青藤堿-環(huán)糊精包合工藝的優(yōu)化及包合常數(shù)測(cè)定

朱士龍，李 勇，林紅衛(wèi)，段友構(gòu),*

(1.吉首大學(xué)化學(xué)化工學(xué)院，湖南 吉首 416000；2.懷化學(xué)院化學(xué)化工系，湖南 懷化 418008；3.民族藥用植物資源研究與利用湖南省重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，湖南 懷化 418008)

青藤堿-環(huán)糊精包合工藝的優(yōu)化及包合常數(shù)測(cè)定

朱士龍1，李 勇1，林紅衛(wèi)2,3，段友構(gòu)1,*

(1.吉首大學(xué)化學(xué)化工學(xué)院，湖南 吉首 416000；2.懷化學(xué)院化學(xué)化工系，湖南 懷化 418008；3.民族藥用植物資源研究與利用湖南省重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，湖南 懷化 418008)

目的：考察青藤堿與環(huán)糊精形成包合物的最佳條件，測(cè)定青藤堿與不同環(huán)糊精的包合常數(shù)并進(jìn)行體外釋放研究。方法：通過(guò)單因素及正交試驗(yàn)確定青藤堿與不同環(huán)糊精形成包合物的最佳條件，并在此條件下利用相溶解度法測(cè)定青藤堿與β-環(huán)糊精、羥丙基-β-環(huán)糊精、γ-環(huán)糊精的包合常數(shù)，對(duì)包合物進(jìn)行體外釋放試驗(yàn)研究。結(jié)果：青藤堿與不同環(huán)糊精形成包合物的最佳條件為物質(zhì)的量的1:1、包合溫度50℃、包合反應(yīng)3h、包合反應(yīng)時(shí)溶液pH7，青藤堿與β-環(huán)糊精、羥丙基-β-環(huán)糊精、γ-環(huán)糊精的包合常數(shù)分別為501.1、150.0、600.3L/mol。結(jié)論：青藤堿與環(huán)糊精可以形成1:1型穩(wěn)定的包合物，以環(huán)糊精為載體制備的不同青藤堿-環(huán)糊精包合物相對(duì)于青藤堿具有明顯的緩釋作用。

青藤堿；環(huán)糊精；包合常數(shù)；正交試驗(yàn)設(shè)計(jì)；工藝優(yōu)化

環(huán)糊精是環(huán)糊精葡萄糖基轉(zhuǎn)移酶(cyclodexrtin glucosyl transferase，CGTaes)降解淀粉的產(chǎn)物。環(huán)糊精作為主體模型可以和不同系列的客體分子發(fā)生包合作用[1-2]，形成的包合物分子在物理、化學(xué)及生物活性等性質(zhì)上會(huì)發(fā)生很大改變[3-5]，環(huán)糊精的這種包合特性已廣泛應(yīng)用于食品、保健品、醫(yī)藥和化妝品等領(lǐng)域[6-10]。

青藤堿(sinomenine，SN)是從天然產(chǎn)物青風(fēng)藤中提取的一種生物活性成分。具有抗炎、免疫抑制、鎮(zhèn)痛、降壓、抗心律失常等多種生物活性[11-13]，目前廣泛應(yīng)用于保健品、醫(yī)藥工業(yè)。青藤堿本身易分解，對(duì)堿、光、熱不穩(wěn)定[14]，青藤堿存在的這些缺點(diǎn)對(duì)其作為藥品和保健品的貯存和應(yīng)用帶來(lái)了一定阻礙。本實(shí)驗(yàn)嘗試?yán)铆h(huán)糊精對(duì)青藤堿分子進(jìn)行包合，通過(guò)單因素及正交試驗(yàn)確定青藤堿與不同環(huán)糊精形成包合物的最佳條件，在此條件下利用相溶解度法測(cè)定青藤堿與β-環(huán)糊精、羥丙基-β-環(huán)糊精、γ-環(huán)糊精的包合常數(shù)，并對(duì)包合物進(jìn)行體外釋放研究，為青藤堿現(xiàn)有的劑型改進(jìn)提供參考。

