鉺玻璃點(diǎn)陣激光嫩膚參數(shù)優(yōu)化的動(dòng)物實(shí)驗(yàn)

張淑蘭等

[摘要]目的：研究觀察鉺玻璃點(diǎn)陣激光不同能量密度、微孔密度參數(shù)組合方案與嫩膚療效之間的關(guān)系，為臨床合理選擇治療參數(shù)提供理論參考。方法：清潔級(jí)雌性昆明小鼠24只，隨機(jī)分成4組，每組6只：未照射對(duì)照組（A）、高能量密度/低微孔密度組（B）、中能量密度/高微孔密度組（C）、高能量密度/高微孔密度組（D）。用1550nm鉺玻璃點(diǎn)陣激光照射背部脫毛皮膚，每周1次，共8次。結(jié)果：與未照射對(duì)照組相比，各照射組真皮厚度、成纖維細(xì)胞計(jì)數(shù)、I型及III型膠原纖維和彈力纖維容積分?jǐn)?shù)均增加，嫩膚療效D組>B組>C組。結(jié)論：1550nm鉺玻璃點(diǎn)陣激光嫩膚療效安全可靠。選擇嫩膚治療參數(shù)時(shí)，在采用較高能量密度基礎(chǔ)上適當(dāng)提高微孔密度更有利于提高臨床療效。

[關(guān)鍵詞]點(diǎn)陣；鉺玻璃激光；嫩膚；能量密度；微孔密度

[中圖分類號(hào)]R730.57R332 [文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼]A[文章編號(hào)]1008-6455（2012）08-1315-04

鉺玻璃點(diǎn)陣激光亦稱鉺光纖激光，是非剝脫點(diǎn)陣激光的一種，波長為1 550nm和1 540nm兩種，目前在治療光老化、嫩膚和黃褐斑方面初步顯示出比非剝脫（非點(diǎn)陣）脈沖激光、強(qiáng)脈沖光和調(diào)Q-Nd：YAG激光更好的患者滿意度。然而，鉺玻璃點(diǎn)陣激光目前尚未在國內(nèi)臨床廣泛應(yīng)用，治療參數(shù)選擇和臨床療效評(píng)價(jià)仍停留在經(jīng)驗(yàn)水平，目前的研究主要為國外文獻(xiàn)資料，國內(nèi)臨床研究尚處于初步階段。為縮短研究周期，本實(shí)驗(yàn)應(yīng)用1550nm鉺玻璃點(diǎn)陣激光不同能量密度和微孔密度組合照射昆明小鼠背部皮膚，觀察照射前、后小鼠皮膚I型、III 型膠原纖維和彈力纖維的變化情況，以比較不同能量密度和不同微孔密度組合與臨床療效之間的關(guān)系，為臨床合理選擇治療參數(shù)提供理論參考。

1材料和方法

1.1實(shí)驗(yàn)動(dòng)物及分組方法：清潔級(jí)雌性昆明小鼠2～3月齡24只，由西安交通大學(xué)醫(yī)學(xué)院實(shí)驗(yàn)中心提供。隨機(jī)分成4組，每組6只：A組為未照射對(duì)照組，B組為高能量密度/低微孔密度組，C組為中能量密度/高微孔密度組，D組為高能量密度/高微孔密度組，見圖1。

1.2主要設(shè)備和試劑：1550nm鉺玻璃點(diǎn)陣激光治療儀（Sellas醫(yī)療版，韓國生產(chǎn)）?？辔端豳徸詮V東臺(tái)山化工廠；天狼星紅購自Sigma公司；間苯二酚購自 天津市科密歐化學(xué)試劑公司；1%酸性平紅購自北京化工廠。

1.3照射方法：A組：激光不照射，其余B、C、D三組每周照射1次，共8次。照射后皮膚微紅，約15～20min后紅斑消失，未見腫脹、滲出等（如圖2）。

1.4 取材及實(shí)驗(yàn)方法：照射8次后分別于1周、2周、4周、8周、12周在背部皮膚取材，應(yīng)用HE染色檢測真皮厚度和成纖維細(xì)胞計(jì)數(shù)；應(yīng)用苦味酸-天狼星紅染色檢測I型和III型膠原纖維容積分?jǐn)?shù)；應(yīng)用間苯二酚品紅法檢測彈力纖維容積分?jǐn)?shù)。

