見表1。由表1可知，本方法的準(zhǔn)確度高。

3結(jié)論

本研究方法所用的儀器常見、操作簡(jiǎn)單、準(zhǔn)確，符合測(cè)定結(jié)果和分析的技術(shù)要求，適用于藏藥雪蓮等藥物中礦質(zhì)元素的分離與測(cè)定。從測(cè)定結(jié)果來看，藏藥雪蓮中Fe的含量較高，因此在補(bǔ)血方面具有較好的功效。

參考文獻(xiàn)：

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