1 材料與方法

1.1 材料與試劑

鹽酸青藤堿(批號(hào)100802，含量99.12%) 陜西森弗生物技術(shù)有限公司；β-環(huán)糊精(β-CD)(批號(hào)090412，含量98.00%) 陜西禮泉化工有限實(shí)業(yè)公司；羥丙基-β-環(huán)糊精(HP-β-CD)(批號(hào)100201，含量99.00%)、γ-環(huán)糊精(r-CD)(批號(hào)100701，含量98.50%) 上海源葉生物科技有限公司；氯霉素對(duì)照品 湖北省藥品檢驗(yàn)所提供；乳糖、微晶纖維素 天津市巴斯夫化工有限公司；羥丙基甲基纖維素(HPMC K15M) 上?？?lè)康包衣技術(shù)有限公司；硬脂酸鎂 上海運(yùn)宏輔料有限公司；甲醇為色譜純；實(shí)驗(yàn)所用到的其他化學(xué)試劑均為分析純；實(shí)驗(yàn)用水為二次蒸餾水。

1.2 儀器與設(shè)備

UV-2450紫外分光光度計(jì)、HPLC-10AT高效液相色譜儀(SPD-10AVP紫外檢測(cè)器)、AUW120D分析天平 日本島津公司；ZRD6-B藥物溶出儀 上海黃海藥檢儀器廠；ZDY單沖壓片機(jī) 上海第一制藥機(jī)械廠；KQ3200型超聲波清洗機(jī) 昆山市超聲儀器有限公司。

1.3 方法

1.3.1 青藤堿與環(huán)糊精的純化

對(duì)所購(gòu)鹽酸青藤堿和環(huán)糊精分別按照文獻(xiàn)[15-16]進(jìn)行純化處理。

1.3.2 測(cè)定波長(zhǎng)選擇

分別取青藤堿、β-環(huán)糊精、羥丙基-β-環(huán)糊精、γ-環(huán)糊精，加蒸餾水溶解，以蒸餾水作為對(duì)照，分別在紫外分光光度計(jì)200～500nm進(jìn)行掃描，β-環(huán)糊精、羥丙基-β-環(huán)糊精、γ-環(huán)糊精在此范圍內(nèi)均無(wú)吸收，青藤堿在265nm處有較大吸收，所以選擇265nm為青藤堿測(cè)定波長(zhǎng)。

1.3.3 標(biāo)準(zhǔn)曲線的制備

精密移取不同體積的青藤堿標(biāo)準(zhǔn)液至100mL容量瓶中用蒸餾水定容，配制一系列不同濃度的標(biāo)準(zhǔn)溶液。以蒸餾水為空白，在波長(zhǎng)為265nm處測(cè)定吸光度，以吸光度(A)對(duì)青藤堿濃度(c)繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。所得線性回歸方程為：A＝0.8580c＋0.0062，r＝0.9999，說(shuō)明青藤堿在0.2～5.0mmol/L內(nèi)線性關(guān)系良好。

1.3.4 環(huán)糊精與青藤堿包合物的制備

環(huán)糊精與藥物客體分子形成包合物的制備方法有多種，本試驗(yàn)利用溶液共混法制備不同環(huán)糊精與青藤堿的包合物。25℃條件下，按環(huán)糊精與青藤堿物質(zhì)的量比為1:1取樣，在不斷攪拌的條件下將青藤堿粉末緩緩加入到環(huán)糊精的飽和水溶液中，50℃條件下攪拌5h以確保包合反應(yīng)進(jìn)行完全。溶液經(jīng)0.45μm濾膜過(guò)濾冷卻至室溫后置于冰箱中4℃下放置48h，溶液底部有青藤堿環(huán)糊精的包合物結(jié)晶析出。

同時(shí)，按環(huán)糊精與青藤堿物質(zhì)的比1:1進(jìn)行簡(jiǎn)單機(jī)械攪拌均勻，作為物理混合物。樣品經(jīng)干燥后備用。

1.3.5 青藤堿含量測(cè)定方法

按照文獻(xiàn)[17]對(duì)包合物中的青藤堿含量進(jìn)行測(cè)定。色譜條件：十八烷基硅烷鍵合硅膠固定相柱；流動(dòng)相：甲醇-磷酸鹽緩沖液(5.0×10-3mol/L，60:40，V/V)；流速1mL/min；進(jìn)樣量10μL；柱溫25℃；內(nèi)標(biāo)為氯霉素；靈敏度0.02AuFs；檢測(cè)波長(zhǎng)265nm。

對(duì)照品溶液：精密稱取青藤堿適量溶于甲醇，ρ＝0.5mg/mL；包合物溶液：精密稱取不同環(huán)糊精與青藤堿包合物，溶于甲醇。溶液經(jīng)0.45μm微孔濾膜過(guò)濾，取濾液。

