近紅外光譜分析法快速鑒別氫氯噻嗪片

張 英

(山西省食品藥品檢驗(yàn)所，山西太原 030001)

氫氯噻嗪屬于臨床常用藥物，有利尿和降血壓的作用，既可單獨(dú)應(yīng)用，也可與其他降壓藥合用以增強(qiáng)療效[1]。市場上經(jīng)常出現(xiàn)假冒偽劣氫氯噻嗪藥品，借助近紅外漫反射光譜技術(shù)(Near-infrared，NIR)和模式識(shí)別技術(shù)可更快、更有效地鑒別氫氯噻嗪的真?zhèn)?。此技術(shù)具有操作簡單、分析速度快、不破壞樣品、不需預(yù)處理、不消耗化學(xué)試劑、不污染環(huán)境的檢測特性[2～3]?，F(xiàn)分析如下。

1 儀器

采用德國BrukeRMatrix-F型近紅外光譜儀，Bruker公司OPUS5.0光譜分析軟件，日本島津UV-2450紫外分光光度計(jì)。

2 樣品

2010年山西省食品藥品檢驗(yàn)所國家評(píng)價(jià)抽驗(yàn)氫氯噻嗪片，共收集13家生產(chǎn)企業(yè)的25 mg和10 mg兩規(guī)格的108批次氫氯噻嗪片。所用樣品均經(jīng)已按《中國藥典》2005年版標(biāo)準(zhǔn)檢驗(yàn)確證[1]。

3 方法與結(jié)果

3.1 NIR圖譜的采集

Matrix-F型近紅外光譜儀光譜采集條件:以儀器內(nèi)置背景為參比，波數(shù)范圍12 000～4 000 cm-1，掃描累加次數(shù)32次，分辨率8 cm-1，每批次樣品重復(fù)測定3次，計(jì)算各批次平均光譜，再求出各生產(chǎn)廠家的平均光譜。

3.2 建立近紅外氫氯噻嗪定性模型

近紅外光譜不僅包含了樣品的化學(xué)成分信息，而且也可反映樣品的物理學(xué)形態(tài)(如晶型及粉體的粒度)。因此在建立鑒別方法時(shí)，將近紅外原始光譜圖(見圖1)經(jīng)二階導(dǎo)數(shù)加矢量歸一化處理(見圖2)，以降低儀器本身噪音及樣品粉體形態(tài)差異所帶來的干擾。利用OPUS 5.0軟件，用波長空間相關(guān)法建立各樣品近紅外光譜的鑒別數(shù)學(xué)模型(見圖2的C、D曲線)。模型參數(shù)選4 852～4 096 cm-1為特征譜段，經(jīng)驗(yàn)證選定平滑點(diǎn)為9，內(nèi)部驗(yàn)證匹配度均小于0.625的模型閾值，其中10 mg規(guī)格小于0.094模型閾值，25 mg規(guī)格小于0.34模型閾值。

3.3 模型的專屬性驗(yàn)證

定性模型建立后，按照方法設(shè)定的參數(shù)取與氫氯噻嗪結(jié)構(gòu)相近并為其主要降解產(chǎn)物的氯噻嗪(見圖2的E曲線)和含氫氯噻嗪的復(fù)方利血平片(見圖2的B曲線)與珍菊降壓片(見圖2的A曲線)3樣品，驗(yàn)證數(shù)學(xué)模型的專屬性。

圖1 近紅外原始光譜圖Fig 1 Near-Infrared Original Spectru m

圖2 二階導(dǎo)+矢量歸一化處理圖Fig 2 Second Derivative+VectoRNormalization Spectrum

3.4 模型半定量驗(yàn)證

近紅外光譜圖具有體現(xiàn)樣品處方、工藝及樣品質(zhì)量百分比等信息，將光譜數(shù)據(jù)用多元散射校正進(jìn)行預(yù)處理，運(yùn)用偏最小二乘法建立樣品模型(見圖3)，此模型能將不同規(guī)格的氫氯噻嗪片準(zhǔn)確區(qū)分。

圖3 氫氯噻嗪片10 mg、25 mg規(guī)格量分布圖Fig3 The Distribution of Hydrochlorothiazide Tablets with Different Specifications(10 mg，25 mg)

3.5 結(jié)果

本方法在樣品無損傷的前提下，通過氫氯噻嗪片定性模型快速鑒別出氫氯噻嗪片的真?zhèn)闻c規(guī)格，為氫氯噻嗪片公眾服用的安全性提供質(zhì)量監(jiān)控參考。

4 討論

本實(shí)驗(yàn)建立氫氯噻嗪片NIR快速鑒別方法，具有操作方便、快速準(zhǔn)確、專屬性強(qiáng)、樣品無損傷等特點(diǎn)。

NIR光譜影響因素較多，首先要控制好測定環(huán)境的溫濕度，每次采集光譜應(yīng)保證樣品與光纖充分接觸，減少光程差對(duì)測定結(jié)果造成較大影響，以提高測定結(jié)果的準(zhǔn)確性。

本實(shí)驗(yàn)確定的快速鑒別方法不僅適用于氫氯噻嗪原料，也適用于不同規(guī)格的氫氯噻嗪片的鑒別。

[1] 國家藥典委員會(huì).中華人民共和國藥典[M].北京:化學(xué)工業(yè)出版社，2005.

[2] SiesleRHW，Ozaki Y，Kawata S，et al.NeaRInfrared Spectroscopy:Principle Instruments and Application[M].Weinheim:Wiley-VCH，2002.

[3] Huck CW.Advances of Near-infrared Spectorscopy in Phytochemistry[J].NeaRInfrared Spectrosc，2002，43(10):491.