林向東,韋加梅,鄒冬梅,任 萍,果 虹
(1、南京市浦口區(qū)疾病預(yù)防控制中心,江蘇 南京 210031;2、南京市浦口區(qū)婦幼保健所,江蘇 南京 211800)
婦科白帶涂片多功能染色液(即BTR)為一種液態(tài)雙試劑,是利用化學(xué)反應(yīng)分子之間的相互吸附原理:病原體、細胞等含有多種氨基酸,其極性基帶有不同的電荷,與帶不同電荷的染料親合,而染成不同的顏色,達到對細胞、病原形態(tài)的鑒別作用。用BTR 染色檢測發(fā)現(xiàn)淋病可疑患者,現(xiàn)將檢測情況報告如下。
1.1 檢測對象 581例淋病可疑患者,其中男89例,女492例,年齡18~77歲。
1.2 試劑來源
1.2.1 BTR (即婦科白帶涂片多功能染色液) 由湖南省株洲康樂檢測試劑有限公司提供。生產(chǎn)日期/批號為:2009年11月2 日/09、2011年11月15日/08,避光常溫保存,無需冷藏,有效期兩年。
1.2.2 生理鹽水 由浙江濟民制藥有限公司提供;Lot:09112543,EXP:201310。
1.3 檢測方法
1.3.1 BTR 染色方法 分泌物直接涂片,待干后,加R1 液(red)2 滴,染液蓋滿涂膜,染色5~10s,水洗;加R2 液(blue) 2~4 滴,染液蓋滿涂膜,染色10~20s,水洗。趁濕片用低倍鏡和高倍鏡檢查;待片干后,換油鏡仔細檢視。根據(jù)染色后淋球菌的形態(tài)加以判定:淋病奈瑟菌染黑藍色,呈典型的腎形相對雙球菌,可分散或成團出現(xiàn)于中性白細胞內(nèi)外。結(jié)果以腎形相對雙球菌,分中性白細胞內(nèi)外發(fā)報告。
1.3.2 清潔度 取陰道分泌物,用生理鹽水涂片,高倍鏡檢查,根據(jù)所含白細胞(膿細胞)、上皮細胞、桿菌、球菌的多少,分成Ⅰ~Ⅳ度。清潔度在Ⅰ~Ⅱ度內(nèi)視為正常,Ⅲ、Ⅳ度為異常[1]。
1.4 統(tǒng)計學(xué)方法 采用χ2檢驗。
2.1 陰道清潔度與淋病奈瑟檢出率,見表1。
2.2 581例淋病可疑患者檢查情況,見表2。
2.3 BTR 染色法淋病奈瑟菌檢出71例與細菌培養(yǎng)結(jié)果比較,見表3。
3.1 人類是淋病奈瑟菌的唯一宿主 淋病奈瑟菌對單層柱狀上皮和移行上皮敏感,通過淋病奈瑟菌菌毛的黏附因子黏附于有親和力的部位,如尿道、宮頸和輸卵管黏膜上皮,然后通過菌毛毒素(脂多糖、內(nèi)毒素)與補體,IgM等共同作用,在局部形成炎癥反應(yīng)[2]。淋病奈瑟菌感染后,黏膜上皮及粘膜下組織充血、水腫、滲出、壞死,上皮脫落,白細胞聚集形成膿液。因此,淋病奈瑟球菌常存在于女性陰道清潔度Ⅳ度的標本中。由表1可知,在女性陰道清潔度Ⅳ度的標本中淋病奈瑟菌檢出率達64.52%。
表1 陰道清潔度與淋病奈瑟菌檢出率
表2 581例淋病可疑患者檢查情況
表3 BTR 染色法淋病奈瑟菌檢出71例與細菌培養(yǎng)結(jié)果比較
3.2 由表2可知 BTR 染色結(jié)果,男性淋病奈瑟菌檢出率明顯高于女性(χ2=55.08,P<0.01),說明男性尿道取材特異性高。
3.3 由表3可知 用BTR 染色法檢出淋病奈瑟菌71例,與細菌培養(yǎng)結(jié)果比較,陽性檢出相差2例。這2例經(jīng)認真總結(jié)考慮是由于女性宮頸取材特異性低,宮頸分泌物中雜菌多,有的在形態(tài)上很象淋病奈瑟菌的緣故。
3.4 實驗對照結(jié)果分析表明 BTR 染色法淋病奈瑟菌陽性檢出結(jié)果與細菌培養(yǎng)結(jié)果基本一致(χ2=55.08,P<0.01)。由于BTR 染色法操作簡便,只需一臺顯微鏡即可開展項目、試劑含有固定劑和滅菌劑,且蒸餾水配制,不含甲醇;染色時間短,只需15~30s,2min 內(nèi)即可發(fā)出報告,細胞和病原體形態(tài)清楚,背景清晰,結(jié)果準確,陽性率高,因此我們認為BTR 染色法是初篩淋病的一個好方法。對于無條件開展淋病奈瑟菌培養(yǎng)的基層醫(yī)療單位和農(nóng)村特別經(jīng)濟適用,可以廣泛開展應(yīng)用。
[1]葉應(yīng)嫵,王毓三,申子瑜.全國臨床檢驗操作規(guī)程[M].第3.版南京:東南大學(xué)出版社,2006:324.
[2]叢玉隆,尹一兵,陳 瑜.檢驗醫(yī)學(xué)高級教程[M].北京:人民軍醫(yī)出版社,2010:878~879.