張麗麗 李雁

（黑龍江省中醫(yī)研究院心血管科，哈爾濱150036）

加味溫膽湯對實(shí)驗(yàn)性冠心病痰濁血瘀證家兔模型MMP-7的影響※

張麗麗 李雁

（黑龍江省中醫(yī)研究院心血管科，哈爾濱150036）

冠心??；加味溫膽湯；痰濁血瘀證

冠心病發(fā)病率逐年上升，嚴(yán)重威脅人類健康。冠狀動(dòng)脈粥樣硬化的過程是血管內(nèi)皮和心肌細(xì)胞發(fā)生炎性的改變所導(dǎo)致的疾病，因此對冠心病的防治具有十分重要的意義。近年來發(fā)現(xiàn)基質(zhì)金屬蛋白酶（MMP-7）在冠心病心絞痛的發(fā)生發(fā)展中可能起著重要作用，尤其在不穩(wěn)定斑塊周圍和血液中顯著增加。本文通過檢測冠心病動(dòng)物模型血清MMP-7含量，以探討其在冠心病發(fā)病中的作用機(jī)制。

1 材料與方法

1.1 實(shí)驗(yàn)藥物及試劑加味溫膽湯組成：半夏、陳皮、茯苓、甘草、膽星、竹茹、蒼術(shù)、元胡、丹參、川芎、赤芍、牛膝、黃芪等藥物。經(jīng)2次煎煮后，過濾、混合，分別濃縮成濃度為1∶1（2.4g生藥/ml）、2∶1（4.8g生藥/ml）、4∶1（9.6g生藥/ml）的水煎劑備用。

1.2 動(dòng)物模型制備及分組將4～5月齡雄性家兔40只隨機(jī)分成5組，每組8只，即空白組、模型組、中藥低劑量組、中藥中劑量組、中藥高劑量組?？瞻捉M普通飼料喂養(yǎng)，其余5組家兔均以高脂飼料喂養(yǎng)。高脂飼料配方：膽固醇1%，蛋黃粉15%，豬油15%，基礎(chǔ)飼料79%。在第35天施冠狀動(dòng)脈結(jié)扎術(shù)，予以30mg/kg戊巴比妥鈉腹腔注射麻醉，剪毛，常規(guī)消毒，開胸，暴露心臟于胸腔外，于冠狀動(dòng)脈左前降支完全結(jié)扎，心電圖監(jiān)測，以J點(diǎn)和T波顯著改變評(píng)價(jià)結(jié)扎是否成功。結(jié)扎后關(guān)胸，縫合，連續(xù)3d注射青霉素預(yù)防感染。造模成功后，中藥低、中、高劑量組分別以一定濃度的中藥灌胃，灌胃14天，同時(shí)模型組每日以等容積的生理鹽水灌胃。實(shí)驗(yàn)結(jié)束后處死動(dòng)物。

1.3 血清MMP-7檢測用ELISA法測定血清MMP-7水平，試劑盒購自R&D system公司。

2 結(jié)果

與空白組相比，各組家兔血清MMP-7水平明顯升高（P＜0.05）；與模型組相比，中藥高、中、低劑量組血清MMP-7水平明顯受到抑制（P＜0.05)；中藥高劑量組與中藥低劑量組相比，血清MMP-7水平抑制得更明顯（P＜0.05）。見表1。

3 討論

基質(zhì)金屬蛋白酶是一類具有共同生物特性的蛋白酶使細(xì)胞外基質(zhì)不斷的降解[1]，它們在斑塊的降解及血管基質(zhì)的再造中起著非常重要的作用[2]。動(dòng)脈粥樣硬化是冠心病發(fā)病的基礎(chǔ)，是一個(gè)血管炎性的過程，血管中的各種細(xì)胞均可分泌MMPs[3-6]，MMPs受炎癥過程的調(diào)節(jié)，促進(jìn)了動(dòng)脈粥樣硬化形成，近年來對于MMPs在冠心病領(lǐng)域中的作用研究相對較少，對于MMP-7的相關(guān)研究少之甚少。MMP-7貫穿了冠狀動(dòng)脈粥樣硬化斑塊形成的全過程[7]，主要存在于動(dòng)脈粥樣斑塊的損傷區(qū)域，MMP-7在動(dòng)脈粥樣斑塊形成中所作用的靶物質(zhì)不同而發(fā)揮不同的作用。本研究通過測定冠心病動(dòng)物模型血清MMP-7水平，與模型組相比，中藥高、中、低劑量組血液流變明顯受到抑制（P＜0.05）。由此提示，降低血清MMP-7水平對臨床治療冠心病具有積極的意義，同時(shí)對冠心病的診斷也具有重要的意義。

表1 各組家兔血清MMP-7水平變化的比較（±s）

表1 各組家兔血清MMP-7水平變化的比較（±s）

注：與正常組比較：★P＜0.05；與模型組比較：▲P＜0.05；與低劑量比較：●P＜0.05

組別例數(shù)MMP-7空白組8 2.46±1.03模型組8 7.52±1.51★中藥低劑量組8 5.81±1.08★▲中藥中劑量組8 4.64±1.73★▲中藥高劑量組8 3.05±1.76★▲●

[1]Visse R,Nagase H.Matrix metalloproteinases and tissueinhibitors of etalloproteinases∶structure,function,and biochemistry[J].Circ Res,2003,92∶827-839.

[2]Galis ZS,Khatri JJ.Matrix metalloproteinases in vascular remodeling and atherogenesis∶the good,the bad,and theugly[J].Circ Res,2002,90∶251-262.

[3]Henney AM,Wakeley PR,Davies MJ,et al.Localization of stromelysin gene expression in atherosclerotic plaques by in situ hybridization[J].Proc NatlAcad Sci USA,1991,88∶8154-8158.

[4]Brown DL,Hibbs MS,Kearney M,Loushin C,Isner JM.Identification of 92-kD gelatinase in human coronaryatherosclerotic lesions.Association of active enzymesynthesis with unstable angina[J].Circulation,1995,91∶2125-2135.

[5]Galis ZS,Sukhova GK,Kranzhofer R,et al.Macrophage foam cells from experimental atheroma constitutively produce matrix-degrading proteinases[J]. Proc NatlAcad Sci USA,1995,92∶402-406.

[6]Nikkari ST,O’Brien KD,Ferguson M,et al.Interstitial collagenase(MMP-1) expression in human carotid atherosclerosis[J].Circulation,1995,92∶1393-1398.

[7]Halpert I,Sires UI,Roby JD,et al.Matrilysin is expressed by lipid-laden macrophages at sites of potential rupture in atherosclerotic lesions and localizes to areas of versican deposition,a proteoglycan substrate for the enzyme[J].Proc NatlAcad Sci USA,1996,93∶9748-9753.

10.3969/j.issn.1672-2779.2012.14.109

：1672-2779（2012）-14-0158-01

：李雁

2012-05-16）

黑龍江省中醫(yī)藥科研項(xiàng)目[No：ZHY10-257]