任旭榮 （青海省化隆縣動(dòng)物疫病預(yù)防控制中心 810900）

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青海省化隆縣牦牛弓形蟲病血清學(xué)調(diào)查

任旭榮 （青海省化隆縣動(dòng)物疫病預(yù)防控制中心 810900）

應(yīng)用間接血凝實(shí)驗(yàn)(IHA)方法對(duì)采自青海省化隆縣6個(gè)鄉(xiāng)鎮(zhèn)的120頭牦牛血清進(jìn)行了弓形蟲病血清學(xué)調(diào)查，以抗體效價(jià)≥1:64為陽性判定標(biāo)準(zhǔn)，結(jié)果檢出陽性17份，血清學(xué)陽性率為14.17%。

弓形蟲病 綿羊 血清學(xué)調(diào)查

弓形蟲病(toxoplasmosis)又稱弓形體病，是由剛地弓形蟲感染所引起的一種人畜共患寄生蟲病。其病原體是一種專性細(xì)胞內(nèi)寄生的致病原蟲，在自然界廣泛分布，寄主范圍廣，主要寄生在各種哺乳動(dòng)物和禽類。貓科動(dòng)物為弓形蟲病的終末宿主，哺乳動(dòng)物和鳥類為中間宿主，動(dòng)物感染率達(dá)10%~50%[1]主要侵害幼畜和新生仔畜，發(fā)病后常表現(xiàn)呼吸系統(tǒng)和神經(jīng)系統(tǒng)癥狀，也可引起母畜流產(chǎn)不孕等繁殖障礙，我國將弓形蟲病列為二類動(dòng)物疫病。近年來化隆縣牦牛適齡母牛流產(chǎn)比例逐年增高，呈地方性流行，流行面積大，發(fā)病率高，對(duì)養(yǎng)牛業(yè)造成很大經(jīng)濟(jì)損失。近幾年的研究表明，隨著布氏桿菌病的基本控制，弓形蟲病和衣原體病已造成牛流產(chǎn)的主要因素[2]。為此，筆者于2010年6~7月應(yīng)用IHA法對(duì)化隆縣的120頭牦牛進(jìn)行了弓形蟲病血清學(xué)調(diào)查，現(xiàn)報(bào)告如下。

1 材料和方法

1.1 材料

1.1.1 被檢血清 清晨出牧前采集化隆縣6個(gè)鄉(xiāng)鎮(zhèn)牦牛頸靜脈血120份，當(dāng)天送化驗(yàn)室，用離心機(jī)以2500r/min離心15min分離出血清，冷凍保藏備用。

1.1.2 診斷液 弓形蟲IHA抗原、陰陽性標(biāo)準(zhǔn)血清、稀釋液均購自中國農(nóng)科院蘭州獸醫(yī)研究所，由省動(dòng)物疫病預(yù)防控制中心提供。

1.1.3 器械 96孔110 “V”型反應(yīng)板、微量加樣器、微量震蕩器。

1.2 方法

1.2.1 加稀釋液 在微量反應(yīng)板上標(biāo)記陽性血清、陰性血清、空白和稀釋液對(duì)照排位置。用微量加樣器每孔加稀釋液0.075ml。

1.2.2 加血清 在微量反應(yīng)板的對(duì)應(yīng)位置加待檢血清，陰陽性對(duì)照血清各0.025ml。

1.2.3 稀釋 陰、陽性對(duì)照血清對(duì)倍稀釋至第7孔，待檢血清稀釋至第3孔。余孔為稀釋液對(duì)照。

1.2.4 加抗原 凍干抗原按說明書要求稀釋后以1500~2000r/min離心10min，棄去上清液，加等量稀釋液搖勻，至于4℃冰箱24h后使用，每孔家0.025ml，加完后將反應(yīng)板置于微量振蕩器震蕩1~2min，室溫下靜置4h或者置37℃恒溫箱1~2h后判斷結(jié)果。

1.3 結(jié)果判定

在對(duì)照陽性血清效價(jià)不低于1:1024，陽性對(duì)照血清除第一孔允許有前帶現(xiàn)象“+”外，其余各孔均為“—”稀釋液對(duì)照孔為“—”的前提下試驗(yàn)才成立，否則應(yīng)重做。待檢血清效價(jià)達(dá)到或超過1：64為陽性，以“++”為陽性終點(diǎn)。