1.5 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理：數(shù)據(jù)采用不等距重復(fù)測量方差分析的分析方法對(duì)數(shù)據(jù)進(jìn)行分析，分析軟件為SPSS17.0，對(duì)數(shù)據(jù)的統(tǒng)計(jì)描述采用，檢驗(yàn)水準(zhǔn)α=0.05。

2結(jié)果與分析

3討論

點(diǎn)陣激光的作用機(jī)理為局灶式光熱作用[1]，由選擇性光熱作用原理擴(kuò)展而來。點(diǎn)陣激光按剝脫深度分為強(qiáng)剝脫（CO2激光）、中剝脫（Er：YSGG激光）、微剝脫（Er：YAG激光）和非剝脫（Er：Glass激光）4種[2]。點(diǎn)陣激光以有序或無序掃描方式，在病變組織上形成眾多直徑約100～150μm、深約400～1 000μm的柱狀微孔（微熱損傷區(qū)），微熱損傷區(qū)可誘導(dǎo)真皮組織損傷修復(fù)機(jī)制使膠原蛋白增生并重塑膠原纖維，以達(dá)到緊膚、嫩膚的治療目的[1，3-6]。

通常非點(diǎn)陣脈沖激光的臨床療效與能量密度、光斑直徑2個(gè)參數(shù)或能量密度、光斑直徑及脈寬3個(gè)參數(shù)合理組合有關(guān)，組合方案主要根據(jù)醫(yī)生的臨床經(jīng)驗(yàn)而定。而點(diǎn)陣激光的臨床療效除與以上三個(gè)參數(shù)有關(guān)外還與微孔密度有關(guān)，但目前臨床上應(yīng)用的點(diǎn)陣脈沖激光器其脈寬通常不可調(diào)，因此，點(diǎn)陣激光的臨床療效主要與激光能量密度高低和微孔密度（覆蓋率）組合密切相關(guān)。國外研究顯示，點(diǎn)陣激光治療的微孔覆蓋率可以通過能量高低和微孔密度的綜合效應(yīng)分析得出，Rahman等[7]推薦微孔低覆蓋率（5%～10%）及低能量密度（6mJ/cm2）用于非顏面部煥膚治療，而用微孔高覆蓋率（19%～27%）及高能量密度（8mJ～25mJ/cm2）治療中重度皺紋。Hu等[8]在應(yīng)用1 550nm鉺玻璃點(diǎn)陣激光治療萎縮性痤瘡瘢痕時(shí)發(fā)現(xiàn)，高能量密度/低微孔密度組與低能量密度/高微孔密度組療效沒有明顯差別，而Walgrave 等[9]采用1 540nm/1 550nm鉺玻璃激光同時(shí)治療6位光老化病人，發(fā)現(xiàn)低能量密度/高微孔密度治療時(shí)損傷區(qū)較淺，對(duì)色素性疾病療效較好，而高能量密度/低微孔密度治療時(shí)損傷區(qū)較深，但對(duì)皮膚質(zhì)地改善較明顯。Kono等[10]用1 550nm鉺玻璃點(diǎn)陣激光嫩膚時(shí)發(fā)現(xiàn)，與增加能量密度相比，增加微孔密度可能出現(xiàn)更大的副作用，病人的疼痛和停工期也增加，雖然臨床效果和病人滿意度增加，但增加微孔密度有可能增加滲出、紅斑和色沉等副作用。因此，認(rèn)為用高能量密度/低微孔密度療效較好。國內(nèi)文獻(xiàn)檢索尚未見類似報(bào)告。