取一定量的對(duì)照品和內(nèi)標(biāo)物質(zhì)注入色譜儀中，測(cè)量對(duì)照品和內(nèi)標(biāo)物質(zhì)的峰面積，計(jì)算校正因子。再取含有內(nèi)標(biāo)物質(zhì)的青藤堿樣品溶液，注入色譜儀，計(jì)算青藤堿含量；同時(shí)，進(jìn)行青藤堿空白回收率測(cè)定；在測(cè)定包合物中青藤堿含量及空白回收率的基礎(chǔ)上，可計(jì)算出包合物中實(shí)際含有青藤堿量，計(jì)算包合率。

式中：As為內(nèi)標(biāo)物質(zhì)的峰面積；AR為對(duì)照品的峰面積；CR為內(nèi)標(biāo)物質(zhì)的濃度；Cs為對(duì)照品的濃度。

式中：AX為樣品峰面積；Cx為樣品的濃度； As為內(nèi)標(biāo)物質(zhì)峰面積；Cs為內(nèi)標(biāo)物質(zhì)的濃度；f為校正因子。

1.4 青藤堿-環(huán)糊精包合工藝條件的單因素及正交試驗(yàn)考察

因素水平的選擇：根據(jù)預(yù)試驗(yàn)及文獻(xiàn)[18]，青藤堿與環(huán)糊精的配比、包合時(shí)間、包合溫度及溶液pH值的選擇對(duì)包合物的形成有較大影響。因此選擇上述4項(xiàng)為考察因素，分別進(jìn)行單因素及正交試驗(yàn)設(shè)計(jì)。

單因素試驗(yàn)：按照1.3.3節(jié)中青藤堿與環(huán)糊精包合物的制備方法分別考察青藤堿與環(huán)糊精的配比、包合時(shí)間、包合溫度及溶液pH值等單因素對(duì)包合反應(yīng)的影響。

正交試驗(yàn)：在單因素試驗(yàn)基礎(chǔ)上，以上4因素，各取3個(gè)水平，進(jìn)行青藤堿-環(huán)糊精包合工藝正交試驗(yàn)，因素水平見(jiàn)表1。

表1 青藤堿-環(huán)糊精包合工藝正交試驗(yàn)因素水平Table 1 Factors and levels for orthogonal array design

1.5 環(huán)糊精對(duì)青藤堿的增溶作用

分別配制不同濃度梯度的β-環(huán)糊精溶液、羥丙基-β-環(huán)糊精溶液、γ-環(huán)糊精溶液，將純化后的青藤堿加入使之達(dá)到飽和，溶液經(jīng)0.45μm微孔濾膜過(guò)濾，稀釋相同倍數(shù)后利用紫外吸收光譜在265nm處測(cè)定吸光度。通過(guò)測(cè)定青藤堿的含量考察環(huán)糊精的種類和濃度對(duì)青藤堿溶解度的影響。

1.6 青藤堿與β-環(huán)糊精、羥丙基-β-環(huán)糊精、γ-環(huán)糊精的包合常數(shù)測(cè)定

環(huán)糊精與客體分子形成包合物的包合常數(shù)計(jì)算方法有多種[19]，通過(guò)測(cè)定包合常數(shù)可以深入探討環(huán)糊精分子對(duì)青藤堿的包合作用強(qiáng)度，并比較不同環(huán)糊精分子對(duì)青藤堿包合的差別。經(jīng)查閱相關(guān)資料結(jié)合本實(shí)驗(yàn)實(shí)際情況選取相溶解度法測(cè)定青藤堿與不同環(huán)糊精包合物的包合常數(shù)。分別配制不同濃度梯度的不同環(huán)糊精溶液，加青藤堿使之達(dá)到飽和，溶液經(jīng)0.45μm微孔濾膜過(guò)濾，稀釋相同倍數(shù)后利用紫外吸收光譜在265nm處測(cè)定其吸光度。