2 結(jié)果

6個(gè)鄉(xiāng)鎮(zhèn)120份血清樣品的陽性率分別為：雄先20%、查甫15%、金源20%、塔加25%、巴燕0、扎巴5%，結(jié)果詳見附表。

附表 化隆縣不同鄉(xiāng)鎮(zhèn)牦牛弓形蟲病血清學(xué)調(diào)查結(jié)果表 (%)

鄉(xiāng)鎮(zhèn)雄先鄉(xiāng)查甫鄉(xiāng)扎巴鎮(zhèn)巴燕鎮(zhèn)金源鄉(xiāng)塔加鄉(xiāng)合計(jì) 被檢數(shù)(份)202020202020120 陽性數(shù)(份)43104517 陰性數(shù)(份)161719201615103 陽性率20.015.05.0020.025.014.17

3 討論

（1）本次調(diào)查共采集牦牛血清120份，檢測出牦牛弓形蟲病在化隆縣感染率為14.17%。在采集的不同鄉(xiāng)鎮(zhèn)都有分布，說明該病在化隆縣確有流行且普遍存在，此結(jié)果高于李英等[3]在互助縣牦牛弓形蟲病血清學(xué)調(diào)查結(jié)果(12.15%)。說明本病在化隆縣流行較重，應(yīng)引起當(dāng)?shù)孬F醫(yī)主管部門對(duì)本病的高度重視和盡早采取防治措施，嚴(yán)格實(shí)行檢疫淘汰制，力爭做到凈化本病，以減少對(duì)養(yǎng)殖業(yè)的經(jīng)濟(jì)損失。（2）從附表可見，化隆縣不同鄉(xiāng)鎮(zhèn)牦牛弓形蟲病感染情況存在著明顯的地區(qū)差異。查甫、雄先、金源、塔加4個(gè)鄉(xiāng)鎮(zhèn)的感染率明顯高于扎巴、巴燕兩個(gè)鄉(xiāng)鎮(zhèn)。分析其原因，查甫、雄先、金源、塔加4個(gè)鄉(xiāng)鎮(zhèn)為藏族鄉(xiāng)且是腦山地區(qū)，飼草缺乏，自然環(huán)境比較惡劣，經(jīng)濟(jì)條件較落后，屬于天然放牧地區(qū)。而扎巴和巴燕兩個(gè)鎮(zhèn)位于縣城周邊，自然環(huán)境與飼養(yǎng)條件較優(yōu)。腦山地區(qū)群眾每年兩季驅(qū)蟲積極性和主動(dòng)性高，也是放牧與舍養(yǎng)補(bǔ)飼相結(jié)合。據(jù)李宗文[4]等報(bào)道貓科動(dòng)物是本病的終末宿主，在本病傳播上具有重要意義。而化隆縣貓和狗也大都集中在上述四個(gè)藏族鄉(xiāng)，因此筆者建議加強(qiáng)飼養(yǎng)管理，在牦牛養(yǎng)殖地區(qū)限制貓科動(dòng)物的數(shù)量和限制貓科動(dòng)物與放牧牛群的接觸機(jī)會(huì)，對(duì)于牦牛弓形蟲病具有一定的防治意義，同時(shí)還應(yīng)鼓勵(lì)農(nóng)牧民對(duì)于飼養(yǎng)的貓科動(dòng)物積極采取驅(qū)蟲和加強(qiáng)飼養(yǎng)管理。

[1] 張宏偉. 動(dòng)物疫病[M]. 北京: 中國農(nóng)業(yè)出版社, 2001.

[2] 馬鳳蓮, 李永軍, 王義兆. 山羊流產(chǎn)病因調(diào)查[J]. 甘肅畜牧獸醫(yī)雜志, 2001, 37(18): 28-29.

[3] 李英, 李增魁, 圈華等. 青海省互助縣牦牛弓形蟲病血清學(xué)調(diào)查[J]. 中國動(dòng)物檢疫, 2010, 36(4): 18-19.

[4] 李宗文, 嚴(yán)生旺, 馬超英. 青海省烏蘭縣改良綿羊弓形蟲病血清學(xué)調(diào)查[J]. 青海畜牧獸醫(yī)雜志, 2006, 36(2): 23.

（2012–03–26）

S823.9+9

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1007-1733(2012)07-0068-02