本實(shí)驗(yàn)采用1 550nm非剝脫鉺玻璃點(diǎn)陣激光無序掃描照射脫毛小鼠背部分皮膚，按照射能量密度和微孔密度高、中、低組合，理論上有9個(gè)組合方案，如果按每個(gè)組合方案治療20例患者×5次（月）推算，臨床研究可能約需3年時(shí)間。為縮短研究周期和為臨床應(yīng)用提供理論參考，本組實(shí)驗(yàn)在9個(gè)組合方案中選擇了3個(gè)具有一定代表性的組合方案（高能量密度/高微孔密度、高能量密度/低微孔密度和中能量密度/高微孔密度）進(jìn)行篩選優(yōu)化。結(jié)果顯示在照射8次后各照射組小鼠真皮厚度、成纖維細(xì)胞計(jì)數(shù)、膠原纖維和彈力纖維均增加，增加幅度以高能量密度/高微孔密度組>高能量密度/低微孔密度組>中能量密度/高微孔密度組，并且各照射組間與未照射對(duì)照組間均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.01），這與Walgrave和Kono[9-10]的研究結(jié)果相似。

除彈力纖維外，本實(shí)驗(yàn)未發(fā)現(xiàn)各照射組真皮厚度、成纖維細(xì)胞計(jì)數(shù)和膠原纖維隨時(shí)間變化趨勢，分析其原因，我們初步認(rèn)為可能與真皮炎性水腫吸收、成纖維細(xì)胞和膠原纖維代謝較快，而彈力纖維代謝較慢和初次取材時(shí)間較晚等因素有關(guān)。

本實(shí)驗(yàn)結(jié)論提示：①1 550nm鉺玻璃點(diǎn)陣激光治療光老化及嫩膚療效肯定、可靠，如果停止治療后其療效有可能維持?jǐn)?shù)月仍不會(huì)反彈至術(shù)前水平；②治療參數(shù)的選擇建議在采用較高能量密度基礎(chǔ)上適當(dāng)提高微孔密度更有利于提高臨床療效；③雖然昆明小鼠皮膚較薄，與人類皮膚組織存在一定差異，但本結(jié)論對(duì)鉺玻璃點(diǎn)陣激光治療皮膚光老化和嫩膚的參數(shù)選擇仍具有一定參考價(jià)值。

[參考文獻(xiàn)]

[1]Manstein D， Herron G， Sink R， et al. Fractional photothermolysis： A new concept for cutaneous remodeling using microscopic patterns of thermal injury [J]. Lasers Surg Med， 2004，34（5）： 426-438.

[2]張淑蘭， 應(yīng)朝霞， 王永賢. 非剝脫性點(diǎn)陣激光在皮膚科的應(yīng)用[J]. 中國美容醫(yī)學(xué)，2012，1（21）： 154-158.

[3]Laubach HJ， Tannous Z， Anderson R， et al. Skin responses to fractional photothermolysis [J]. Lasers Surg Med， 2006， 8（2）： 142-149.

[4]Geronemus RG. Fractional photothermolysis： current and future applications [J]. Lasers Surg Med，2006，38（3）： 169-176.

[5]Ross EV. Nonablative laser rejuvenation in men [J]. Dermatol Ther， 2007， 20（6）： 414-429.

[6]Sachdeva S. Nonablative fractional laser resurfacing in Asian skin-a review [J]. J Cosmet Dermatol，2010， 9（4）： 307-312.

[7]Rahman Z， Alam M， Dover J. Fractional laser treatment for pigmentation and texture improvement[J]. Skin Ther Lett， 2006， 11（9）： 7-11.

[8]Hu S， Chen MC， Lee M， et al. Fractional resurfacing for the treatment of atrophic facial acne scars in Asian skin [J]. Dermatol Surg， 2009， 35（5）： 826-832.

[9]Walgrave S， Zelickson B， Childs J， et al. Pilot investigation of the correlation between histological and clinical effects of infrared fractional resurfacing lasers [J]. Dermatol Surg， 2008， 34（11）： 1443-1453.

[10]Kono T， Chan HH， Groff WF， et al. Prospective direct comparison study of fractional resurfacing using different fluences and densities for skin rejuvenation in Asians [J]. Lasers and Med， 2007， 39（4）： 311-314.

[收稿日期]2012-04-12[修回日期]2012-07-02

編輯/張惠娟