1.7 不同青藤堿-環(huán)糊精包合物的釋放度測(cè)定

為了更進(jìn)一步探究不同青藤堿-環(huán)糊精包合物與青藤堿的性質(zhì)差別，按照緩釋片制備處方分別制備了不同樣品的緩釋片并進(jìn)行體外釋放試驗(yàn)研究。體外釋放試驗(yàn)按照緩釋劑指導(dǎo)原則[17]進(jìn)行。精密稱取含相同青藤堿量的不同包合物與環(huán)糊精物質(zhì)的量比1:1的物理混合物以及青藤堿按β-CD包合物緩釋片處方制備緩釋片，所有樣品緩釋片均按照釋放度測(cè)定法參考文獻(xiàn)[17]方法，溶出介質(zhì)為磷酸鹽緩沖液，溫度(37.5℃±0.5℃)，攪拌轉(zhuǎn)速100r/min，分別在 5、10、15、20、30、60、120、180、300min時(shí)定位取樣5mL(同時(shí)補(bǔ)充等量相同溶出介質(zhì))，經(jīng)0.45μm微孔濾膜過(guò)濾后取續(xù)濾液適當(dāng)以磷酸鹽緩沖液稀釋，在波長(zhǎng)265nm處測(cè)定吸光度(A)，通過(guò)標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算不同樣品中青藤堿含量并計(jì)算青藤堿的累計(jì)釋放率。

2 結(jié)果與分析

2.1 不同條件對(duì)青藤堿-環(huán)糊精包合工藝的影響

2.1.1 單因素試驗(yàn)結(jié)果

圖1 環(huán)糊精與青藤堿的配比對(duì)包合率的影響Fig.1 Effect of molar ratio of cyclodextrins to sinomenine on inclusion rate

由圖1可知，隨著環(huán)糊精比例的升高，青藤堿包合率也隨著升高。開始階段包合率上升速度很快，當(dāng)青藤堿與環(huán)糊精物質(zhì)的量的比達(dá)到1:1左右時(shí)，再增加環(huán)糊精的比例，包合率不再增加，推測(cè)其可能原因是環(huán)糊精對(duì)青藤堿分子進(jìn)行包合時(shí)，青藤堿分子進(jìn)入環(huán)糊精分子的空穴中，環(huán)糊精和客體分子青藤堿之間需保持一定的主客體比，當(dāng)青藤堿與環(huán)糊精物質(zhì)的量的比達(dá)到1:1時(shí)，青藤堿分子基本上已經(jīng)被包合。

圖2 包合溫度對(duì)包合率的影響Fig.2 Effect of inclusion temperature on inclusion rate

由圖2可知，在一定范圍內(nèi)，隨著溫度的上升包合率呈上升趨勢(shì)。這是因?yàn)樯邷囟瓤梢约涌烨嗵賶A分子和環(huán)糊精分子的運(yùn)動(dòng)頻率，加快包合反應(yīng)的速度，但由于青藤堿分子不穩(wěn)定，超過(guò)80℃后青藤堿分子易發(fā)生分子重排，溶液變成黃色，故包合反應(yīng)時(shí)溫度一般不高于60℃。

圖3 包合時(shí)間對(duì)包合率的影響Fig.3 Effect of inclusion time on inclusion rate

由圖3可知，增加反應(yīng)時(shí)間可以提高青藤堿分子與環(huán)糊精分子的包合率，但時(shí)間超過(guò)300min時(shí)，包合率反而下降，推測(cè)其可能原因是青藤堿分子與環(huán)糊精分子進(jìn)行包合時(shí)是在電磁攪拌的狀態(tài)下進(jìn)行的，需要經(jīng)過(guò)一定時(shí)間才會(huì)反應(yīng)完全。包合物分子大多以分子間作用力結(jié)合，這種結(jié)合力比較弱，當(dāng)大多數(shù)青藤堿分子已經(jīng)被包合，繼續(xù)增加攪拌時(shí)間的話可能會(huì)破壞青藤堿-環(huán)糊精包合物分子間的作用力，使已經(jīng)包合的青藤堿-環(huán)糊精分子發(fā)生離解，降低包合率。

圖4 溶液pH值對(duì)包合率的影響Fig.4 Effect of medium pH on inclusion rate

由圖4可知，酸性條件和堿性條件對(duì)青藤堿與環(huán)糊精的包合作用均不利，原因是酸性或堿性條件下青藤堿分子中的羧基和羥基會(huì)發(fā)生電離，影響了與環(huán)糊精分子的包合作用。當(dāng)溶液pH7左右時(shí)，包合率達(dá)到最大值，說(shuō)明青藤堿與環(huán)糊精分子的包合反應(yīng)適宜在中性條件下進(jìn)行。

2.1.2 正交試驗(yàn)結(jié)果與分析

表2 青藤堿-環(huán)糊精包合工藝正交試驗(yàn)設(shè)計(jì)及結(jié)果Table 2 Orthogonal array design and experimental results

表3 方差分析Table 3 Analysis of variance for the experimental results of orthogonal array design

由表2、3可知，影響青藤堿與環(huán)糊精包合因素大小依次為A＞C＞B＞D；方差分析表明，A因素對(duì)青藤堿的包合影響最大。由直觀分析和效應(yīng)曲線圖可得最佳工藝條件為A2B2C2D2，即青藤堿與環(huán)糊精配比為1:1、恒溫40℃、電磁攪拌3h、pH7。

2.2 環(huán)糊精對(duì)青藤堿的增溶作用

將1.5節(jié)中不同樣品經(jīng)紫外分光光度計(jì)檢測(cè)后所得環(huán)糊精對(duì)青藤堿的增溶作用的光譜如圖5所示。

圖5 β-環(huán)糊精(a)、羥丙基-β-環(huán)糊精(b)、γ-環(huán)糊精(c)分別對(duì)青藤堿增溶的光譜圖Fig.5 UV absorption spectra showing the solubilizing effect of cylcodextrins on sinomenine

由圖5可知，隨著環(huán)糊精濃度的增加，青藤堿的溶解度逐漸增大，β-環(huán)糊精、羥丙基-β-環(huán)糊精、γ-環(huán)糊精對(duì)青藤堿均有明顯的增溶作用，β-環(huán)糊精、γ-環(huán)糊精對(duì)青藤堿的增溶作用明顯好于羥丙基-β-環(huán)糊精。

2.3 青藤堿與β-環(huán)糊精、羥丙基-β-環(huán)糊精、γ-環(huán)糊精的包合常數(shù)測(cè)定

由圖6可知，青藤堿的溶解度隨環(huán)糊精的加入呈線性增加，根據(jù)Benesi-Hildebrand公式，確定青藤堿與環(huán)糊精的包合計(jì)量比為1:1，則相溶解度方程為：

式中：[CD]為環(huán)糊精的總濃度；Y為CD存在下客體青藤堿的總濃度；S0為客體青藤堿分子的固有溶解度(曲線的截距)；K為包結(jié)物的形成常數(shù)。以客體濃度對(duì)CD濃度作圖，如圖6所示，由圖中斜率和截距可獲得包結(jié)物的形成常數(shù)K。K＝斜率/截距(1－斜率)。

圖6 青藤堿在不同環(huán)糊精溶液中的相溶解度圖(25℃)Fig.6 Effect of different cyclodextrins on the solubility of sinomenine in water at 25 ℃

青藤堿與不同環(huán)糊精形成的包合常數(shù)由表4給出，青藤堿與β-環(huán)糊精、羥丙基-β-環(huán)糊精、γ-環(huán)糊精的包合常數(shù)分別為501.1、150.0、600.3。

表4 青藤堿與不同環(huán)糊精的包合常數(shù)Table 4 Inclusion constants of sinomenine complexes with different cylcodextrins

2.4 包合物的釋放度測(cè)定

將青藤堿、不同物理混合物、不同環(huán)糊精包合物按照1.7節(jié)中體外釋放方法進(jìn)行實(shí)驗(yàn)后，所得青藤堿的累計(jì)釋放率按下式計(jì)算：

式中：w0為藥物含量/mg；Vt為介質(zhì)體積/mL；Vs為取樣體積/mg；ρn為t時(shí)間第n次測(cè)定時(shí)青藤堿的質(zhì)量濃度/(mg/mL)；∑ρn－1為前n－1次測(cè)出的青藤堿質(zhì)量濃度之和。體外釋放測(cè)定結(jié)果如圖7所示。

圖7 青藤堿、不同物理混合物及不同包合物的累計(jì)釋放度Fig.7 Cumulative releases (%) of sinomenine, physical mixtures and inclusion complexs

由圖7可以看出：在300min內(nèi)的9個(gè)時(shí)間點(diǎn)，不同環(huán)糊精包合物緩釋片的累計(jì)釋放率均比青藤堿顯著降低，青藤堿緩釋片在30min時(shí)已經(jīng)基本累計(jì)釋放完全，但含有相同量青藤堿的環(huán)糊精包合物緩釋片的累計(jì)釋放時(shí)間遠(yuǎn)大于青藤堿緩釋片的累計(jì)釋放時(shí)間，同樣比例的青藤堿與環(huán)糊精的物理混合物雖然在一定程度上也能改善青藤堿的釋放度，但其釋放度效果遠(yuǎn)不及包合物。實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明以環(huán)糊精為載體制備的不同青藤堿-環(huán)糊精包合物相對(duì)于青藤堿具有明顯的緩釋作用。

3 結(jié) 論

通過(guò)單因素及正交試驗(yàn)確定了青藤堿與不同環(huán)糊精形成包合物的最佳條件為青藤堿與環(huán)糊精的配比1:1、包合溫度50℃、包合反應(yīng)3h、包合反應(yīng)時(shí)溶液pH7，并在上述最佳工藝條件下進(jìn)行重復(fù)性和穩(wěn)定性實(shí)驗(yàn)，平行試驗(yàn)5次，平均包合率為83.2%。利用相溶解度法測(cè)定了青藤堿與β-環(huán)糊精、羥丙基-β-環(huán)糊精、γ-環(huán)糊精的包合常數(shù)分別為501.1、150.0、600.3。制備了青藤堿、不同物理混合物及不同包合物的緩釋片并進(jìn)行體外釋放研究。結(jié)果表明在此條件下青藤堿與環(huán)糊精可以形成較穩(wěn)定的包合物，β-環(huán)糊精、羥丙基-β-環(huán)糊精、γ-環(huán)糊精均可顯著增加青藤堿的溶解度，以β-環(huán)糊精、羥丙基-β-環(huán)糊精、γ-環(huán)糊精為載體制備的不同青藤堿-環(huán)糊精包合物均具有明顯的緩釋作用。本實(shí)驗(yàn)結(jié)論可為現(xiàn)有含青藤堿制劑的改進(jìn)提供參考。

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Optimization of Preparation Process for Sinomenine-Cylcodextrin Inclusion Complex and Its Inclusion Constant

ZHU Shi-long1，LI Yong1，LIN Hong-wei2,3，DUAN You-gou1,*
(1. College of Chemistry and Chemical Engineering, Jishou University, Jishou 416000, China；
2. Department of Chemistry and Chemical Engineering, Huaihua University, Huaihua 418008, China；
3. The Critical Laboratory of Hunan Province on Research and Utilization of Ethnomedicinal Plant Resources, Huaihua 418008, China)

Objectives: To investigate optimal conditions for inclusion complex formation between sinomenine and cylcodextrins and determine the inclusion constants and release in vitro of inclusion complexes prepared with different cyclodextrins. Methods:One-factor-at-a-time and orthogonal array design methods were employed for the optimization of inclusion complex formation conditions. The inclusion constants of sinomenine complexes with β -cylcodextrin (β -CD), hydroxypropyl-β -cyclodextrin(HP-β -CD) and γ -cyclodextrin (γ -CD) formed under optimal conditions were determined by the phase solubility method.Moreover, their release in vitro was tested. Results: The optimal conditions for forming sinomenine-cylcodextrins inclusion complexes were 1:1 of sinomenine-to-cylcodextrin molar ratio, 50 ℃ of temperature, and 3 h of reaction duration at pH 7. The inclusion constants of sinomenine-β-CD, sinomenine-HP-β-CD and sinomenine-γ-CD formed under these conditions were calculated as 501.1, 150.0, 600.3 L/mol, respectively. Conclusion: sinomenine and cylcodextrins can form stable inclusion complexes at a molar ratio of 1:1. Various inclusion complexes show remarkable sustained release effect on sinomenine.

sinomenine；cylcodextrins；inclusion constant；orthogonal array design；process optimization

TQ464.4

A

1002-6630(2012)08-0054-06

2011-03-24

國(guó)家自然科學(xué)基金面上項(xiàng)目(30870230)；湖南省自然科學(xué)基金項(xiàng)目(06JJ50020)；湖南省教育廳項(xiàng)目(09C760)；民族藥用植物資源研究與利用湖南省重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室開放基金項(xiàng)目(HHUW2010-68)；吉首大學(xué)研究生校級(jí)科研項(xiàng)目(11JDY052)

朱士龍(1986—)，男，碩士研究生，研究方向?yàn)樗幬锘瘜W(xué)分離分析及應(yīng)用。E-mail：elicss@163.com

*通信作者：段友構(gòu)(1954—)，男，教授，研究方向?yàn)樘烊划a(chǎn)物分離分析。E-mail：dyg110125@163.com